Leutenizing Horome（LH）ELISA是一種酶免疫測定法，用于定量檢測尿液中的LH。該測試用于檢測中期LH激增尿蛋白，這有助于預(yù)測排卵時(shí)間。用于美國境內(nèi)的體外診斷。僅供美國境外研究使用。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品黃體生成素(尿)酶聯(lián)免疫吸附測定(96孔)IVD使用。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

黃體生成素(尿)酶聯(lián)免疫吸附測定(96孔)IVD使用檢測原理：

LH ELISA試劑盒是一種基于夾心原理的固相酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）。微孔板的孔中涂有針對LH分子β亞單位的d特抗原位點(diǎn)的單克?。ㄐ∈螅┛贵w。在第一次孵育期間，添加的樣本中的LH分子的β亞單位與固定的抗體結(jié)合。孵育后，加入的結(jié)合物溶液（含有與辣根過氧化物酶結(jié)合的抗LH抗體）與LH結(jié)合，形成一個(gè)夾心復(fù)合物。經(jīng)過洗滌步驟去除所有未結(jié)合的物質(zhì)后，固相與底物溶液孵育。通過加入停止溶液來突然停止比色反應(yīng)，測量產(chǎn)生的黃色產(chǎn)物的光密度（OD）。顏色的強(qiáng)度與樣本中分析物的濃度成正比。通過繪制標(biāo)準(zhǔn)品濃度對應(yīng)的OD值來構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線，并使用這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線來確定未知樣本的濃度。

測定程序：

每次運(yùn)行都必須包括一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1. 在框架支架中固定所需數(shù)量的微孔板孔。

2. 使用新的一次性吸頭，將每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品、對照品和樣本的50微升分別加入相應(yīng)的孔中。

3. 在室溫下孵育30分鐘。

4. 向每個(gè)孔中加入100微升酶結(jié)合物。c底混合10秒鐘。這一步w全混合非常重要。

5. 在室溫下孵育30分鐘。

6. 迅速搖出孔內(nèi)的內(nèi)容。手動洗滌時(shí)，每個(gè)孔用300微升1倍工作洗液洗滌3次。在吸水紙上用力敲擊孔以去除殘留液滴。重要說明：正確的洗滌顯著影響此測定的靈敏度和精確度！

7. 向每個(gè)孔中加入100微升底物溶液。

8. 在室溫下孵育10分鐘。

9. 通過向每個(gè)孔中加入50微升停止溶液來停止酶促反應(yīng)。

10. 使用微孔板讀數(shù)器，在450納米（讀數(shù)）和620納米至630納米（背景減除，推薦）測定每個(gè)孔的吸光度（OD）。建議在加入停止溶液后10分鐘內(nèi)讀取孔。

結(jié)果計(jì)算：

1. 計(jì)算每組標(biāo)準(zhǔn)品、對照品和樣本的平均吸光度值。

2. 使用半對數(shù)坐標(biāo)紙，通過將每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的平均吸光度與其濃度繪制在垂直（Y）軸上的吸光度和水平（X）軸上的濃度上，構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。

3. 使用每個(gè)樣本的平均吸光度值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上確定相應(yīng)的濃度。

4. 自動化方法：IFU中的結(jié)果已經(jīng)使用4-PL（4參數(shù)邏輯）曲線擬合自動計(jì)算。4參數(shù)Rodbar或4參數(shù)Marquardt Logistics是s選方法。其他數(shù)據(jù)簡化函數(shù)可能會給出略有不同的結(jié)果。

樣品的濃度可以直接從該標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取。濃度高于最高標(biāo)準(zhǔn)的樣品必須進(jìn)一步稀釋或報(bào)告為>200 mIU/mL。在計(jì)算濃度時(shí)，必須考慮該稀釋系數(shù)。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個(gè)研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。

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