以兔為宿主制備的針對(duì)含有單甲基化賴氨酸27（H3K27me1）的組蛋白H3的多克隆抗體，使用KLH偶聯(lián)的合成肽作為免疫原。

作為BPS Bioscience在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BPS Bioscience銷售產(chǎn)品Anti-H3K27me1多克隆抗體。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

Anti-H3K27me1多克隆抗體：

克隆性：多克隆

宿主物種/表達(dá)系統(tǒng)：兔

純化方法：親和純化

形式：水溶液

配方：含有0.05%疊氮化物和0.05% ProClin 300的PBS緩沖液

濃度：50 ?g/26 ?l

免疫原：合成肽

儲(chǔ)存/穩(wěn)定性

在-80°C下可保存長(zhǎng)達(dá)2年。分裝以避免反復(fù)凍融。分裝后可在-20°C下保存至少一個(gè)月。

應(yīng)用

ChIP（2 ?g/ChIP）

ELISA（1:100 - 1:500）

點(diǎn)雜交（1:20,000）

Western Blot（1:1000）

免疫熒光（1:1000）

運(yùn)輸溫度：-20°C或-80°C

物種反應(yīng)性：人

備注：每次免疫沉淀的抗體優(yōu)良用量應(yīng)由終端用戶確定。建議測(cè)試1 - 5 ?g/次。

注意事項(xiàng)：避免反復(fù)凍融。

科學(xué)分類：抗體

監(jiān)管狀態(tài)：僅限研究使用

染色質(zhì)免疫沉淀（ChIP）實(shí)驗(yàn)結(jié)果

使用針對(duì)H3K27me1的抗體（產(chǎn)品編號(hào)25240）和優(yōu)化的qPCR引物組合，在人HeLa細(xì)胞中進(jìn)行ChIP實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)使用了10萬個(gè)細(xì)胞的剪切染色質(zhì)?？贵w用量梯度為1、2、5和10 ?g/次ChIP實(shí)驗(yàn)，并進(jìn)行了分析。以2 ?g/IP的IgG作為陰性免疫沉淀對(duì)照。定量PCR使用了活性基因GAPDH的啟動(dòng)子區(qū)域引物作為陰性對(duì)照，以及其編碼區(qū)引物作為陽性對(duì)照。

抗體滴度測(cè)定

為了測(cè)定抗體滴度，使用針對(duì)H3K27me1的抗體（產(chǎn)品編號(hào)25240）、粗提血清和流穿液進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)，抗體進(jìn)行梯度稀釋。使用的抗原是含有目標(biāo)組蛋白修飾的肽段。通過繪制吸光度與抗體稀釋度的關(guān)系圖，估計(jì)純化抗體的滴度為1:32,900。

交叉反應(yīng)性測(cè)試

使用針對(duì)H3K27me1的抗體（產(chǎn)品編號(hào)25240）進(jìn)行點(diǎn)雜交分析，測(cè)試其與其他修飾的肽段以及組蛋白H3和H4的未修飾序列的交叉反應(yīng)性。將含有相應(yīng)組蛋白修飾的肽段（100至0.2 pmol）點(diǎn)在膜上，抗體稀釋度為1:20,000。

Western Blot分析

使用針對(duì)H3K27me1的抗體（產(chǎn)品編號(hào)25240），對(duì)HeLa細(xì)胞的組蛋白提取物（15 ?g）進(jìn)行Western Blot分析。抗體在含有5%脫脂奶粉的TBS-Tween中稀釋1:1000。右側(cè)標(biāo)記了目標(biāo)蛋白的位置，左側(cè)顯示了分子量標(biāo)記（單位：kDa）。

免疫熒光分析

人骨肉瘤（U2OS）細(xì)胞用針對(duì)H3K27me1的抗體（產(chǎn)品編號(hào)25240）和DAPI進(jìn)行染色。細(xì)胞用4%甲醛固定20分鐘，并用含有5%正常山羊血清的PBS/TX-100進(jìn)行封閉。

圖A：細(xì)胞用H3K27me1抗體（左側(cè)）在封閉液中稀釋1:1000進(jìn)行免疫熒光標(biāo)記，隨后用與Alexa568偶聯(lián)的抗兔抗體進(jìn)行二抗標(biāo)記，或用DAPI（右側(cè)）標(biāo)記，特異性標(biāo)記DNA。

圖B、C、D和E：分別在抗體與含有未修飾的H3K27以及單甲基化、雙甲基化和三甲基化H3K27的阻斷肽孵育后，用H3K27me1抗體對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色。

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Anti-H3K27me1多克隆抗體Anti-H3K27me1多克隆抗體