這種補體因子3（C3）檢測試劑盒是一種高靈敏度的雙位點酶聯(lián)免疫測定法ELISA法測定大鼠血漿和血清樣本中的C3

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品 補體因子3(大鼠)ELISA試劑盒，96w。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

補體因子3(大鼠)ELISA試劑盒，96w檢測原理：

雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）的原理如圖1所示。在這種測定中，樣品中的C3與已吸附到聚苯乙烯微孔板表面的抗C3抗體發(fā)生反應。通過洗滌去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)后，加入辣根過氧化物酶（HRP）偶聯(lián)的抗C3抗體。這些酶標記的抗體與之前結(jié)合的C3形成復合物。經(jīng)過再次洗滌后，通過添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）來測定與免疫吸附劑結(jié)合的酶。結(jié)合的酶量與測試樣品中C3的濃度成正比；因此，450納米處的吸光度是測試樣品中C3濃度的量度。測試樣品中C3的量可以從標準曲線中插值得出，并根據(jù)樣品稀釋進行校正。

樣品收集和處理

所有血液成分和生物材料應視為潛在危險。

處理和處置時遵循通用預防措施。

如果血液樣品出現(xiàn)凝塊、嚴重溶血、脂血或樣品完整性受到質(zhì)疑，請記錄并謹慎解釋結(jié)果。

以下列出的樣品收集和儲存條件僅供參考。

樣品穩(wěn)定性尚未評估。

? 血清樣品：應通過靜脈穿刺收集血液。血凝后通過離心分離血清。取出血清立即進行測定或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復凍融。

? 血漿樣品：應將血液收集到含有抗凝劑的容器中，然后進行離心。立即進行測定或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復凍融。

? 已知干擾物質(zhì)：濃度高于0.1%的疊氮化物和硫柳汞會抑制酶反應。

樣品稀釋

測定要求每個測試樣品在使用前進行稀釋。每次進行測定時，所有樣品都應以雙份進行測定。推薦的稀釋比例僅供參考。

稀釋比例應基于未知樣品的預期濃度，以便稀釋后的樣品落在標準曲線的動態(tài)范圍內(nèi)。如果不確定樣品水平，在運行整個板之前，強烈建議對一個或兩個代表性樣品進行系列稀釋。

血清和血漿樣品 - 推薦的起始稀釋比例是1:10,000。要制備1:10,000的樣品稀釋液，將5 ?l的樣品轉(zhuǎn)移到495 ?l的1X稀釋液中。這會產(chǎn)生1:100的稀釋比例。

接下來，將1:100的樣品通過將5?l轉(zhuǎn)移到495 ?l的1X稀釋液中進行稀釋。這會產(chǎn)生1:10,000的樣品稀釋比例。每個階段都要c底混合。

試劑準備

? 使用前將所有試劑置于室溫（16°C至25°C）。

? 稀釋液濃縮物 - 提供的稀釋液為5倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水（1份緩沖液濃縮物，4份dH2O）按1:5稀釋。

? 洗滌液濃縮物 - 提供的洗滌液為20倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水（1份緩沖液濃縮物，19份dH2O）按1:20稀釋。

濃縮物在低溫儲存時可能會形成晶體。

稀釋前將濃縮物加熱至30-35°C可以溶解晶體。

? 酶-抗體結(jié)合物 - 通過向每個微孔板測試條使用的1X稀釋液中添加10 ?L酶-抗體結(jié)合物和990 ?L來計算每個微孔板測試條所需的工作結(jié)合物溶液量。

使用前立即稀釋，并避免光照。均勻混合，但要輕柔。避免產(chǎn)生泡沫。

? 預包被ELISA微孔板 - 按提供的狀態(tài)使用。

打開鋁箔袋，從袋中取出板。

取出在測定中不會使用的所有條和孔，放回袋中并重新密封，同時放回干燥劑。

? 大鼠C3校準物 - 根據(jù)批次特定的分析證書進行準備。

附錄A - 參考血清信息

試劑盒中包含一瓶參考血清。有關(guān)批次特定的信息，請參考隨附的產(chǎn)品概況表。

請注意以下幾點：

1. 如果保存時間超過7天，參考血清應冷凍保存，并且在有效期前保持穩(wěn)定。

2. 參考血清應適當稀釋，以適應標準范圍曲線。有關(guān)說明，請參考協(xié)議中的“樣品稀釋"部分。

3. 在移液樣品（程序部分）時，也應以雙份移液參考血清。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉(zhuǎn)導、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。

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