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生物毒性測(cè)試儀說(shuō)明書

閱讀:2980        發(fā)布時(shí)間:2018-3-27

智能化生物毒性(污染)測(cè)試儀特點(diǎn)
DXY-3型智能化生物毒性(污染)測(cè)試儀是在DXY-2型 生物毒性(污染)測(cè)試儀基礎(chǔ)上改進(jìn),并加人智能化功能的新型號(hào)機(jī),與上同類產(chǎn)品相當(dāng),但是,價(jià)格低廉,發(fā)光菌能保證供應(yīng)。
該儀器是基于毒性物質(zhì)對(duì)特殊的發(fā)光細(xì)菌的發(fā)光度的抑制作用而設(shè)計(jì)的,它通過測(cè)定發(fā)光細(xì)菌發(fā)光度的變化,量度被測(cè)環(huán)境樣品中由重金屬和其它有機(jī)污染物所造成的急性生物毒性。與傳統(tǒng)的魚、蚤和其它水生生物作為生物檢測(cè)方法相比,發(fā)光細(xì)菌法簡(jiǎn)便、快速、靈敏、適應(yīng)性強(qiáng)、重復(fù)性好、精度高、費(fèi)用低、用途廣,凡有毒化合物、廢水、廢棄物的生物毒性均可測(cè)定。因此,它是對(duì)受污染環(huán)境的生物毒性檢測(cè)進(jìn)行初篩、監(jiān)測(cè)較為理想的工具,也是其他領(lǐng)域開拓新的實(shí)驗(yàn)測(cè)試方法的新工具。
該儀器可測(cè)量和顯示待測(cè)液的毒性含量,測(cè)量所得數(shù)據(jù)可存儲(chǔ),可一次存儲(chǔ)10組數(shù)據(jù),每組數(shù)據(jù)包含3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液測(cè)量值和3個(gè)待檢溶液的測(cè)量值,以便查看;同時(shí),可以上傳到計(jì)算機(jī),以便分析和長(zhǎng)期保存。儀器顯示界面由液晶顯示屏提供,儀器的控制輸入由按鍵實(shí)現(xiàn)。
該儀器2型機(jī)為中國(guó)環(huán)境監(jiān)測(cè)總站監(jiān)制產(chǎn)品。
該儀器測(cè)定方法為國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),標(biāo)準(zhǔn)號(hào):“GB/T15441-1995水質(zhì) 急性毒性的測(cè)定 發(fā)光細(xì)菌法”由中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社出標(biāo)準(zhǔn)文版。儀器標(biāo)準(zhǔn)號(hào):Q寧/KTS 01-93。經(jīng)過近三十年的不斷開發(fā),已經(jīng)在環(huán)境科學(xué)、微生物學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)菌學(xué)、生物化學(xué)和臨床檢驗(yàn)等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。
智能化生物毒性(污染)測(cè)試儀儀器用途
測(cè)定純化合物(包括有機(jī)分子、無(wú)機(jī)金屬離子)的急性毒性。
測(cè)定受污染水體(包括工業(yè)排放污水、礦山采礦和冶煉廢水、河水等水系)的急性毒性。
測(cè)定受污染土壤、河流和沿海帶底泥的急性毒性。
用于研究有毒元素以及化合物相互之間的相互作用-協(xié)同或拮抗效應(yīng)。
用于慢性反應(yīng)的化學(xué)發(fā)光分析等。
智能化生物毒性(污染)測(cè)試儀測(cè)試原理
測(cè)試原理:總體急性生物毒性。
明亮發(fā)光桿菌之所以發(fā)光,是由于菌的發(fā)光系統(tǒng)發(fā)生了如下反應(yīng):

    基質(zhì)

