目錄:合肥恩派爾貿(mào)易有限公司>>Abnbio感受態(tài)細(xì)胞>>表達(dá) 感受態(tài)細(xì)胞>> ABG727-50KM71 酵母感受態(tài)細(xì)胞
| 參考價(jià) | ￥ 918 |
| 訂貨量 | ≥1包 |
| ￥918 |
| ≥1包 |
更新時(shí)間：2024-03-27 16:23:13瀏覽次數(shù)：289評(píng)價(jià)
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說(shuō)明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息，謝謝!
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50X100ul |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | ABG727-50 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,食品,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
| 主要用途 | 感受態(tài)細(xì)胞 |
簡(jiǎn)要說(shuō)明
YM4271菌株，MATa型，可直接轉(zhuǎn)化質(zhì)?；蚺cMATα型酵母菌株EGY48、Y187等通過(guò)mating操作進(jìn)行蛋白互作驗(yàn)證或篩庫(kù)試驗(yàn)。Transformation marker為：trp1，leu2，ura，報(bào)告基因?yàn)椋?HIS3。可用于酵母雙雜，酵母單雜或異源蛋白表達(dá)等試驗(yàn)。YM4271感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作pGADT7質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>104 cfu/μg DNA。
操作說(shuō)明
1、取需轉(zhuǎn)化質(zhì)粒5µg，酶切，回收；
2. 取一支無(wú)菌的1.5ml EP管，依次加入預(yù)冷的線性質(zhì)粒1-5µg（體積不高于15 µl），酵母促轉(zhuǎn)化劑10µl，100µl冰上融化的KM71感受態(tài)細(xì)胞，畢赤酵母轉(zhuǎn)化液500µl，輕輕翻轉(zhuǎn)混勻6-8次；
3. 30℃水浴30min，每15min輕輕翻轉(zhuǎn)混勻6-8次；
4. 每支加入20µl的二甲基亞砜；（用于提高轉(zhuǎn)化效率，也可不做）
5. 42℃水浴15min，每7.5min輕輕翻轉(zhuǎn)混勻6-8次；
6. 12000rpm瞬時(shí)離心棄上清，每支加1ml的YPGPlus（或YPG）于30℃復(fù)蘇1h；（用于提高轉(zhuǎn)化效率，也可不做）
7. 12000rpm瞬時(shí)離心棄上清，用100µl 0.9%NaCl重懸，涂板，30℃培養(yǎng)3-7d。
注意事項(xiàng)
1、使用酵母促轉(zhuǎn)化劑前，請(qǐng)把裝有酵母促轉(zhuǎn)化劑的管子在沸水中 煮沸5min，然后立即放在冰上，用后放在-20℃儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?/p>
2.轉(zhuǎn)化液低溫環(huán)境下會(huì)析出，請(qǐng)于常溫下溶解后使用。
3.轉(zhuǎn)化全程要無(wú)菌操作。
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
會(huì)員.png)
4
化工儀器網(wǎng)