急性期蛋白

急性期蛋白是血漿蛋白，它們?cè)诟腥尽⒀装Y或創(chuàng)傷后濃度增加。

第一個(gè)被確認(rèn)的急性期蛋白是在1930年由Tillet和Frances在人類中發(fā)現(xiàn)的。

觸珠蛋白（Hp）是一種由肝臟主要合成的異質(zhì)性血漿蛋白。觸珠蛋白單體由兩個(gè)重鏈，β鏈（40 kD）和兩個(gè)輕鏈，α鏈，α1（9 kD）和α2（16 kD）組成，它們通過(guò)二硫鍵連接。主要的三種觸珠蛋白類型是；Hp1-1是單體（98kD），Hp1-2是大約200 kD的聚合物，Hp2-2大約400 kD。在24至48小時(shí)內(nèi)急性組織損傷后，血清水平迅速上升，一旦刺激因素被移除，也會(huì)非常迅速地下降。實(shí)際上，在溶血性貧血中，Hp水平是降低的。Hp對(duì)血紅蛋白（Hb）有很高的親和力，其功能似乎是防止Hb在尿液中的丟失，這將導(dǎo)致鐵的丟失。過(guò)去幾年的研究表明，在血漿或血清中定量Hp可以為人類以及寵物動(dòng)物和農(nóng)場(chǎng)畜群的疾病檢測(cè)、預(yù)后和監(jiān)測(cè)提供有價(jià)值的研究信息。

觸珠蛋白檢測(cè)試劑盒

觸珠蛋白檢測(cè)試劑盒是一種高靈敏度的雙位點(diǎn)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA），用于測(cè)量牛生物樣本中的觸珠蛋白。牛觸珠蛋白試劑盒不會(huì)與羊觸珠蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)。

作為ALPCO在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品牛觸珠蛋白ELISA。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

牛觸珠蛋白ELISA檢測(cè)原理：

如圖1所示，在這種測(cè)定中，樣品中的觸珠蛋白與已吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗觸珠蛋白抗體發(fā)生反應(yīng)。通過(guò)洗滌去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)后，加入與辣根過(guò)氧化物酶（HRP）偶聯(lián)的抗Hp抗體。這些酶標(biāo)記的抗體與之前結(jié)合的Hp形成復(fù)合物。經(jīng)過(guò)另一次洗滌步驟后，通過(guò)添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）來(lái)測(cè)定與免疫吸附劑結(jié)合的酶。結(jié)合的酶量與測(cè)試樣品中觸珠蛋白的濃度成正比；因此，450納米處的吸光度是測(cè)試樣品中觸珠蛋白濃度的量度。測(cè)試樣品中觸珠蛋白的量可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線中插值得出，并根據(jù)樣品稀釋進(jìn)行校正。

儲(chǔ)存和穩(wěn)定性

包裝的有效期在盒標(biāo)簽上說(shuō)明。

稀釋液

5倍稀釋液濃縮液在有效期前穩(wěn)定。1倍工作溶液自配制之日起至少穩(wěn)定一周。

兩種溶液都應(yīng)儲(chǔ)存在4-8°C。

洗滌液

20倍洗滌液濃縮液在有效期前穩(wěn)定。1倍工作溶液自配制之日起至少穩(wěn)定一周。

兩種溶液可以儲(chǔ)存在室溫（16-25°C）或4-8°C。

酶-抗體結(jié)合物

未稀釋的辣根過(guò)氧化物酶抗Hp結(jié)合物應(yīng)儲(chǔ)存在4-8°C，并在使用前立即稀釋。

工作結(jié)合物溶液在黑暗中儲(chǔ)存時(shí)穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)1小時(shí)。

顯色底物溶液

底物溶液應(yīng)儲(chǔ)存在4-8°C，在有效期前穩(wěn)定。

終止液

終止液應(yīng)儲(chǔ)存在4-8°C，在有效期前穩(wěn)定。

牛觸珠蛋白ELISA微孔板

?？笻p涂層孔在有效期前穩(wěn)定，應(yīng)密封在帶有干燥劑包的鋁箔袋中，并儲(chǔ)存在4-8°C。

牛觸珠蛋白校準(zhǔn)液

凍干的牛觸珠蛋白校準(zhǔn)液應(yīng)儲(chǔ)存在4?C或冷凍直到重組。重組后的校準(zhǔn)液應(yīng)分裝并冷凍儲(chǔ)存（避免多次凍融循環(huán)）。

工作標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)在使用前立即準(zhǔn)備，穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)8小時(shí)。

如果測(cè)試正常進(jìn)行，標(biāo)準(zhǔn)溶液的結(jié)果應(yīng)在預(yù)期值的20%以內(nèi)。

樣品收集和處理

血液應(yīng)通過(guò)靜脈采血收集。血凝塊形成后，通過(guò)離心分離血清。

對(duì)于血漿樣本，血液應(yīng)收集到含有抗凝劑的容器中，然后進(jìn)行離心。

應(yīng)注意盡量減少溶血，過(guò)度溶血可能會(huì)影響結(jié)果。立即進(jìn)行測(cè)定或分裝后儲(chǔ)存于-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

預(yù)防措施

對(duì)于任何可能含有bing原體的樣本，必須小心防止與開放性傷口接觸。

添加劑和防腐劑

不需要任何添加劑或防腐劑來(lái)保持樣本的完整性。避免疊氮化物污染。

已知干擾物質(zhì)

濃度高于0.1%的疊氮化物和硫柳汞會(huì)抑制酶反應(yīng)。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測(cè)樣品來(lái)源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個(gè)研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長(zhǎng)。

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