     ↓         ATP         ATP       ATP

還原型輔酶A → 黃素(H2) → 細(xì)胞色素 → 02

               ↓

        載氫黃素單核苷酸

   熒光酶(電子)↓

               02          RCH0  RCO0H

電子 → FMNH2 → 電子 → FMNH → 光+FMN+電子十H2O

                        ↓

                        OOH

                       黑暗↓

             電子十黃素單核苷酸十H2O2
當(dāng)細(xì)胞活性高,處于積極分裂狀態(tài)時(shí),細(xì)胞ATP含量高,發(fā)光強(qiáng);休眠細(xì)胞ATP含量明顯下降,發(fā)光弱;當(dāng)細(xì)胞死亡,ATP立即消失,發(fā)光停止。
處于活性期的發(fā)光菌,當(dāng)加入毒性物質(zhì)(如重金屬離子Cu2+/Cd2+/Se4+/Zn2+/As3+/Pb2+,農(nóng)藥五氧吩嗪、福美雙,染料對(duì)氨基苯甲醚、對(duì)硝基鄰甲苯胺,酸、堿等),菌體就會(huì)受抑甚至死亡,體內(nèi)ATP含量也會(huì)隨之降低甚至消失,發(fā)光度便下降甚至到零。由于毒物濃度與菌體發(fā)光度呈線性負(fù)相關(guān)地變化,因而可據(jù)發(fā)光度確定毒物急性生物毒性。若此毒物知其成份而不知其濃度,則可根據(jù)先前測(cè)得的發(fā)光度——毒物濃度關(guān)系曲線(標(biāo)準(zhǔn)曲線),測(cè)定濃度。
智能化生物毒性(污染)測(cè)試儀技術(shù)指標(biāo)

1、菌種名稱:明亮發(fā)光桿菌T3小種                         急性生物毒性測(cè)定靈敏度比較

化合物

濃度(毫克/升)

生物毒性測(cè)試儀EC50

96小時(shí)LC50

CU2

  3.239

 

Cd2

17.19

 

Zn2

 0.37

 

Pb2

82.23

 

Hg2

  0.126

0.010.9

AS3+

 0.55

 

