IgA檢測(cè)試劑盒是一種高靈敏度的雙位點(diǎn)酶聯(lián)免疫測(cè)定法（ELISA），用于定量豬血漿和血清樣本中免疫球蛋白A（IgA）的測(cè)定。用于研究用途只有。不用于診斷程序。

作為ALPCO在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品豬IgA ELISA試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

豬IgA ELISA試劑盒檢測(cè)原理：

雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）的原理如圖1所示。在這種測(cè)定中，樣本中的IgA與吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗IgA抗體發(fā)生反應(yīng)。通過(guò)洗滌去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)后，加入與辣根過(guò)氧化物酶（HRP）偶聯(lián)的抗IgA抗體。這些酶標(biāo)記的抗體與之前結(jié)合的IgA形成復(fù)合物。經(jīng)過(guò)另一次洗滌步驟后，通過(guò)添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）來(lái)測(cè)定免疫吸附劑上結(jié)合的酶。結(jié)合酶的量與測(cè)試樣本中IgA的濃度直接相關(guān)；因此，450納米處的吸光度是測(cè)試樣本中IgA濃度的量度。測(cè)試樣本中IgA的量可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線中插值得到，并根據(jù)樣本稀釋進(jìn)行校正。

所需材料（未提供）

精密移液器（2微升至100微升），用于制備和分發(fā)稀釋液

試管

噴霧瓶或微孔板洗滌器/抽吸器

蒸餾水或去離子水

微孔板讀取器

用于制備試劑和緩沖液的各種玻璃器皿

計(jì)時(shí)器

抗凝劑（用于血漿樣本收集）

離心機(jī)（用于樣本收集）

樣本收集和處理

所有血液成分和生物材料應(yīng)視為潛在危險(xiǎn)物。處理和處置時(shí)應(yīng)遵循通用預(yù)防措施。

如果血液樣本出現(xiàn)凝塊、嚴(yán)重溶血、脂血或樣本完整性存疑，請(qǐng)做好記錄并謹(jǐn)慎解釋結(jié)果。

以下列出的樣本收集和儲(chǔ)存條件僅供參考。樣本穩(wěn)定性未經(jīng)評(píng)估。

血清樣本：應(yīng)通過(guò)靜脈穿刺收集血液。血液凝固后通過(guò)離心分離血清。取出血清后立即進(jìn)行測(cè)定或分裝后儲(chǔ)存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

血漿樣本：應(yīng)將血液收集到含有抗凝劑的容器中，然后進(jìn)行離心。立即進(jìn)行測(cè)定或分裝后儲(chǔ)存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

已知干擾物質(zhì)：疊氮化物和硫柳汞在高于0.1%的濃度時(shí)會(huì)抑制酶反應(yīng)。

樣本稀釋

測(cè)定要求每個(gè)測(cè)試樣本在使用前進(jìn)行稀釋。每次進(jìn)行測(cè)定時(shí)，所有樣本應(yīng)進(jìn)行雙重測(cè)定。推薦的稀釋比例僅供參考。

稀釋應(yīng)基于未知樣本的預(yù)期濃度，以使稀釋后的樣本落在標(biāo)準(zhǔn)曲線的動(dòng)態(tài)范圍內(nèi)。如果不確定樣本值，在運(yùn)行整個(gè)板之前，強(qiáng)烈建議對(duì)一個(gè)或兩個(gè)代表性樣本進(jìn)行系列稀釋測(cè)定。

血清和血漿樣本 - 建議起始稀釋比例為1:20,000。要制備1:20,000的y本稀釋液，將5微升樣本轉(zhuǎn)移到495微升1X稀釋液中。這得到1:100的稀釋。接下來(lái)，將1:100的樣本通過(guò)將2微升轉(zhuǎn)移到398微升1X稀釋液中進(jìn)行稀釋。這得到1:20,000的稀釋。每個(gè)階段都要c底混合。

結(jié)果計(jì)算

從所有孔的測(cè)試值中減去平均背景值（標(biāo)準(zhǔn)零的平均吸光度讀數(shù)）。

平均每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的雙重讀數(shù)，并使用結(jié)果構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過(guò)使用能夠生成四參數(shù)邏輯曲線擬合的計(jì)算機(jī)軟件來(lái)減少數(shù)據(jù)，構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。也可以使用二階多項(xiàng)式（二次）或其他曲線擬合；然而，它們對(duì)數(shù)據(jù)的擬合精度會(huì)較低。

從標(biāo)準(zhǔn)曲線中插值測(cè)試樣本值。校正血清稀釋因子，得出原始樣本中的IgA濃度。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測(cè)樣品來(lái)源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個(gè)研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長(zhǎng)。

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