CCC微型中空纖維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)是低成本小巧中控纖維生物反應(yīng)器系統(tǒng)，旨在為研發(fā)或可行性項(xiàng)目的驗(yàn)證，用于對(duì)批量克隆和培養(yǎng)基配方的測(cè)試，*將中空纖維技術(shù)應(yīng)用于實(shí)踐，還可用于能夠生產(chǎn)低濃度產(chǎn)物的 細(xì)胞株培養(yǎng)。

CCC微型中空纖維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)可用于優(yōu)化培養(yǎng)基配方和亞克隆的篩選工具，可對(duì)分泌的產(chǎn)物進(jìn)行濃縮，生長(zhǎng)在培養(yǎng)基中的產(chǎn)物且不被稀釋。細(xì)胞可自然長(zhǎng)至組織樣密度，即使從低分泌型的細(xì)胞株中也能收集和分析產(chǎn)物

 

1.1 MicroBrx低成本小巧中空纖維生物反應(yīng)器系統(tǒng)

1.1.1 MicroBrx:微升數(shù)量級(jí)的優(yōu)勢(shì)

1）高產(chǎn)出率：

MicroBrx 內(nèi)部螺旋狀空間 (IC) ，是中空纖維的內(nèi)部，僅占有總細(xì)胞培養(yǎng)體積的0.2毫升（相當(dāng)于面積0.003平方米）。功能是支撐固定細(xì)胞。MicroBrx 外部螺旋狀空間(EC)，是中空纖維的外部，占體積4.5毫升，功能是蓄積營(yíng)養(yǎng)和（或）基礎(chǔ)培養(yǎng)基的生長(zhǎng)補(bǔ)充。

IC和EC 之間由中空、半通透性（10-39 kDa MWCO）的纖維材料膜隔開(kāi)。這意味著僅有廢棄產(chǎn)物小分子如乳糖和氨能進(jìn)入到EC，而細(xì)胞本身也進(jìn)不去。作為交換，細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)物如葡萄糖和谷氨酸鹽則進(jìn)入IC，營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞。

在相對(duì)小容量的IC內(nèi)，MicroBrx可將每毫升5 x 10^6-7細(xì)胞（貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞）大約擴(kuò)增至2-5倍。因此，細(xì)胞產(chǎn)物邊分泌，邊被濃縮，避免了因更換EC中的培養(yǎng)基被稀釋。即使產(chǎn)物初來(lái)自于低分泌的細(xì)胞系，終得到的是濃縮的產(chǎn)物，可立即用于下游的應(yīng)用。

2）省時(shí)、省力

生長(zhǎng)在生物微反應(yīng)器鐘的細(xì)胞不需要耗時(shí)的細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程、更換培養(yǎng)液，接種后三天就可以收集。生物微反應(yīng)器只需裝滿(mǎn)培養(yǎng)基并內(nèi)置一個(gè)二氧化碳細(xì)胞孵箱即可。將細(xì)胞接種至IC空間后，EC空間里的培養(yǎng)基在第二天更換，待到第三天，可收集細(xì)胞并對(duì)細(xì)胞產(chǎn)物進(jìn)行分析。

由于包含培養(yǎng)基的EC空間比包含細(xì)胞的IC空間大，也不需更換EC培養(yǎng)基。大大節(jié)約了處理時(shí)間和添加培養(yǎng)基的成本。因此，MicroBrx 替代了耗時(shí)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)包括用培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿培養(yǎng)。由于檢驗(yàn)限是微數(shù)量級(jí)，MicroBrx 也節(jié)約了與復(fù)雜化合物和細(xì)胞檢測(cè)相關(guān)的成本。

3）低污染風(fēng)險(xiǎn)

在細(xì)胞培養(yǎng)和更換培養(yǎng)基過(guò)程中，T-flasks 和滾動(dòng)細(xì)胞培養(yǎng)瓶必須周期性打開(kāi)和獲取。 由于MicroBrx 擁有獨(dú)立且封閉的中空纖維生物反應(yīng)器，因此外露帶來(lái)的污染風(fēng)險(xiǎn)是有限的。 此外，整個(gè)MicroBrx是一次性的，無(wú)需清潔和消毒。

 

1.2系統(tǒng)組成：Biovest 生產(chǎn)的HFBrx系統(tǒng)由儀器和耗材組成。

 

 

3 MicroBrxs (用于細(xì)胞培養(yǎng))

12 擴(kuò)張器 (轉(zhuǎn)移培養(yǎng)基)

6 紅色 Male Luer 插頭 (‘紅色帽子’)

6 綠色 Male Luer 插頭 (‘綠色帽子’)

15無(wú)菌的 3-ml 注射器 (to hold/transfer media)

12 無(wú)菌的 20-ml 注射器(to hold/transfer media)

 

1.3 性能指標(biāo)

儀器	MicroBrx
替代物	T-flasks
規(guī)模	研發(fā)
實(shí)驗(yàn)需要的儀器	CO2 孵育箱，3-ml 和 20-ml 注射器
產(chǎn)量	僅用于研發(fā)

                 

1.4 應(yīng)用

Biovest生產(chǎn)的中空纖維MicroBrx（HFBrx）可成功培養(yǎng)懸浮或粘附細(xì)胞系，生產(chǎn)多種分泌蛋白，用于研發(fā)、生產(chǎn)、診斷和治療。

Biovest生產(chǎn)的HFBrx可培養(yǎng)的細(xì)胞系包括：

• 雜交瘤Hybridoma

• BHK

• MDCK

• 昆蟲(chóng)卵巢細(xì)胞

• CHO

• Vero

• 人胚腎293細(xì)胞株和其他

盡管單克隆抗體產(chǎn)HFBrx系統(tǒng)的生產(chǎn)的主要材料，其他分泌蛋白也可通過(guò)此方式生產(chǎn)。此外，HFBrxs越來(lái)越多被用于產(chǎn)生病毒和病毒樣顆粒的生產(chǎn)。CCC微型中空纖維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)