2、測(cè)試范圍:0~1999mV(發(fā)光量)
3、測(cè)試精度:樣品3次重復(fù),相對(duì)偏差不大于15%
4、靈 敏 度:相當(dāng)或優(yōu)于魚體96小時(shí)培養(yǎng)測(cè)定急性
生物毒性試驗(yàn)法,見表(列舉幾例)
5、顯 著 性:樣品濃度與發(fā)光細(xì)菌相對(duì)發(fā)光度P<0.05工業(yè)廢水或0.01的水平(純化合物溶液)
6、測(cè)試溫度:在室溫20~25℃范圍保持某一恒定值
7、測(cè)試時(shí)間:10~20min(單個(gè)樣品)
8、結(jié)果表示:樣品EC50值(稀釋百分濃度)或相對(duì)發(fā)光度(%)及相當(dāng)?shù)膌v hua gong濃度值(mg/L)
9、供電電源:220V ±l0%
10、尺寸重量:300x240x130mm    5.5kg
該儀器外形、尺寸、重量,若有變化,恕不另行告知。
五、儀器操作
(一) 儀器樣品室:儀器樣品室為單管結(jié)構(gòu),可放入—只直徑為20毫米的測(cè)試樣品管(樣品溶液為5毫升)也可以預(yù)先放入塑料套管,用直徑為12毫米的測(cè)試樣品管(樣品溶液為2毫升)。
(二) 樣品溶液的制備、發(fā)光細(xì)菌的復(fù)蘇以及測(cè)量順序等:見附錄。
(三) 儀器預(yù)熱:在開始測(cè)試前,先確認(rèn)暗室處于關(guān)閉狀態(tài)(具體為暗室向右轉(zhuǎn)至底)再接通儀器電源(這時(shí)面板上應(yīng)是電源指示燈亮與停止指示燈亮),讓儀器預(yù)熱—刻鐘以上。
請(qǐng)注意!在接通電源前,—定要蓋好樣品室的蓋子,避免光電倍增管曝光,而疲勞受損。
(四) 功能按鍵:
儀器控制由按鍵實(shí)現(xiàn):[上/左]、[下/右]、[取消/返回]、[測(cè)量]、[存儲(chǔ)]、[確定]。
儀器開機(jī)后進(jìn)入主界面,主界面有5個(gè)功能選項(xiàng):[測(cè)量]、[校正]、[設(shè)置]、[查看]、[上傳]。
通過[上/左]、[下/右]選擇要進(jìn)入的功能選項(xiàng),選中的功能反白顯示,按[確定]后進(jìn)入相應(yīng)的菜單。
1、測(cè)量:
進(jìn)入[測(cè)量]后,設(shè)置有兩個(gè)選項(xiàng):
①、使用默認(rèn)操作員編號(hào)進(jìn)入測(cè)量(編號(hào)全為1);
②、使用手動(dòng)輸入,設(shè)置操作員編號(hào),有三組操作員,通過[上/左]、[下/右]按鍵設(shè)置,按[確定]進(jìn)入測(cè)量界面。
測(cè)量界面分三個(gè)部分:
①、zui左邊顯示項(xiàng)目號(hào)、設(shè)置好的操作員編號(hào)、時(shí)間和日期;
②、上面顯示測(cè)量值,右上腳顯示溫度;
③、中間顯示測(cè)量結(jié)果,每屏顯示兩組測(cè)量結(jié)果;
下面顯示菜單,共四個(gè)菜單:[測(cè)量]、[上翻]、[下翻]、[返回]主界面。
[測(cè)量]  菜單是用于記錄和修改已記錄的穩(wěn)定的測(cè)量值的。當(dāng)菜單處于[測(cè)量]時(shí),按[確定]鍵,會(huì)將測(cè)量值記錄下來(lái),并在屏幕中間顯示出來(lái);按[取消]鍵,會(huì)將zui后記錄的一個(gè)數(shù)據(jù)清除,重新測(cè)量;按[上翻]、[下翻]查看已記錄的數(shù)據(jù)。一個(gè)項(xiàng)目包含10組數(shù)據(jù),每屏只能顯示2組數(shù)據(jù)。
測(cè)量完畢后如果需要保存數(shù)據(jù)的話,請(qǐng)按[儲(chǔ)存]鍵,屏幕會(huì)給出一個(gè)界面用于選擇是否保存當(dāng)前項(xiàng)目所測(cè)數(shù)據(jù),保存是請(qǐng)您記住系統(tǒng)自動(dòng)遞增,生成的項(xiàng)目編號(hào),以便你查閱數(shù)據(jù)。
注意:測(cè)量時(shí)記錄的數(shù)據(jù)只是緩存,沒有存入ROM當(dāng)中,如果測(cè)量完畢后的數(shù)據(jù)需要存儲(chǔ)的話,請(qǐng)務(wù)必按[存儲(chǔ)]鍵將數(shù)據(jù)保存。
2、校正:
進(jìn)入[校正]后,有三個(gè)功能菜單:[零點(diǎn)校正]、[時(shí)間校正]、[返回]主界面。
