欧美……一区二区三区,欧美日韩亚洲另类视频,亚洲国产欧美日韩中字,日本一区二区三区dvd视频在线

產(chǎn)品展廳收藏該商鋪

您好 登錄 注冊

當前位置:
上海撫生實業(yè)有限公司>技術(shù)文章>ELISA定性測定結(jié)果判斷方法介紹

技術(shù)文章

ELISA定性測定結(jié)果判斷方法介紹

閱讀:109          發(fā)布時間:2024-3-11

      ELISA定性測定的結(jié)果判斷是對受檢標本中是否含有待測抗原或抗體作出 "有"或"無"的簡單回答,分別用"陽性"、"陰性"表示。"陽性"表示該標本在該測定系統(tǒng)中有反應。"陰性"則為無反應。用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果,即用滴度來表示反應的強度,其實質(zhì)仍是一個定性試驗。在這種半定量測定中,將標本作一系列稀釋后進行試驗,呈陽性反應的稀釋度即為滴度。根據(jù)滴度的高低,可以判斷標本反應性的強弱,這比觀察不稀釋標本呈色的深淺判斷為強陽性、弱陽性具定量意義。在間接法和夾心法 ELSIA中,陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA中則相反,陰性孔呈色深于陽性孔。兩類反應的結(jié)果判斷方法不同,介紹如下:

c7b6b1015aa042d8ee452026e37a33ad.jpg

1、  間接法和夾心法

這類反應的定性結(jié)果可以用肉眼判斷。目視標本也無色或近于無色者判為陰性,顯色清晰者為陽性。但在 ELSIA中,正常人血清反應后常可出現(xiàn)呈色的本底,此本底的深淺因試劑的組成和實驗的條件不同而異,因此實驗中必須加測陰性對照。陰性對照的組成應為不含受檢物的正常血清或類似物。在用肉眼判斷結(jié)果時,宜用顯色深于陰性對照作為標本陽性的指標。目視法簡捷明了,但頗具主觀性。在條件許可下,應該用比色計測定吸光值,這樣可以得到客觀的數(shù)據(jù)。先讀出標本(sample,S)、陽性對照(P)、和陰性對照(N)的吸光值,然后進行計算。計算方法有多種,大致可分為陽性判定值法和標本與陰性對照比值法兩類。

a. 陽性判定值

陽性判定值(cut-off value)一般為陰性對照A值加上一個特定的常數(shù),以此作為判斷結(jié)果陽性或陰性的標準。

用此法判斷結(jié)果要求實驗條件十分恒定,試劑的制備必須標準化,陽性和陰性的對照品應符合一定的規(guī)格,須配用的儀器,并嚴格按規(guī)定操作。陽性判定值公式中的常數(shù)是在這特定的系統(tǒng)中通過對大量標本的實驗檢測而得到的?,F(xiàn)舉某種檢測 HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復鈣人血漿,陽性對照品HBsAg的含量標明為P=9±2ng /ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均數(shù)(NC X )和陽性對照A值的平均數(shù)(PCX),兩個平均數(shù)的差(P-N)必須大于一個特定的數(shù)值(例0.400),試驗才有效。3個陰性對照A值均應≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而已另兩個陰性對照重新計算NCX;如有兩個陰性對照A值超出以上范圍,則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算:

