詳細(xì)介紹
預(yù)期用途
RSR 公司生產(chǎn)的甲狀腺過氧化物酶自身抗體(TPO Ab) RIA 檢測(cè)試劑盒僅用于定量檢測(cè)人類血清中甲狀腺過氧化物酶抗體。需專業(yè)技術(shù)人員操作。甲狀腺過氧化物酶(TPO)抗體與甲狀腺球蛋白(Tg)抗體的產(chǎn)生與甲狀腺的自身免疫性損傷有關(guān)。這些抗體的檢測(cè)在甲狀腺自身免疫疾病診斷及治療中具有重要的價(jià)值。
檢測(cè)原理
在RSR 的甲狀腺過氧化物酶抗體RIA 檢測(cè)方法中,標(biāo)準(zhǔn)品和稀釋后的血清在*步孵育中先與碘125 標(biāo)記的TPO 結(jié)合,一小時(shí)后在第二步中與加入的固相蛋白A 結(jié)合,使已形成的碘標(biāo)記抗原抗體復(fù)合物產(chǎn)生沉淀。一小時(shí)孵育后加入緩沖液,經(jīng)離心及棄去上清液后可去除未結(jié)合的標(biāo)記抗原。經(jīng)測(cè)定沉淀中碘125 的放射量可測(cè)得沉淀中胰島素抗體的濃度。
實(shí)驗(yàn)步驟
所有試劑除緩沖液外使用前需室溫放置(20-25℃)至少30 分鐘;所有試劑使
用前請(qǐng)混勻。
1.所有血樣請(qǐng)按1:20 使用緩沖液(C)稀釋。例如50μL 血清稀釋至1mL。請(qǐng)勿稀
釋標(biāo)準(zhǔn)品。
2.各自向做好標(biāo)記的測(cè)定管中加入50μL 患者血清和標(biāo)準(zhǔn)品。實(shí)驗(yàn)推薦進(jìn)行雙管。
3.每支管中加入50μL 碘125 標(biāo)記的TPO。準(zhǔn)備兩只額外的空管,向其中加入標(biāo)
記TPO 用以測(cè)定總計(jì)數(shù)。
4.蓋好測(cè)定管,使用渦旋攪拌器混勻每支測(cè)定管,在室溫下孵育一小時(shí)。
5.每支管中加入50μL 蛋白A。(總計(jì)數(shù)測(cè)定管除外)
6.重復(fù)步驟4.
7.每支管加入1mL 緩沖液(總計(jì)數(shù)測(cè)定管除外),混勻后在4℃下使用冷凍離心機(jī)
1500g 離心30 分鐘。
8.棄去上清液。使用gamma 計(jì)數(shù)器測(cè)量每支管(含總計(jì)數(shù)測(cè)定管)余下的沉淀中碘
125 的放射量,測(cè)量一分鐘。