通過[上/左]、[下/右]、[確定]、[取消/返回]按鍵進(jìn)行具體操作,反白顯示的為當(dāng)前選中的操作。
3、設(shè)置:
進(jìn)入[設(shè)置]后,有五個(gè)功能菜單:[背光保持時(shí)間]、[聲音設(shè)置]、[倍率] 、[自動(dòng)取樣時(shí)間]、[返回]主界面。
[背光保持時(shí)間]包括:15S、30S、60S、常亮;
[聲音設(shè)置]包括:開和關(guān)提示音;
[倍率]包括:*1、*2、*3、*4、*5  以此放大發(fā)光菌的發(fā)光量。
[自動(dòng)取樣時(shí)間]包括:5S、10S、15S、手動(dòng);
選擇[自動(dòng)取樣時(shí)間]后,在測(cè)量時(shí),到達(dá)設(shè)定的時(shí)間后,會(huì)自動(dòng)記錄測(cè)量結(jié)果。
4、查看:
進(jìn)入[查看]后,會(huì)提示輸入項(xiàng)目號(hào)(左上腳顯示的項(xiàng)目號(hào)),輸入項(xiàng)目號(hào)后就會(huì)進(jìn)入界面,可以查看當(dāng)時(shí)測(cè)量后保存的數(shù)據(jù),界面跟測(cè)量界面相同,顯示此項(xiàng)目測(cè)量的時(shí)間、日期、溫度、操作員編號(hào)、測(cè)量的數(shù)據(jù),通過[上/左]、[下/右]按鍵上翻、下翻數(shù)據(jù)。按[返回]鍵退出查看,返回主界面。
5、上傳:
進(jìn)入[上傳]后,會(huì)提示單一上傳或者選擇整片上傳,將ROM里面的數(shù)據(jù)全部上傳。
(五) 樣品測(cè)量:
1、向上拔出樣品室的蓋子(注意!拔出前,面板上應(yīng)是停止指示燈亮),然后將盛有待測(cè)樣品溶液的瓶子放入樣品室,蓋好蓋子。
2、抓住蓋子,依逆時(shí)針方向旋轉(zhuǎn)(這時(shí)面板上停止指示燈熄滅,測(cè)量指示燈亮),約1-2秒,則可讀取樣品溶液的測(cè)定數(shù)據(jù)。
3、抓住蓋子按順時(shí)針方向旋轉(zhuǎn),回到原處(面板上測(cè)量指示燈熄滅,停止指示燈亮),這時(shí),才可以向上拔出蓋子,取出已測(cè)過的樣品。此后,可作如下處理:
①、還有待測(cè)樣品,再取一瓶放入,蓋好蓋子,然后按上述步驟進(jìn)行測(cè)量。
②、因樣品需要進(jìn)一步處理,不能馬上測(cè)量,可以蓋上蓋子等待。
③、整批樣品已測(cè)試完畢,蓋好蓋子,將儀器電源切斷。
(六) 有色樣品液的測(cè)量:
對(duì)有色被測(cè)液,若用常規(guī)方法測(cè)會(huì)有干擾,因此需用下述方法進(jìn)行校正。具體步驟如下:
1、從儀器樣品室取出黑色塑料管套。
2、取一只2m1管(即12毫米測(cè)試樣品管),加3% NaCI溶液2ml,將該管放進(jìn)一只裝有適量3% NaCl溶液的5ml管(即20毫米的測(cè)試樣品管)內(nèi),并使外管與內(nèi)管的3% NaCl溶液面平齊,此作CK管。
3、另取一只2ml管,加3% NaCl溶液2ml,放入另一只裝有適量有色待測(cè)樣品液的5ml管內(nèi),要使外管與內(nèi)管的3% NaCl溶液面平齊,此作CKc管。
4、于CK和CKc二管的內(nèi)管中同時(shí)加復(fù)蘇發(fā)光菌液10μ(注意:必須是本批樣品測(cè)定所用同一瓶復(fù)蘇菌液),立即記時(shí)到秒,等反應(yīng)滿15分鐘,迅即放入儀器樣品室,測(cè)定二只帶有內(nèi)管的5ml管的發(fā)光度。分別記下發(fā)光度L1(CK管)和L2(CKc管)。
5、計(jì)算因顏色引起的發(fā)光度校正值△L=Ll-L2。
6、測(cè)試帶色樣品管及其CK管(加3% NaCl溶液)的發(fā)光量。
但是,所有CK管測(cè)得之發(fā)光度均須減去校正值△L后才能作為CK發(fā)光度。
六、結(jié)果處理
數(shù)據(jù)的處理:見附一中之(五)測(cè)試數(shù)據(jù)處理
說(shuō)明:當(dāng)在一次系列樣品的測(cè)量過程中,“輸出幅度選擇”開關(guān)所處的位置有變動(dòng),則需換算成某—檔次的值,然后才進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。“Xl”檔與其它檔(“XN”檔)的關(guān)系如下:

