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多克隆抗體,針對含有乙?;嚢彼?(H2AK5ac)的組蛋白H2A區(qū)域,使用KLH偶聯的合成肽免疫制備。
作為BPS Bioscience在中國的區(qū)域總代理,艾美捷科技強烈推薦BPS Bioscience熱銷產品Anti-H2AK5ac多克隆抗體。產品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
產品名稱 | 貨號 | 詳情 |
Anti-H2AK5ac多克隆抗體 | BPS-25230 | 查看 |
Anti-H2AK5ac多克隆抗體:
單克隆性:多克隆
宿主物種/表達系統:兔
純化方法:親和純化
形式:水性緩沖溶液
配方:含有0.05%疊氮化物和0.05% ProClin 300的PBS
濃度:50 ?g/54 ?l
免疫原:合成肽
儲存/穩(wěn)定性
儲存于–80°C,最長可達2年。分裝以避免反復凍融循環(huán)。分裝樣本可在–20°C下至少儲存一個月。
針對H2AK5ac的抗體的ChIP結果 :
使用人類HeLa細胞、針對H2AK5ac的抗體(產品編號25230)以及優(yōu)化的qPCR引物對進行染色質免疫沉淀(ChIP)實驗。實驗使用了150萬細胞的剪切染色質。實驗中使用了0.5、1、2和5 ?g的抗體梯度,并以IgG(1 ?g/IP)作為陰性免疫沉淀對照。qPCR使用特異性引物針對GAPDH和ACTB基因啟動子上游約1 kb的區(qū)域(作為陽性對照)以及非活性MYOD1基因的編碼區(qū)和Sat2衛(wèi)星重復序列(作為陰性對照)。圖1顯示了回收率,以輸入量的百分比表示(免疫沉淀DNA相對于輸入DNA的相對量,經qPCR分析后得出)。
針對H2AK5ac的抗體的ChIP-seq結果 :
使用0.5 ?g針對H2AK5ac的抗體(產品編號25230),對150萬HeLaS3細胞的剪切染色質進行ChIP實驗,如上所述。隨后,免疫沉淀DNA通過Illumina HiSeq進行分析。文庫制備、簇生成和測序均按照制造商的說明進行。51 bp標簽通過BWA算法與人類基因組比對。圖2顯示了整個序列的富集情況以及X染色體上1 Mb區(qū)域(圖2A和B)和7號染色體上ACTB基因周圍區(qū)域以及12號染色體上GAPDH基因周圍區(qū)域的基因組區(qū)域(圖2C和D)。用于ChIP-qPCR的擴增子位置用箭頭表示。
抗體效價測定 :
為了測定抗體的效價,采用ELISA方法,使用針對H2AK5ac(產品編號25230)的抗體稀釋液在抗原包被的孔中進行檢測。所用抗原為含有感興趣組蛋白修飾的肽。通過繪制吸光度與抗體稀釋度的關系圖(圖2),估計抗體的效價為1:25,000。
針對H2AK5ac的抗體的交叉反應性測試 :
為了測試針對H2AK5ac(產品編號25230)的抗體的交叉反應性,采用點樣分析法(Dot Blot),使用含有其他組蛋白修飾和未修飾的H2AK5序列的肽。將100至0.2皮摩爾的相應肽點樣于膜上??贵w稀釋度為1:5,000。圖3顯示該抗體對感興趣的修飾具有高特異性。
針對H2AK5ac的抗體的Western blot分析 :
采用Western blot方法,對HeLa細胞的全細胞提取物(25 ?g,第1泳道)和組蛋白提取物(15 ?g,第2泳道)以及1 ?g的重組組蛋白H2A、H2B、H3和H4(分別對應第3、4、5和6泳道)進行檢測,使用針對H2AK5ac(產品編號25230)的抗體??贵w在含有5%脫脂奶粉的TBS-Tween中稀釋1:1,000。左側顯示了標記的分子量(以千道爾頓計)。
應用 :
- ChIP/ChIP-seq(0.5 – 1 ?g/ChIP)
- ELISA(1:4000)
- 點樣分析(DB,1:5000)
- Western blot(WB,1:1000)
運輸溫度:–20°C或–80°C
物種反應性:人
注意事項:最終用戶應確定每次免疫沉淀的最佳抗體用量。我們建議測試1–5 ?g/IP。
警告:避免反復凍融循環(huán)。
科學分類:抗體
監(jiān)管狀態(tài):僅限研究使用
產品數據庫:
BPS Bioscience是一家通過ISO 9001:2015認證的生命科學領域的供應商,公司一直致力于開發(fā)藥物研發(fā)領域的重組蛋白酶、蛋白酶活性/抑制劑篩選試劑盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年創(chuàng)立,從創(chuàng)立至今一直致力于提供藥物研發(fā)領域的創(chuàng)新解決方案,以推動新的藥物發(fā)現a。公司主要關注的領域包括免疫療法、表觀遺傳學、CRISPR、細胞信號轉導等,主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、組蛋白去甲基化酶、組蛋白甲基化轉移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。
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Anti-H2AK5ac多克隆抗體Anti-H2AK5ac多克隆抗體
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