陽性判定值=NCX+0.05

標本 A值>陽性判定值的為陽性,小于陽性判定值的為陰性。應注意的是,式中0.05為該試劑盒的常數(shù),只適合于該特定條件下,而不是對各種試劑均可通用。

根據(jù)以上敘述可以看出,在這種方法中陰性對照和陽性對照也起到試驗的質(zhì)控作用,試劑變質(zhì)和操作不當均會產(chǎn)生"試驗無效"的后果。

b. 標本/陰性對照比值

在實驗條件(包括試劑)較難保證恒定的情況下,這種判斷法較為合適。在得出標本( S)和陰性對照(N)的A值后,計算S/N值。也有寫作P/N的,這里的P不代表陽性(positive),而是病人(patient)的縮寫,不應誤解。為避免混淆,宜用S/N表示。在早期的間接法ELISA中,有些作者定出S/N為陽性標準,現(xiàn)多為各種測定所沿用。實際上每一測定系統(tǒng)應該用實驗求出各自的S/N的閾值。應注意的是,N所代表的陰性對照是不含受檢物質(zhì)的人血清。有的試劑盒中所設陰性對照為不含蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)含量較底的緩沖液,以致反應后產(chǎn)生的本底可能較正常人血清的本底低得多。因此,這類試劑盒規(guī),如N<0.05(或其他數(shù)值),則按0.05計算,否則將出現(xiàn)假陽性結(jié)果。


2、 競爭法

在競爭法 ELISA中,陰性孔呈色深于陽性孔。陰性呈色的強度取決于反應中酶結(jié)合物的濃度和加入競爭抑制物的量,一般調(diào)節(jié)陰性對照的吸光度在1.0-1.5之間,此時反應為敏感。

競爭法 ELISA不易用自視判斷結(jié)果,因肉眼很難辨別弱陽性反應與陰性對照的顯色差異,一般均用比色計測定,讀出S、P和N的吸光值。計算方法主要也有兩種,即陽性判定值法和抑制率法。

a. 陽性判定值法

與間接法和夾心法中的陽性判定值法基本相同,但在計算公式中引入陽性對照 A值,現(xiàn)舉某種檢測抗HBc的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照為不含抗HBc的復鈣人血漿,陽性對照中抗HBc含量為125±1 00u/ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均值(NC X )和陽性對照A值的平均數(shù)(PCX),兩個平均數(shù)的差(N-P)必須大于一個特定的數(shù)值(例如0.300),試驗才有效。3個陰性對照A值均應小于2.000,而且應≥0.5×NCX并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而以另2個陰性對照重新計算×NCX;如有2個陰性對照A超出以上范圍,則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算:

陽性判定值=0.4×NCX+0.6×PCX

標本A值≤陽性判定值的反應為陽性,A>陽性判定值的反應為陰性。

b. 抑制率法

抑制率表示標本在競爭結(jié)合中標本對陰性反應顯色的抑制程度,按下式計算:

抑制率(%)= (陰性對照A值-標本A值)×/陰性對照A值

一般規(guī)定抑制率≥50%為陽性,<50%為陰性。


收藏該商鋪

登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~

對比框

產(chǎn)品對比 產(chǎn)品對比 聯(lián)系電話 二維碼 意見反饋 在線交流

掃一掃訪問手機商鋪
021-52961052
在線留言
极品人妻少妇一区二区| 国产精品一区二区三区在线视| 女性av一区二区三区| 人妻久久久中文字幕精品免费| 亚洲欧美日韩亚洲欧美日韩| 日韩乱码一区二区三区在线| 亚洲天堂精品在线观看| 天天做天天爱天天综合色| 欧美日韩网站在线观看| 伊人一区二区三区久久精品| 最近高清中文在线字幕| 蜜臀精品亚洲成av人在线观看| 成人av午夜在线观看| 亚洲中文字幕乱码免费看| 精品国产亚洲av未满十八| 国产免费一级黄色录像| 人妻少妇中文字幕在线| 国产精品麻豆久久成人| 久久精品色欧美一区二区三区| 亚洲欧美日韩精品自拍偷拍| 人妻少妇偷人精品久久| 99精品久久久国产一区| 亚洲妇女黄色三级视频| 激情中文字幕一区二区三区| 91爱爱视频在线观看| 五月色婷婷在线观看视频| 亚洲 中文字幕人成乱码| 久久视频这里只要精品| 亚洲天堂婷婷中文字幕| 欧美国产成人在线观看| 日韩国产丝袜人妻一二区| 国产精品熟女露脸对白| 欧美经典在线一区二区| 国产av系列在线观看| 人妻诱惑精品视频专区| 内射后入日韩欧美精品| 亚洲欧美一区二区三区不卡视频| 九一国产精品一区二区| 巨人福利视频网址导航| av一区二区三区精品自拍偷拍| 人人妻人人爽欧美一区二区三区|