鳥(niǎo)嘌呤是脫氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）中四種常見(jiàn)核苷酸堿基之一。

在雙鏈DNA中，鳥(niǎo)嘌呤與另一條鏈上的胞嘧啶形成堿基對(duì)，而RNA鏈也可以折疊成二級(jí)結(jié)構(gòu)，例如通過(guò)相同的鳥(niǎo)嘌呤/胞嘧啶堿基配對(duì)穩(wěn)定的發(fā)夾環(huán)。這種結(jié)合通過(guò)三個(gè)氫鍵實(shí)現(xiàn)。細(xì)胞中的鳥(niǎo)嘌呤由鳥(niǎo)苷酸磷酸化酶從鳥(niǎo)苷和磷酸合成。

鳥(niǎo)嘌呤在生物體內(nèi)有多種作用，包括w裝、展示和視覺(jué)功能。此外，一些兩棲動(dòng)物、蜘蛛和蝎子會(huì)將氨轉(zhuǎn)化為鳥(niǎo)嘌呤，后者可以以極少量的水分流失排出體外。有趣的是，根據(jù)NASA對(duì)含有鳥(niǎo)嘌呤和其他核苷酸堿基的隕石的研究，鳥(niǎo)嘌呤可以在地球以外的環(huán)境中形成。

Cell Biolabs的鳥(niǎo)嘌呤檢測(cè)試劑盒是一種簡(jiǎn)單的比色法測(cè)定方法，可在96孔微孔板格式中測(cè)量生物樣本中的總鳥(niǎo)嘌呤含量。

每套試劑盒提供的試劑足以進(jìn)行多達(dá)100次測(cè)定，包括空白、鳥(niǎo)嘌呤標(biāo)準(zhǔn)品和未知樣本。樣本中的鳥(niǎo)嘌呤濃度通過(guò)與已知濃度的鳥(niǎo)嘌呤標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行比較來(lái)確定。試劑盒的檢測(cè)靈敏度限為3.1 ?M鳥(niǎo)嘌呤。

*注意：每個(gè)樣本重復(fù)需要2次測(cè)定，一次加入鳥(niǎo)嘌呤脫氨酶（+GDA），一次不加（-GDA）。鳥(niǎo)嘌呤的含量通過(guò)兩個(gè)孔的吸光度（OD）讀數(shù)差異計(jì)算得出。

作為Cell Biolabs全國(guó)總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Cell Biolabs熱銷(xiāo)產(chǎn)品鳥(niǎo)嘌呤測(cè)定試劑盒(熒光法)。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

鳥(niǎo)嘌呤測(cè)定試劑盒(熒光法)檢測(cè)原理：

該試劑盒用于測(cè)量生物樣本中的總鳥(niǎo)嘌呤含量。鳥(niǎo)嘌呤在鳥(niǎo)嘌呤脫氨酶的作用下轉(zhuǎn)化為黃嘌呤，隨后黃嘌呤在黃嘌呤氧化酶（XO）的作用下轉(zhuǎn)化為尿酸和過(guò)氧化氫。生成的過(guò)氧化氫通過(guò)一種高特異性的比色探針進(jìn)行檢測(cè)。辣根過(guò)氧化物酶催化探針與過(guò)氧化氫之間的反應(yīng)，兩者以1:1的比例結(jié)合。樣本與已知濃度的鳥(niǎo)嘌呤標(biāo)準(zhǔn)品在96孔微孔板格式中進(jìn)行比較。樣本和標(biāo)準(zhǔn)品在孵育15分鐘后，使用標(biāo)準(zhǔn)96孔比色板讀取器進(jìn)行讀取。

試劑盒組成（藍(lán)冰運(yùn)輸）：

鳥(niǎo)嘌呤標(biāo)準(zhǔn)品（部件號(hào)51471C）：一支50 ?L的20 mM溶液。

10X測(cè)定緩沖液（部件號(hào)268002）：一瓶25 mL的500 mM磷酸鈉緩沖液，pH 7.4。

比色探針（部件號(hào)50222C）：一支50 ?L的DMSO溶液。

辣根過(guò)氧化物酶（HRP，部件號(hào)234402-T）：一支10 ?L的100 U/mL溶液，溶于甘油中。

50X鳥(niǎo)嘌呤脫氨酶（部件號(hào)51472D）：一支100 ?L管。

黃嘌呤氧化酶（部件號(hào)50904D）：一支100 ?L的2.5 U/mL溶液。

*注：酶的單位定義為在pH 7.5、25°C條件下，每分鐘將1.0 ?mol黃嘌呤轉(zhuǎn)化為尿酸的酶量。使用次黃嘌呤作為底物時(shí)，可獲得約50%的活性。

相關(guān)產(chǎn)品：

MET-5014：NAD?/NADH檢測(cè)試劑盒（比色法）

MET-5150：黃嘌呤/次黃嘌呤檢測(cè)試劑盒（熒光法）

STA-380：全基因組DNA甲基化ELISA試劑盒（比色法）

MET-5070：甘氨酸檢測(cè)試劑盒（熒光法）

MET-5086：氨檢測(cè)試劑盒（比色法）

未提供材料：

磷酸鹽緩沖液（PBS）

標(biāo)準(zhǔn)96孔透明微孔板和/或透明細(xì)胞培養(yǎng)微孔板

儲(chǔ)存

收到試劑盒后，將10X測(cè)定緩沖液置于室溫保存，其余組分保存于-20℃。比色探針對(duì)光敏感，需妥善保存。避免多次凍融循環(huán)。

*注：s次解凍100X鳥(niǎo)嘌呤脫氨酶或黃嘌呤氧化酶后，建議分裝成小份量并保存于-20℃。

結(jié)果示例：

下圖展示了典型的鳥(niǎo)嘌呤檢測(cè)試劑盒（比色法）結(jié)果。以下數(shù)據(jù)僅供參考，不應(yīng)用于解釋或計(jì)算實(shí)際樣本結(jié)果。

圖：鳥(niǎo)嘌呤標(biāo)準(zhǔn)曲線。

文獻(xiàn)參考：

1. Shafer RH (1997). Prog. Nuc. Acid. Res. Mol. Biol. 59: 55-94

2. Votyakova TV, and Reynolds IJ (2001) Neurochem. 79:266.

3. Gur D, Palmer BA, Weiner, S, and Addadi L (2017) Adv. Func. Mat. 27:1-13

4. Callahan, Smith KE, Cleaves HJ, Ruzica J, Stern JC, Glavin DP, House CH, and Dworkin JP (2011)

Proc Natl Acad Sci. 108: 13995-13998.

Cell Biolabs公司位于美國(guó)加利福尼亞州南部重要的工業(yè)城市圣迭戈（San Diego），是有名的細(xì)胞學(xué)試劑品牌，作為前沿的細(xì)胞學(xué)分析檢測(cè)試劑盒生產(chǎn)商，為生物技術(shù)和研究類(lèi)客戶(hù)提供好的基于細(xì)胞功能研究以及疾病等方面的g端產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。產(chǎn)品主要涵蓋細(xì)胞研究、細(xì)胞信號(hào)通路和蛋白質(zhì)生物學(xué)、代謝研究、病原體和毒素、干細(xì)胞研究等領(lǐng)域。全球眾多大學(xué)、政府研究機(jī)構(gòu)、生物、制藥企業(yè)的科研實(shí)驗(yàn)室均在使用Cell Biolabs的產(chǎn)品。  

鳥(niǎo)嘌呤測(cè)定試劑盒(熒光法)鳥(niǎo)嘌呤測(cè)定試劑盒(熒光法)