樣品的采集、制備和保存(七)
(2)植株樣品的制備測(cè)定易揮發(fā)、分解和轉(zhuǎn)化的待測(cè)組分,須用新鮮樣品。測(cè)定不易起變化的成分可用干燥樣品。
①新鮮樣品的制備。按實(shí)驗(yàn)要求,如需要分不同器官(例如葉片、葉鞘或葉柄、莖、果實(shí)等部分)測(cè)定,須將采回的植物樣品立即剪開,以免待測(cè)組分運(yùn)轉(zhuǎn)。植物樣品常帶有泥土、灰塵或沾有施用的肥料、農(nóng)藥等,分析前必須洗滌,然后將洗凈、擦干的鮮樣放入電動(dòng)高速組織搗碎機(jī)中,加入1~2倍的蒸餾水(或去離子水)搗碎,制成勻漿。含水量高的樣品,可不加水搗碎。含纖維多或較硬樣品,可先切碎成小碎片或小塊,用研缽研磨。鮮樣如需短期保存,須在冰箱中(一5℃)冷藏,以抑制微生物的活動(dòng)和防止揮發(fā)。
②干燥樣品的制備。干燥樣品的分析結(jié)果如需換算為鮮樣的含量時(shí),鮮樣經(jīng)洗凈、擦干后應(yīng)立即稱其鮮重,干燥后再稱其重。
新鮮樣品必須盡快干燥,以減少其化學(xué)和生物的變化。若需長(zhǎng)距離運(yùn)輸,包裝要松散些,包裝袋要透風(fēng),以免樣品因包裝過緊發(fā)熱增強(qiáng)呼吸作用而造成損失。殺酶和干燥要快,并要有足夠的高溫,但烘干的溫度又不能過高,以防止組織外部結(jié)成干殼而阻礙內(nèi)部水分的蒸發(fā)和可能引起組織的熱分解或焦化。因此一般須分兩步干燥,先將鮮樣在80~90℃鼓風(fēng)干燥箱中烘15~30min(松軟組織烘15rain,致密堅(jiān)實(shí)的組織烘30min),然后降溫至650C,逐盡水分。干燥時(shí)間須視鮮樣水分含量而定,通常為12~24h。玉米、高梁等多汁硬皮的莖稈不易烘干,可用鋒利的刀劈開,但注意勿使其汁液流出。
干燥的樣品用研缽或帶刀片的磨樣機(jī)進(jìn)行粉碎,并使全部過篩。磨樣和過篩都應(yīng)避免使樣品沾污,特別是測(cè)定微量元素時(shí)。測(cè)定鐵、錳的樣品,不要用鐵器研磨過篩;測(cè)定銅、鋅的樣品,不要用黃銅器械。一般以用瑪瑙研缽或瑪瑙球磨粉碎為好,特制的不銹鋼磨或瓷研缽也可選用。過篩可用尼龍篩。樣品過篩后須充分混勻,保存于磨口的廣口瓶中,內(nèi)外均應(yīng)貼放標(biāo)簽。
2、籽粒樣品的采集和制備
(1)籽粒樣品的采集
①?gòu)膫€(gè)別植株上采樣。谷類或豆類作物從個(gè)別植株上采取種子樣品時(shí),應(yīng)考慮栽培條件的一致性。種子脫粒后,去雜、混勻,按四分法縮分為平均樣品,質(zhì)量不少于25g。
②從大田采樣??砂凑罩仓杲M織樣品的采樣方法,選定樣株收獲后脫粒,混勻,用四分法縮分,取得約250g樣品。大粒種子,如花生、大豆、蓖麻、棉籽、向日葵等可取500g左右。采樣時(shí)應(yīng)選取*成熟的種子,因?yàn)椴怀墒斓姆N子其化學(xué)成分有明顯的差異。
③從成批收獲物中取樣。在保證樣品有代表性的原則下,可從散裝堆中設(shè)點(diǎn)隨機(jī)取樣,或從包裝中隨機(jī)扦取原始樣品,再用四分法或分樣器縮分至500g左右。
(2)籽粒樣品的制備將采取的籽粒樣品風(fēng)干,去雜和挑去不完善粒,用磨樣機(jī)或研缽磨碎,使之全部通過0.5~1mm篩,儲(chǔ)于廣口瓶中,貼好標(biāo)簽備用。
油料作物中的大粒種子,如花生、向日葵、棉籽等,應(yīng)去掉厚的果殼或種皮,只分析種仁。但棉籽種皮不易剝掉,可先用水浸濕4~6h,再用鋒利的小刀將種子切為兩半,取出種仁。為了防止油料作物種子在磨碎過程中損失油分,可從采取的樣品中用四分法縮分出少量樣品,于70~80℃干燥箱內(nèi)干燥15~18h,取出,在瓷研缽中用杵擊碎,不能研磨。大豆和其他含油少的種子則可以直接用磨磨碎,有時(shí)要磨2~3次,先粗碎,再細(xì)碎。
3、瓜果樣品的采集和制備
