操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱:PI3K/mTOR/DNA-PK抑制劑(LY3023414)
英文名稱:LY3023414 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg PI3K/mTOR/DNA-PK抑制劑(LY3023414)圖片 產(chǎn)品貨號(hào):M00272中文名稱:PI3K/mTOR/DNA-PK抑制劑(LY3023414) 英文名稱:LY3023414產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg發(fā)貨周期:1~3天產(chǎn)品價(jià)格:詢價(jià)LY3023414有效且選擇性地抑制PI3Kα,PI3Kβ,PI3Kδ,PI3Kγ,mTOR和DNA-PK,IC50分別為6.07nM,77.6nM,38nM,23.8nM,165nM和4.24nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1386874-06-1 純度:99.70% 分子量:406.48 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
Pseudomonas核膜糖蛋白210抗體Human TRIM25 ELISA Kit大鼠褪黑(MT)免疫試劑盒
慶豐鏈霉菌GADD153抗體Human TRIM24 ELISA Kit大鼠突觸體/突觸(Syp/SYN)免疫試劑盒
Rummeliibacillus stabekisiiG蛋白偶聯(lián)受體57抗體Human TRIM29 ELISA Kit大鼠突觸蛋白1(Syn1)免疫試劑盒
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華根霉生長(zhǎng)因子受體結(jié)合適應(yīng)蛋白抗體Human TRIM31 ELISA Kit大鼠透明質(zhì)(HA)免疫試劑盒
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棲土曲霉G蛋白γ11/Gγ11 抗體Human TRIM14 ELISA Kit大鼠糖原磷化同工BB(GP-BB)免疫試劑盒
白假絲酵母磷化肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體Human TRIM17 ELISA Kit大鼠糖原磷化(GP)免疫試劑盒
芽孢桿菌屬γ-谷酰轉(zhuǎn)肽7重鏈抗體Human TRIM23 ELISA Kit大鼠糖原合成激3α(GSK3A)免疫試劑盒
炭疽芽胞桿菌生長(zhǎng)激2/胎盤(pán)特異性生長(zhǎng)激抗體Human TRIM2 ELISA Kit大鼠糖原合成激(GSK)免疫試劑盒
拜氏梭菌高爾基體相關(guān)蛋白GM130抗體Human TRIM25 ELISA Kit大鼠糖原合成免疫試劑盒
死亡谷芽孢桿菌Bacillus│vallismortis 質(zhì)量規(guī)格:CP木蝴蝶苷A
茯苓Wolfiporia│extensa (Peck) Ginns 質(zhì)量規(guī)格:325(44um)西貝母堿
膠孢刺盤(pán)孢Colletotrichum│gloeosporioides 質(zhì)量規(guī)格:1250(11um)黃獨(dú)B
PI3K/mTOR/DNA-PK抑制劑(LY3023414)硫代硫鉀
英文名稱: Potassium thiosulfate
產(chǎn)品規(guī)格: AR,98%
包裝:500克
CAS號(hào):10294-66-3
K2S2O3=190.32
級(jí)別:AR
含量:≥98.0%
硫化物:≤0.004%
澄清度試驗(yàn):合格
水不溶物:≤0.015%
鈣:≤0.02%
硫鹽及亞硫鹽:≤0.4%
水溶液反應(yīng):合格
性狀:無(wú)色單斜結(jié)晶。易吸濕。約200℃失水。易溶于水并吸熱,不溶于乙。相對(duì)密度2.59(無(wú)水品)。有刺激性。
用途:生化研究。還原劑。劑。
保存:RT