TopoGEN質(zhì)粒轉(zhuǎn)染分析的HR DNA修復(fù)報告試劑盒，旨在讓研究人員研究他們選擇的細胞系中的同源重組（HR）。該試劑盒使用GFP作為HR途徑的體內(nèi)讀數(shù)，并包括在您自己的實驗室中設(shè)置系統(tǒng)的適當控制。新：TopoGEN現(xiàn)在提供一種負擔得起的試驗規(guī)模（試劑盒中3個質(zhì)粒各50ug），讓您測試新的基于細胞的試劑盒的功效。

艾美捷TopoGEN拓撲異構(gòu)酶II條帶移位試劑盒：

產(chǎn)品型號：DR3050

類別：細胞環(huán)境DNA修復(fù)，移動瞬時檢測DNA修復(fù)系統(tǒng)

標簽：DNA修復(fù)，同源重組，HR DNA報告基因，質(zhì)粒DNA

TopoGEN拓撲異構(gòu)酶II條帶移位試劑盒詳情：

這是一個基于質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的報告系統(tǒng)，旨在允許客戶篩選或檢查影響同源重組（HR）DNA修復(fù)過程的任何因子。它將在大多數(shù)可以轉(zhuǎn)染的細胞系中工作。試劑盒使用GFP作為HR途徑的體內(nèi)讀出。試劑盒包括兩個被驗證為高質(zhì)量DNA的質(zhì)粒（見圖1和圖2）：

• HR-GFP。當這個報告基因轉(zhuǎn)染到細胞中時，不會表達GFP，因為基因在雙盒結(jié)構(gòu)中發(fā)生了突變。5'盒包含一個破壞性的I-Sce1位點/終止密碼子，而3'盒在同一區(qū)域是野生型，但包含阻止表達的缺失。

• I-Sce1表達質(zhì)粒。這是一種巨型內(nèi)切核酸酶，除了位于HR-GFP的5'盒中的單個I-Sce1位點外，不會在人類基因組的任何地方切割。

當這兩個質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到同一細胞時，將有一個%GFP讀數(shù)，反映HR修復(fù)的效率。由于試劑盒僅基于兩個DNA，可以實現(xiàn)合理的轉(zhuǎn)染效率，并且可以在幾乎所有“可轉(zhuǎn)染"的細胞系中檢查HR修復(fù)過程。轉(zhuǎn)染后，會產(chǎn)生一群GFP+細胞，可以進行分選或通過活細胞成像跟蹤。HR修復(fù)的效率與轉(zhuǎn)化為GFP+表型的細胞百分比相關(guān)。重要的是要在平行培養(yǎng)中包含帶有eGFP的轉(zhuǎn)染對照。eGFP對照基因可以單獨購買，不在試劑盒中。

誰應(yīng)該購買這個試劑盒？

對篩選針對整個HR DNA修復(fù)途徑的因子、藥物、基因或基因產(chǎn)物感興趣的研發(fā)實驗室會發(fā)現(xiàn)這個試劑盒非常有用。DNA修復(fù)途徑充滿了可藥物化的目標，這一點已經(jīng)得到了很好的證實。針對DNA修復(fù)的因子可能是很好的抗癌或抗病d藥物。此外，識別與DNA修復(fù)相互作用的其他基因和基因產(chǎn)物對于尋找新的藥物靶點也很重要。這個試劑盒的一個主要優(yōu)點是它在活細胞的環(huán)境中運行。這意味著結(jié)果將具有很高的生理相關(guān)性，因為事件在細胞內(nèi)實時發(fā)生。此外，由于它基于熒光，可以利用單細胞成像跟蹤經(jīng)歷修復(fù)的個體細胞，也可以使用時間推移成像跟蹤這些細胞的后代。這個試劑盒僅基于質(zhì)粒報告基因，允許研究人員將系統(tǒng)放置在他們選擇的任何細胞系中。這在主要興趣是細胞系或譜系模型時提供了極大的靈活性。無需創(chuàng)建帶有整合報告基因的穩(wěn)定細胞系（這需要時間），為研究者提供了快速進入藥物測試或轉(zhuǎn)錄因子對HR的影響的途徑。

HR修復(fù)報告基因試劑盒包含在任何動物細胞系中創(chuàng)建完整的同源重組報告系統(tǒng)所需的試劑。

I-Sce1基因表達質(zhì)粒，pSCE1（儲存于-20°C或4°C）。

DR-HRGFP（儲存于-20°C或4°C）。這個質(zhì)粒含有一個普魯霉素選擇基因。

eGFP（帶有CMV啟動子的野生型GFP）轉(zhuǎn)染對照（儲存于-20°C或4°C）。

對于所有質(zhì)粒，DNA濃度通常為0.5微克/微升（但需在管標簽上核實）。請注意，目錄編號表示試劑盒大小，這是基于DNA的量。

可選：為了幫助建立系統(tǒng)，我們提供含有單個GFP修復(fù)報告基因的對照HeLa細胞系（穩(wěn)定整合到基因組中），該細胞系在轉(zhuǎn)染I-Sce1質(zhì)粒后將進行DNA修復(fù)（形成GFP+細胞）（請咨詢）。

試劑盒可能通過干冰或濕冰運輸，或者在某些情況下可能在常溫下運輸。所有試劑在收到后應(yīng)儲存在4°C（短期）或-20°C（長期）。

艾美捷科技是TopoGEN的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。