類胰島素生長因子（IGF）-I和II在循環(huán)中與特定的結合蛋白（IGF結合蛋白，IGFBP）結合。到目前為止，已經(jīng)鑒定出七種不同的蛋白IGFBP-1至7。IGF的生物利用度、運輸和儲存由這些結合蛋白調節(jié)或促進，它們根據(jù)生理和發(fā)育需求的差異性表達。循環(huán)中z豐富的IGFBP是IGFBP-3。與IGFBP-5一起，它能夠形成所謂的與IGF和酸性不穩(wěn)定亞基（ALS）的三元復合物。在循環(huán)中，幾乎所有的IGF都以這種三元復合物的形式存在，因此不能穿過內皮屏障。只有非常少量的IGF或IGFBP-3存在于這個復合物之外。酸性不穩(wěn)定亞基是循環(huán)中IGF儲存機制的重要組成部分。研究表明，在ALS缺乏或ALS基因敲除小鼠中，循環(huán)中的IGF和IGFBP-3濃度顯著降低，導致生長受損。

酸性不穩(wěn)定亞基是一種由605個氨基酸組成的前體蛋白。在運輸過程中，對于ALS分泌必需的信號肽（AA 1-27）會被切除（Swiss-Prot P35858版本82）。成熟蛋白由578個氨基酸組成，包含約20個富含l氨酸的序列重復。除了富含l氨酸的重復序列，還描述了幾個潛在的N-糖基化位點。Miller BS等人能夠證明IGF、ALS和IGFBP-3的不w全糖基化會導致這些蛋白的血清濃度降低。ALS基因的突變或w全敲除會導致IGF/IGFBP-3缺乏，從而干擾生長。

第一個ALS免疫分析法是由Baxter RC在1990年描述的。使用這種內部放射免疫分析的研究表明，ALS在健康受試者的血清中濃度很高，但在其他體液如羊水、腦脊液或精液中不可檢測，盡管這些體液含有高水平的IGFBP-3。

該酶免疫測定試劑盒適用于測量人血清或EDTA/肝素/檸檬酸鹽血漿中的酸不穩(wěn)定亞基（ALS），僅供研究使用。僅供研究使用。不用于診斷程序。

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酸不穩(wěn)定亞基ELISA(96孔)檢測原理：

酸性不穩(wěn)定亞基（ALS）酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）是一種所謂的夾心測定法。它利用兩種特異性強、親和力高的抗體來檢測這種蛋白。這些抗體是通過用特定肽段免疫兔子產(chǎn)生的，如Khosravi和Stadler之前所描述的[16, 17]。

樣本中的ALS與微孔板上固定的第一抗體結合。接下來的步驟中，生物s標記的第二抗ALS抗體轉而與固定的ALS結合。然后，鏈霉親和素-過氧化物酶綴合物與生物s標記的抗體結合，在最后的底物反應中，顏色的轉變被催化，定量地依賴于樣本中ALS的水平。

最初，該測定法是針對內部血清進行校準的，測量結果以mU/mL表示。在成功生產(chǎn)出真核重組ALS后，校準轉移到了質量單位（見校準/可追溯性）。此外，重組材料被用來以質量單位量化校準品中的ALS含量。分析顯示，1mU ALS相當于5 ng ALS，所有先前的測定法性能描述數(shù)據(jù)都相應地轉換為ng/mL。

典型的標準曲線示例

以下數(shù)據(jù)僅供展示，不能替代在測定時生成的數(shù)據(jù)。

文獻參考：

1. Ballard. J.. et al.. On the nomenclature of the IGF binding proteins. Acta Endocrinol(Copenh). 1989. 121(5): p. 751-2.

2. Wilson. E.M.. Y. Oh. and R.G. Rosenfeld. Generation and characterization of an IGFBP7 antibody: identification of 31kD IGFBP-7 in human biological fluids and Hs578T humanbreast cancer conditioned media. J Clin Endocrinol Metab. 1997. 82(4): p. 1301-3.

3. Baxter. R.C.. Characterization of the acid-labile subunit of the growth hormone-dependentinsulin-like growth factor binding protein complex. J Clin Endocrinol Metab. 1988. 67(2): p.265-72. 

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