組蛋白是真核細(xì)胞染色體蛋白部分的主要組成成分。它們富含精氨酸和賴氨酸，并且在進(jìn)化過程中高度保守。組蛋白將DNA緊密打包成染色質(zhì)。每類核心組蛋白H2A、H2B、H3和H4各有兩個(gè)組裝在一起，并被146個(gè)堿基對的DNA纏繞，形成一個(gè)八聚體核小體。組蛋白在轉(zhuǎn)錄調(diào)控、DNA修復(fù)、DNA復(fù)制和染色體穩(wěn)定性中發(fā)揮核心作用。這些不同的功能是通過一系列復(fù)雜的翻譯后修飾實(shí)現(xiàn)的，這些修飾直接或間接改變?nèi)旧|(zhì)結(jié)構(gòu)和DNA的可及性，從而促進(jìn)轉(zhuǎn)錄激活、抑制或其他核過程。

針對組蛋白H2A的多克隆抗體，使用與KLH（鑰孔血藍(lán)蛋白）偶聯(lián)的合成肽作為免疫原，該合成肽包含蛋白C末端的未修飾序列，在兔中制備。

作為BPS Bioscience在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BPS Bioscience銷售產(chǎn)品Anti-H2Apan多克隆抗體。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

Anti-H2Apan多克隆抗體：

克隆性：多克隆  

宿主物種/表達(dá)系統(tǒng)：兔  

純化方式：親和純化  

形式：水溶液緩沖液  

配方：含0.05%疊氮化物和0.05% ProClin 300的PBS  

濃度：50 ?g/79 ?l  

免疫原：合成肽  

儲存/穩(wěn)定性：  在-80°C下可保存長達(dá)2年。s次解凍后離心以z大化產(chǎn)品回收。分裝保存以避免反復(fù)凍融。分裝后可在-20°C下至少保存一個(gè)月。

使用針對H2Apan的抗體進(jìn)行ChIP實(shí)驗(yàn)的結(jié)果：  

使用人類HeLa細(xì)胞、針對H2Apan的抗體（產(chǎn)品編號25226）和優(yōu)化的qPCR引物組合進(jìn)行ChIP實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)使用了來自10,000個(gè)細(xì)胞的剪切染色質(zhì)，并通過SX-8G IP-Star自動(dòng)化系統(tǒng)完成?？贵w用量為每個(gè)ChIP實(shí)驗(yàn)1、2、5和10 ?g，并進(jìn)行了梯度分析。IgG（5 ?g/IP）作為陰性免疫沉淀對照。使用針對GAPDH啟動(dòng)子和非活性MYOD基因的引物進(jìn)行qPCR。圖1顯示了回收率，以輸入量的百分比表示（經(jīng)qPCR分析后，免疫沉淀DNA與輸入DNA的相對量）。

抗體滴度測定：  

為了測定抗體的滴度，使用針對H2Apan（產(chǎn)品編號25226）的抗體進(jìn)行了一系列稀釋的ELISA實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)中使用了粗提血清和流穿液在抗原包被的孔中進(jìn)行檢測。通過繪制吸光度與抗體稀釋度的關(guān)系圖（圖2），估計(jì)抗體的滴度為1:1,800。

使用針對H2Apan的抗體進(jìn)行交叉反應(yīng)性測試：  

通過點(diǎn)樣分析（Dot Blot）測試針對H2Apan（產(chǎn)品編號25226）的抗體與用于免疫兔子的肽以及其他包含不同組蛋白未修飾序列的肽的交叉反應(yīng)性。將100至0.2皮摩爾的相應(yīng)肽點(diǎn)在膜上?？贵w稀釋度為1:20,000。圖3顯示了抗體對H2A肽的高度特異性。

應(yīng)用范圍：  

ChIP（1 – 2 ?g/ChIP）  

ELISA（1:50）  

點(diǎn)樣分析（Dot Blot，1:20,000）  

運(yùn)輸溫度：-20°C或-80°C  

物種反應(yīng)性：人類  

注意事項(xiàng)：最終用戶應(yīng)自行確定每IP所需的優(yōu)良抗體用量。我們建議每IP測試1–5 ?g。  

警告：避免反復(fù)凍融。  

科學(xué)分類：抗體  

監(jiān)管狀態(tài)：僅限研究使用

產(chǎn)品數(shù)據(jù)庫：

BPS Bioscience是一家通過ISO 9001:2015認(rèn)證的生命科學(xué)領(lǐng)域的供應(yīng)商，公司一直致力于開發(fā)藥物研發(fā)領(lǐng)域的重組蛋白酶、蛋白酶活性/抑制劑篩選試劑盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年創(chuàng)立，從創(chuàng)立至今一直致力于提供藥物研發(fā)領(lǐng)域的創(chuàng)新解決方案，以推動(dòng)新的藥物發(fā)現(xiàn)a。公司主要關(guān)注的領(lǐng)域包括免疫療法、表觀遺傳學(xué)、CRISPR、細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、組蛋白去甲基化酶、組蛋白甲基化轉(zhuǎn)移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 

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