IgG亞類定量抗小鼠IgG捕獲和檢測(cè)抗體已被選定用于平衡識(shí)別小鼠IgG的所有亞類，包括IgG3和IgG2c（這是小鼠品系C57Bl/6、C57Bl/10、SJL、NOD中的IgGa類似物）。雖然這提供了血清和其他樣本中多克隆IgG的最準(zhǔn)確定量所有小鼠品系的生物液體，該測(cè)定也適用于準(zhǔn)確單克隆抗體的定量，其中存在顯著的d特型（個(gè)體）和同種異型（菌株）反應(yīng)性差異通常會(huì)產(chǎn)生與標(biāo)準(zhǔn)曲線和某些亞類（尤其是IgG3和IgG2c）在具有非平衡亞類識(shí)別的IgG測(cè)定中。

下圖描述了不同IgG單克隆抗體的稀釋液亞類，其濃度由純化制劑的A280值z(mì)定。所有稀釋曲線基本上與標(biāo)準(zhǔn)曲線平行，標(biāo)準(zhǔn)曲線包含總多克隆IgG，由正常成年人的不同菌株池制備老鼠。

作為Alpha Diagnostic International（ADI）在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Alpha Diagnostic International（ADI）熱銷產(chǎn)品小鼠 IgG ELISA 試劑盒，96 次檢測(cè)，定量。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

小鼠 IgG ELISA 試劑盒，96 次檢測(cè)，定量檢測(cè)原理：

該試劑盒基于樣品中小鼠IgG與兩種抗體的結(jié)合，一種固定在微孔板孔上，另一種與辣根過(guò)氧化物酶（HRP）酶偶聯(lián)。經(jīng)過(guò)洗滌步驟后，添加顯色底物，并通過(guò)HRP在TMB底物上的酶促反應(yīng)產(chǎn)生顏色，該顏色與樣品中IgG的含量直接成比例。添加終止液以終止反應(yīng)，然后使用ELISA微孔板讀數(shù)器在450nm處測(cè)量吸光度。樣品和對(duì)照中IgG的濃度是根據(jù)含有已知濃度IgG的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得出的。

儲(chǔ)存和穩(wěn)定性

如果未開(kāi)封，微孔板和其他所有試劑在2-8攝氏度下穩(wěn)定，直至標(biāo)簽上打印的有效期。工作溶液的穩(wěn)定性在試劑準(zhǔn)備下指示。

標(biāo)本收集和處理

通過(guò)靜脈采血，允許凝血，并在室溫下通過(guò)離心分離血清。不要加熱滅活血清。如果血清不立即檢測(cè)，可冷藏保存最多2周，或冷凍長(zhǎng)期保存。避免凍融循環(huán)。

尚未研究使用血漿，但應(yīng)該是適合檢測(cè)的樣本。

注意事項(xiàng)和安全指南

標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品、樣品稀釋液和抗小鼠IgG-HRP含有Proclin 300（0.05%，v/v）。終止液含有1%硫酸。請(qǐng)遵循良好的實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范，避免任何試劑與皮膚、眼睛或粘膜接觸。所有試劑都可以用大量水沖入下水道。

如果尚未存檔，可以從ADI網(wǎng)站請(qǐng)求或獲得TMB、硫酸和Proclin 300的MSDS。

質(zhì)量控制

試劑 準(zhǔn)確和可重復(fù)的檢測(cè)結(jié)果依賴于適當(dāng)?shù)拇鎯?chǔ)、處理和控制試劑和樣本溫度。按照指示存儲(chǔ)所有試劑，并只將用于檢測(cè)的試劑預(yù)熱至室溫。關(guān)鍵試劑和樣本的保質(zhì)期會(huì)因長(zhǎng)時(shí)間暴露在非冷藏條件下而縮短，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確。所有溶液應(yīng)清澈。渾濁或有顆粒物是試劑污染或不穩(wěn)定的跡象，可能會(huì)干擾檢測(cè)的正常進(jìn)行。如有此情況，請(qǐng)勿使用。

樣本對(duì)照品 試劑盒中提供了一個(gè)陽(yáng)性血清對(duì)照品，并賦予了IgG濃度值范圍。在此范圍內(nèi)的恢復(fù)是檢測(cè)性能良好的指標(biāo)。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室還應(yīng)檢測(cè)內(nèi)部對(duì)照樣本，這些樣本代表實(shí)驗(yàn)室預(yù)期的樣本人群并且保持穩(wěn)定。也應(yīng)該運(yùn)行一個(gè)樣品稀釋液陰性對(duì)照。

標(biāo)準(zhǔn)曲線 標(biāo)準(zhǔn)品產(chǎn)生的信號(hào)應(yīng)該從z低標(biāo)準(zhǔn)到最高標(biāo)準(zhǔn)連續(xù)增加OD，差異大于1.2 OD。不連續(xù)增加或低信號(hào)可能表明技術(shù)、協(xié)議指導(dǎo)和/或試劑準(zhǔn)備、使用或穩(wěn)定性存在問(wèn)題。陰性稀釋對(duì)照的信號(hào)應(yīng)低于z低標(biāo)準(zhǔn)。不要依賴于存在這些問(wèn)題的檢測(cè)產(chǎn)生的結(jié)果。

檢測(cè)程序

將所有試劑預(yù)熱至室溫（18-30攝氏度）平衡（至少30分鐘）。

稀釋 在工作樣品稀釋液中稀釋血清樣本。對(duì)于大多數(shù)正常的小鼠血清，大約40到100k倍的稀釋是適當(dāng)?shù)?。為了?zhǔn)確性，推薦進(jìn)行三個(gè)稀釋步驟，如下：

1) 10ul血清 + 390ul稀釋液 = [1:40]，

2) 20ul [1:40] + 980ul稀釋液 = [1:2k]，

3) 20ul [1:2k] + 980ul稀釋液 = 1:100k。

Alpha Diagnostic International（ADI）公司于1993年成立， 是一家美國(guó)私營(yíng)生物技術(shù)公司，總部位于德克薩斯州圣安東尼奧，具有USDA認(rèn)證的動(dòng)物試驗(yàn)設(shè)施。公司致力于開(kāi)發(fā)、制造和供應(yīng)新型診斷和質(zhì)量控制試劑及檢測(cè)試劑盒，用于人類和動(dòng)物的基礎(chǔ)生物學(xué)和疾病研究。同時(shí)，還提供多肽合成定制服務(wù)和多抗產(chǎn)品以及其他抗體相關(guān)服務(wù)，例如純化親和素，酶耦聯(lián)物，染料，熒光染料等。ADI旨在準(zhǔn)確了解科學(xué)研究人員和診斷測(cè)試界的需求，并迅速提供有效的解決方案，成為科學(xué)界值得信賴的創(chuàng)新試劑和解決方案提供商。

艾美捷科技是Alpha Diagnostic International（ADI）的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。

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