這種人IgG4 S228P/R409K同種型對照抗體與雞蛋R菌酶反應(yīng)，對任何人類樣本的特異性結(jié)合率低或沒有。包括S228P突變以防止IgG4 Fab交換。添加R409K突變已被證明可以防止酸誘導(dǎo)的人IgG4聚集。這種重組人IgG4抗體在CHO細(xì)胞中產(chǎn)生。

作為BioXCell在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioXCell銷售產(chǎn)品RecombiMAb人IgG 4(S228 P/R409 K)同種型對照，抗雞蛋R菌酶。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

RecombiMAb人IgG 4(S228 P/R409 K)同種型對照，抗雞蛋R菌酶：

亞型人類IgG4, κ

推薦稀釋緩沖液InVivoPure pH 7.0稀釋緩沖液

突變S228P/R409K

免疫原雞蛋R菌酶（HEL）

配方PBS，pH 7.0

不含穩(wěn)定劑或防腐劑

內(nèi)毒素<1EU/mg (<0.001EU/μg)

由LAL凝膠凝集試驗(yàn)確定

純度>95%

由SDS-PAGE測定

無菌性0.2微米過濾

生產(chǎn)從無動物設(shè)施中的CHO細(xì)胞上清液中純化

純化蛋白A

分子量150 kDa

鼠源病原體檢測鼠痘病毒/鼠痘：陰性

漢坦病毒：陰性

K病毒：陰性

乳酸脫氫酶升高病毒：陰性

淋巴細(xì)胞性腦膜炎病毒：陰性

小鼠腺病毒：陰性

小鼠巨細(xì)胞病毒：陰性

小鼠肝炎病毒：陰性

小鼠微小病毒：陰性

小鼠諾如病毒：陰性

小鼠細(xì)小病毒：陰性

小鼠輪狀病毒：陰性

支原體肺菌：陰性

小鼠肺炎病毒：陰性

多瘤病毒：陰性

呼吸道病毒篩查：陰性

仙臺病毒：陰性

鼠類腦脊髓炎：陰性

儲存抗體溶液應(yīng)儲存在4°C的原始濃度下。請勿冷凍。

文獻(xiàn)參考：

Namisaki H, Saito S, Hiraishi K, Haba T, Tanaka Y, Yoshida H, Iida S, Takahashi N. (2020). "R409K mutation prevents acid-induced aggregation of human IgG4" PLoS One 15(3):e0229027. 

人M疫球蛋白G同種型4（IgG4）抗體適合以拮抗劑或激動劑形式使用，因?yàn)樗鼈兊牡托?yīng)功能可以防止靶細(xì)胞毒性或不需要的細(xì)胞因子分泌。然而，在制造治療性抗體時，它們在純化過程中暴露于低pH值，IgG4比IgG1更容易受到低pH值誘導(dǎo)的聚集。因此，我們研究了低pH下IgG4聚集的潛在機(jī)制，并設(shè)計了一種穩(wěn)定性增強(qiáng)的IgG4。通過交換IgG1和IgG4的恒定區(qū)，我們確定恒定重鏈（CH3）結(jié)構(gòu)域?qū)奂纬芍陵P(guān)重要，但I(xiàn)gG4中的核心鉸鏈穩(wěn)定S228P突變不足以防止聚集。為了鑒定易聚集的氨基酸，我們將IgG4的CH3結(jié)構(gòu)域替換為IgG1的CH3結(jié)構(gòu)區(qū)，將IgG4 Arg409改為Lys，從而像IgG1一樣有效地防止IgG4變體的聚集。其他可變區(qū)變體也有穩(wěn)定作用。使用差示掃描量熱法對熱穩(wěn)定性進(jìn)行分析表明，R409K取代增加了CH3的Tm值，表明R409K突變有助于CH3-CH3相互作用的結(jié)構(gòu)增強(qiáng)。R409K突變不影響與抗原/人Fcγ受體的結(jié)合；然而，在小鼠模型的體外和體內(nèi)，IgG4中同時存在的S228P和R409K突變顯著抑制了Fab臂交換，其效果與IgG1中的一樣有效。我們的研究結(jié)果表明，IgG4 R409K變體代表了一種潛在的治療性IgG，可用于低效應(yīng)活性形式，表現(xiàn)出更高的穩(wěn)定性。

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