(1)瓜果樣品的采集所謂“瓜果”,這里是泛指果實(shí)、漿果和塊根、塊莖等。瓜果的成熟期延續(xù)很長(zhǎng),一般在主要成熟期采樣,必要時(shí)也可在成熟過程中采2~3次樣品,每次應(yīng)在地塊中隨機(jī)采取10株以上簇位相同、成熟度一致的瓜果組成平均樣品。平均樣品的果數(shù),較小的瓜果如青椒之類不少于40個(gè);番茄、洋蔥、馬鈴薯等不少于20個(gè);較大的瓜果如西瓜、大蘿卜、小蘿卜等不少于15個(gè)。重以1kg左右為宜。
(2)瓜果樣品的制備瓜果樣品的分析通常都用新鮮樣品。采回的樣品應(yīng)刷洗、擦干。大的瓜果或數(shù)量多時(shí),可均勻地切取其中的一部分,但要使所取部分中各種組織的比例與全部樣品相當(dāng)。當(dāng)樣品切成小塊用高速組織搗碎機(jī)打成勻漿,多點(diǎn)勺取稱樣。多汁的樣品液可在切碎后用紗布擠出汁液,殘?jiān)鬯楹笤倥c汁液一起混勻、稱樣。
4、水生植物的采集
如浮萍、眼子菜、藻類等,一般采集全株,若從污水塘或污染嚴(yán)重的河、塘中撈取樣品,須用清水沖洗干凈。
(二)動(dòng)物樣品的采集與制備
動(dòng)物樣品主要包括動(dòng)物的尿液、血液、糞便、毛發(fā)、指甲和臟器(肝、腎、膽、肺、胃、腸)等。在這些樣品中,血、尿和頭發(fā)比較容易采集,而且血和尿能反映機(jī)體對(duì)環(huán)境污染物的吸收和排泄情況。檢測(cè)頭發(fā)、指甲、脂肪等組織中的污染物,能反映毒物在機(jī)體內(nèi)的蓄積情況。有時(shí)腦、肺、肝、腎和骨等器官也是分析測(cè)定對(duì)象。
1、尿液的采集與制備
絕大多數(shù)毒物及其代謝產(chǎn)物主要由腎臟排出體外。收集尿液比較方便,而且不傷害動(dòng)物,所以尿液是zui常見的環(huán)境檢驗(yàn)對(duì)象。收集尿液的采樣瓶要用硝酸浸泡、蒸餾水洗凈、烘干后使用。采集時(shí)可將動(dòng)物放在代謝籠中,使動(dòng)物的尿液經(jīng)漏斗流人采樣瓶中。一般晨尿濃度較高,可一次收集,也可收集2h,甚至24h的尿液。
2、血液的采集與制備
血液可檢驗(yàn)微量金屬,如汞、鉛等,也可檢驗(yàn)微量非金屬,如氟等。一般多用耳緣靜脈取血,先去毛,要去凈毛,不傷皮膚,用體積分?jǐn)?shù)為75%的酒精擦動(dòng)物耳朵,如兔耳朵,用燈泡照射加熱使其血管充血,用大頭針從遠(yuǎn)心端刺破靜脈放血,用注射器抽血樣10mL,放入經(jīng)洗滌的裝有抗凝劑的硬質(zhì)玻璃試管中,用干棉球壓迫血管止血。將血樣放入冰箱中保存。然后再將血制成血清、血漿、無蛋白質(zhì)血濾液等。
3、毛發(fā)和指甲的采集與制備
毛發(fā)、指甲是機(jī)體的一個(gè)組成部分,是某些污染物的指示器和微量元素的儲(chǔ)存庫(kù),也是容易獲得的生物材料。采集時(shí)不能僅取二三根,必須取大量的頭發(fā),可用繩將幾個(gè)部位上的頭發(fā)扎成一股,再盡可能貼著頭皮將這股頭發(fā)剪下來。采集到的頭發(fā)和指甲樣品,要用中性洗滌劑處理,去離子水沖洗,再用乙醇洗滌,在室溫下充分干燥后裝瓶備用。但應(yīng)注意,清洗樣品過程中,既要洗凈樣品表面附著的污染物,又要不使樣品內(nèi)部的污染物溶出而流失。
4、組織和臟器的采集與制備
動(dòng)物組織與臟器是積累污染物重要而復(fù)雜的部位,對(duì)檢測(cè)毒物的毒性與毒性研究有指導(dǎo)意義。肝:剝離被膜,取右葉的前上方表層部在表面下幾厘米纖維組織豐富的部分作樣品。
胃:剝?nèi)ケ荒ぃ謩e取皮質(zhì)和髓質(zhì)部分,避免在皮質(zhì)與髓質(zhì)接合處采樣。心、肺、脾:根據(jù)研究與測(cè)定的需要而決定采集部位,心臟取心尖部、肺取右中葉、脾取一半作樣品。然后用剪刀迅速剪碎,再與適當(dāng)?shù)木彌_溶液混合,用組織勻漿器、絞肉機(jī)等制成勻漿。