                XN

          Xl = ---- 或 XN = Xl·N                N

式中:N--------為“輸出幅度選擇”開關(guān)所處的位置;

          X1 ,XN --為“輸出幅度選擇”開關(guān)處于“Xl”,“XN”檔時(shí),數(shù)字表上的讀數(shù)。

七、分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)
根據(jù)國(guó)外有關(guān)資料及國(guó)內(nèi)的一些實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),擬定如下水質(zhì)急性毒性的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn),供參考。

水質(zhì)急性毒性的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

毒性等級(jí)

相對(duì)抑光率%

Hg(毫克/升)

毒性級(jí)別

I

< 30

< 0.07

低毒

II

30-50

0.07-0.09

中毒

III

50-70

0.09-0.12

重毒

IV

70-100

0.12-0.16

高毒

V

100

> 0.16

劇毒

注:相對(duì)抑光率% = 100% - 相對(duì)發(fā)光度%

八、注意事項(xiàng)
(一) 儀器要水平放置于工作臺(tái)上,并注意,千萬(wàn)不要放置在溫度高、濕度大及電磁干擾大的地方。
(二) 當(dāng)儀器不進(jìn)行測(cè)試時(shí),—定要蓋上樣品室的蓋子,防止灰塵進(jìn)入及光電倍增管曝光;在測(cè)量時(shí),要避免以強(qiáng)光照射光電倍增管,而產(chǎn)生疲勞現(xiàn)象。
(三) 在給各測(cè)試管加復(fù)蘇菌液后,蓋上瓶塞,用手顛倒5次;但是,在放回原位后,要拔去瓶塞!?。?br />(四) 請(qǐng)?zhí)貏e注意:嚴(yán)防測(cè)試的樣品溶液漏在樣品室內(nèi)。如發(fā)現(xiàn)樣品管外壁已附著樣品液時(shí),一定要先擦干凈后,再放入樣品室,避免樣品室產(chǎn)生銹蝕,致旋轉(zhuǎn)不自如或轉(zhuǎn)不動(dòng)。若樣品室內(nèi)已沾附著樣品液時(shí),馬上用濾紙吸干,并用稀機(jī)油在沾附處擦洗—下。
(五) 發(fā)光細(xì)菌的活性及使用菌液量的準(zhǔn)確性都將對(duì)測(cè)量產(chǎn)生很大的影響,因此務(wù)必正確的操作。
(六) 當(dāng)發(fā)現(xiàn)測(cè)量結(jié)果異常時(shí),要認(rèn)真檢查分析,找出原因,并加以解決:
1、操作的環(huán)境溫度、樣品溫度是否控制在200C;
2、菌種的復(fù)蘇情況,是否均勻;
3、用于測(cè)試的管子是否清洗干凈;
4、用10μl微量注射器吸取復(fù)蘇菌液時(shí)是否有小氣泡;
5、樣品與菌液的反應(yīng)時(shí)間是否準(zhǔn)確到秒;
6、當(dāng)天使用的菌種復(fù)蘇液只能在當(dāng)天使用。
(七) 請(qǐng)注意:
1、儀器處于“停”狀態(tài),旋轉(zhuǎn)“調(diào)零”,數(shù)字表上能出現(xiàn)正負(fù)值均勻變化,調(diào)節(jié)“調(diào)零”使顯示“0”,零點(diǎn)應(yīng)穩(wěn)定;
轉(zhuǎn)動(dòng)樣品室的蓋子,讓儀器處于“測(cè)”狀態(tài),然后慢慢拔起蓋子,使它與樣品室間有一小縫,讓室內(nèi)光線射入樣品室,數(shù)字表有顯示值,且隨隙縫大小而變化。蓋好蓋子,轉(zhuǎn)回原位,應(yīng)顯“0”。
2、發(fā)光菌液在儀器中的顯示值符合規(guī)定要求,衰減情況正常。
以上兩項(xiàng)正常,出現(xiàn)測(cè)量結(jié)果異常,則屬于操作不嚴(yán)格、不規(guī)范,要認(rèn)真重做一遍。
(八) 如果發(fā)光細(xì)菌不好,則更換發(fā)光菌凍干粉。當(dāng)判定是儀器的故障,請(qǐng)發(fā)送我所檢修,千萬(wàn)不要自拆。
(九) 儀器自提貨之日起,因元器件的質(zhì)量造成的故障,免費(fèi)包修一年;該儀器長(zhǎng)年保修

 

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