質(zhì)量控制:用于食品、藥品、環(huán)境等領(lǐng)域中與 EHEC 相關(guān)檢測的質(zhì)量控制,如對檢測方法、培養(yǎng)基、試劑等進行質(zhì)量評估和驗證??沈炞C培養(yǎng)基對 EHEC 的生長支持能力、選擇性和特異性,確保檢測結(jié)果的準確性和可靠性。
方法驗證:在相關(guān)標(biāo)準方法的驗證中,作為標(biāo)準菌株確認檢測方法的準確性和可靠性,包括增菌、分離、鑒定等環(huán)節(jié)能否有效檢出 EHEC。例如在新的食品微生物檢測方法建立時,使用該菌株確定方法的檢出限、精密度等指標(biāo)。
實驗室能力評估:幫助實驗室評估自身的檢測能力和操作水平。定期使用該菌株進行實驗,可及時發(fā)現(xiàn)實驗過程中存在的問題,如操作是否規(guī)范、設(shè)備是否正常運行等,以保證微生物檢測結(jié)果的質(zhì)量,滿足相關(guān)法規(guī)和標(biāo)準的要求。
形態(tài)特征:革蘭氏陰性桿菌,大小約為 (0.4 - 0.7)μm×(1 - 3)μm,無芽孢,多數(shù)菌株有周身鞭毛,能運動,有菌毛1。
培養(yǎng)特性:兼性厭氧,在普通培養(yǎng)基上生長良好。最適生長溫度為 33 - 42℃,37℃繁殖迅速,44 - 45℃生長不良,45.5℃停止生長1。
生化特性:除不發(fā)酵或遲緩發(fā)酵山梨chun外,其他常見的生化特征與大腸埃希氏菌基本相似,但也有某些生化反應(yīng)不完quan一致,具有鑒別意義。例如,EHEC O157:H7 雖然有 uidA 基因,但其編碼的 β - 葡萄糖醛酸酶無活性,不能分解 4 - 甲基傘形酮 - β - D - 葡萄糖醛酸苷(MUG)產(chǎn)生熒光,即 MUG 陰性1。
通常采用西林瓶包裝,內(nèi)裝凍干粉。常見規(guī)格可能為 1 支 / 盒等,具體會因產(chǎn)品批次和銷售形式有所不同。
應(yīng)置于 - 20℃保存,避免反復(fù)凍融,以保持菌株的活性。若為短期保存,也可在 2 - 8℃下存放3。
復(fù)蘇:啟開前,用 75% 酒精棉消毒西林瓶表面。在無菌條件下,打開西林瓶膠塞,加入復(fù)蘇液,將凍干菌種制成懸浮液,然后用無菌滴管或移液器吸取適量,移至非選擇性固體培養(yǎng)基平板或液體培養(yǎng)基上,按推薦的培養(yǎng)條件進行培養(yǎng)和傳代保存。推薦的復(fù)蘇培養(yǎng)基為腦心浸液培養(yǎng)基,培養(yǎng)條件為 36℃±1℃,培養(yǎng) 24 - 48 小時。
培養(yǎng)和傳代:購買后應(yīng)在保質(zhì)期內(nèi)使用,復(fù)蘇后的菌種一般宜傳代 2 - 3 次后使用,菌種傳代 5 次后建議棄置。培養(yǎng)時需按照推薦的培養(yǎng)條件進行,保存溫度為 2 - 8℃,轉(zhuǎn)接頻率為一個月。