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技術(shù)文章

ELISA實驗顯色淡詳細解讀

閱讀:86          發(fā)布時間:2024-5-13

       ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗)是一種用于檢測抗原或抗體濃度的免疫學試驗。如果ELISA實驗的顯色淡或靈敏度低,可能有多種原因。


ELISA實驗顯色淡的原因及解決方案:

 

    原因一:試劑盒在運輸途中時間太長,溫度太高。

    解決方案:盡量縮短運輸時間,夏季應(yīng)放冰塊降溫。

 

    原因二:試劑盒未充分平衡。

    解決方案:試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開盒蓋,于室溫平衡至少20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃)。

 

    原因三:培養(yǎng)箱溫度不足37℃。

    解決方案:注意培養(yǎng)箱溫度,放入反應(yīng)板后盡量減少開啟次數(shù)以免影響溫度恒定,非隔水式培養(yǎng)箱尤其應(yīng)注意。

 

    原因四:保溫時間不足。

    解決方案:校正定時鐘準確定時。

 

    原因五:洗滌時沖擊力太大、浸泡時間過長、洗滌次數(shù)增加。

    解決方案:按說明書要求保留洗滌時間,準確記住洗滌次數(shù)。

 

    原因六:移液器吸液量不足,吸嘴內(nèi)壁掛水太多或內(nèi)壁不清潔。

    解決方案:校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時要緊密,吸嘴內(nèi)壁要清潔,一次性使用。

 

    原因七:蒸餾水水質(zhì)有問題。

    解決方案:使用新鮮合格的蒸餾。

 

    原因八:底物作用時間不足。

    解決方案:準確定時。    

   

    顯色一定要控制時間,根據(jù)試劑盒說明操作即可。一般來說,顯色時間過短,結(jié)果偏低;顯色時間過長,空白增高或者非特異性顯色增加。

 


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