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硫酸鹽還原菌檢測(cè)：硫酸鹽還原菌（SRB）的危害與檢測(cè)
硫酸鹽還原菌檢測(cè)：硫酸鹽還原菌（SRB）的危害與檢測(cè)
什么是硫酸鹽還原菌
硫酸鹽還原菌 (Sulfate-Reducing Bacteria，簡(jiǎn)稱SRB) 是一種厭氧的微生物。廣泛存在于土壤、海水、河水、地下管道以及油氣井等缺氧環(huán)境中。它能利用金屬表面的有機(jī)物作為碳源，并利用細(xì)菌生物膜內(nèi)產(chǎn)生的氫，將硫酸鹽還原成硫化氫。
硫酸鹽還原菌腐蝕的形成
在某些環(huán)境中，硫酸鹽還原細(xì)菌（SRB）能夠在管道壁上聚集，使管道可能發(fā)生局部點(diǎn)蝕。硫酸鹽還原菌與有機(jī)物質(zhì)和硫酸鹽反應(yīng)生成硫化氫和二氧化碳會(huì)與管道壁中的鐵反應(yīng)，產(chǎn)生不同形式的硫化鐵。
硫化鐵和管道中其他形式的沉積物形成大量的黑色粉末，這些黑色粉末比管道碳鋼硬度大，故會(huì)對(duì)管道部件造成嚴(yán)重的腐蝕危害。
硫酸鹽還原菌的危害
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儀器和控制閥的污染 - 結(jié)垢可能導(dǎo)致測(cè)量結(jié)果不良，腐蝕會(huì)導(dǎo)致的部件損；
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堵塞過濾系統(tǒng) - 當(dāng)管道系統(tǒng)中含有過量的黑色粉末時(shí)，可能會(huì)導(dǎo)致過濾器壽命縮短；
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管道 - 黑色粉末增加了管道內(nèi)壁表面的粗糙度，可能會(huì)引起嚴(yán)重或不受控制的腐蝕以至于導(dǎo)致管道失效；
對(duì)于SRB，水是其存在且發(fā)生代謝活動(dòng)的主要因素，要減少SRB的腐蝕影響，就需要對(duì)管道中的水汽進(jìn)行控制或消除，并用適當(dāng)?shù)纳餁鐒┻M(jìn)行控制。
硫酸鹽還原菌的檢測(cè)
SRB的生物腐蝕帶來的危害和損失是巨大的，然而在對(duì)SRB進(jìn)行控制和消除之前，需要對(duì)相關(guān)可能會(huì)發(fā)生腐蝕的場(chǎng)合進(jìn)行SRB檢測(cè)，以判斷SRB是否存在以及含量多少，從而制定適當(dāng)?shù)闹卫矸桨浮?/span>
目前，國內(nèi)外學(xué)者對(duì)硫酸鹽還原菌的檢測(cè)方法進(jìn)行了許多探索和研究，發(fā)明了許多檢測(cè)技術(shù)，從原理上講，主要分為：（1）培養(yǎng)法；（2）免疫學(xué)法；（3）atp法；（4）代謝產(chǎn)物定量法。
1培養(yǎng)法
培養(yǎng)法主要有測(cè)試瓶法、瓊脂深層培養(yǎng)法和溶化瓊脂管法。這些方法都是根據(jù)API RP-38美國石油學(xué)會(huì)推薦的地下注入水分析方法中的3管平行絕跡稀釋法（Disappearing Dilution Method）進(jìn)行的。
其中測(cè)試瓶法是利用瓶裝的含乳酸鹽、硫酸鹽和fe2+（或金屬鐵）的培養(yǎng)基對(duì)待測(cè)水樣進(jìn)行接種培養(yǎng)，當(dāng)待測(cè)樣品中存在SRB時(shí)，經(jīng)過培養(yǎng)瓶底會(huì)出現(xiàn)黑色的沉淀（FeS），以此作為SRB生長指示，從而確定水樣中srb的含量。
該方法是目前國內(nèi)外zui為常用的SRB檢測(cè)方法。但是該方法的檢測(cè)周期過長，一般需要經(jīng)過28天的培養(yǎng)，并且得到的數(shù)據(jù)比較粗糙，對(duì)低SRB含量的水樣可能無法檢出。
2免疫學(xué)法
研究人員發(fā)現(xiàn)SRB胞內(nèi)有一種酶，即腺苷-5’-磷酸硫酸鹽還原酶（APS還原酶），這種酶為SRB所*，是SRB的特征酶。所以相關(guān)研究人員發(fā)明了檢測(cè)SRB的新方法—免疫學(xué)法。
該方法基于APS還原酶進(jìn)行，這種酶能夠催化腺苷-5’-磷酸硫酸鹽還原酶發(fā)生還原反應(yīng)，并生產(chǎn)相關(guān)特定產(chǎn)物。利用該產(chǎn)物與顯色劑發(fā)生顯色反應(yīng)的強(qiáng)弱，并與比色卡比較，而得到樣品中SRB的含量。該方法準(zhǔn)確、簡(jiǎn)單、快速，且對(duì)SRB具有專一性，的能夠在15-40min內(nèi)的到結(jié)果，檢測(cè)結(jié)果易于觀察，適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)使用。
3atp法
三磷酸腺苷（ATP）是所有活的生物細(xì)胞中都具有的一種化合物，其含量與細(xì)胞濃度成正比。細(xì)胞破碎后釋放出來的ATP與熒光素反應(yīng)，可測(cè)定出相應(yīng)的細(xì)菌含量。所以可以通過檢測(cè)水樣中的ATP含量來間接判斷srb數(shù)量，但是該方法只能檢測(cè)微生物總數(shù)，所以檢出下限較高，不適用于低SRB含量的水樣。
其次，還有代謝產(chǎn)物定量法，以SRB新陳代謝產(chǎn)物硫化物的生成量來確定SRB含量，該方法操作簡(jiǎn)單，且檢測(cè)結(jié)果具有指導(dǎo)意義，但是檢測(cè)過程需在無氧條件下進(jìn)行，且需要7-8h。
Modern Water QuickChek SRB 檢測(cè)系統(tǒng)
QuickChek SRB 檢測(cè)系統(tǒng)是一種采用酶免疫方法進(jìn)行快速檢測(cè)SRB的設(shè)備。該檢測(cè)采用了高純度的抗體來探測(cè)APS。本檢測(cè)試劑盒相比于細(xì)胞捕捉技術(shù)具有很多優(yōu)勢(shì)，比如快速，準(zhǔn)確等，可在15-20min內(nèi)得到一個(gè)半定量的結(jié)果。
該設(shè)備可以檢測(cè)固態(tài)，半固體樣品中的全部SRB含量，包括了在一些標(biāo)準(zhǔn)介質(zhì)中無法存活的SRB。測(cè)試結(jié)果不會(huì)被現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)常見的化學(xué)品或鹽類所干擾。
在固體或泥漿樣品由于懸浮固體含量較高，難以使用傳統(tǒng)連續(xù)稀釋法和培養(yǎng)法進(jìn)行分析。此類樣品可以使用quickchek檢測(cè)套裝進(jìn)行分析。QuickChek套裝中的化學(xué)破胞試劑可穿透固體顆粒并釋放出APS還原酶，從而達(dá)到對(duì)生物膜、沉積物、鐵銹、污泥或泥漿中的SRB進(jìn)行定量檢測(cè)的目的。QuickChek SRB支持固體檢測(cè)的特性尤其適合用于儲(chǔ)油罐底部SRB含量檢測(cè)。