培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
HSP90抑制劑(17-AAG) | 17-AAG | 1mL(10mM)|10mg|25mg|100mg|200mg | 1~3天 |
商品介紹:
英文名稱:17-AAG 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|25mg|100mg|200mg 17-AAG是HSP90的有效抑制劑,IC50值為5nM;對(duì)腫瘤細(xì)胞中的HSP90親和力比正常細(xì)胞中的高100倍。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):75747-14-7 別名:Tanespimycin;NSC 330507;CP 127374 純度:98.45% 分子量:585.69 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
殺鮭氣單胞菌鈣粘蛋白14抗體Human HOGA1(Probable 4-hydroxy-2-oxoglutaRate aldolase, mitochondrial) ELISA Kit人抗狼瘡抗凝抗體(IgG)免疫試劑盒
層出鐮孢菌鈣激活氯離子通道蛋白3抗體Human UNC5C(Netrin receptor UNC5C) ELISA Kit人抗蘭尼堿受體鈣釋放通道抗體免疫試劑盒
大腸埃希氏菌CD200受體抗體Human SUSD2(Sushi domain-containing protein 2) ELISA Kit人抗狂犬病(RV)抗體免疫試劑盒
Pseudomonas psychrotolerans彈性蛋白1抗體Human MTPAP(Poly(A) RNA polymerase, mitochondrial) ELISA Kit人抗狂犬病(RV)抗體(IgM)免疫試劑盒
粗皮側(cè)耳(平菇)干生長因子受體/表面分化抗原抗體Human ZNF654(Zinc finger protein 654) ELISA Kit人抗狂犬病(RV)抗體(IgG)免疫試劑盒
秦氏蜜環(huán)菌CD99樣蛋白2抗體Human ERN1(Serine/threonine-protein kinase/endoribonuclease IRE1) ELISA Kit人抗可提取核抗原抗體(ENA-Ab)免疫試劑盒
球毛殼鈣粘蛋白相關(guān)蛋白CTNNA3抗體Human COQ10A(Coenzyme Q-binding protein COQ10 homolog A, mitochondrial) ELISA Kit人抗可溶性肝抗原抗體(SLA)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌緊密連接蛋白15抗體Human PIN1(Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase NIMA-interacting 1) ELISA Kit人抗菌肽LL-37 免疫試劑盒
草本枝孢緊密連接蛋白12抗體Human CES5A(Carboxylesterase 5A) ELISA Kit人抗菌肽(CAMP)免疫試劑盒
潔小菇CHIC2蛋白抗體Human PARM1(Prostate androgen-regulated mucin-like protein 1) ELISA Kit人抗菌肽(Attacin)免疫試劑盒
楊奇青霉磷化周期檢測點(diǎn)激1抗體Human LETMD1(LETM1 domain-containing protein 1) ELISA Kit人抗巨病(CMV)抗體(IgM)免疫試劑盒
青色鏈霉菌磷化周期檢測點(diǎn)激2抗體Human FAF2(FAS-associated factor 2) ELISA Kit人抗巨病(CMV)抗體(IgG)免疫試劑盒
短芽孢桿菌磷化周期檢測點(diǎn)激2抗體Human SPINK7(Serine protease inhibitor Kazal-type 7) ELISA Kit人抗巨噬抗體(anti-macrophage Ab)免疫試劑盒
蒼黃鏈霉菌磷化周期檢測點(diǎn)激2抗體Human MTX3(Metaxin-3) ELISA Kit人抗性磷5b(TRACP-5b)免疫試劑盒
橄欖鏈霉菌磷化周期檢測點(diǎn)激2抗體Human FAM151A(Protein FAM151A) ELISA Kit人抗抗體(AsAb)免疫試劑盒
E.coli DH5α λpir遺傳性脈絡(luò)膜缺乏癥相關(guān)蛋白抗體Human MTPAP(Poly(A) RNA polymerase, mitochondrial) ELISA Kit人抗角蛋白絲聚集/絲集蛋白抗體(AFA)免疫試劑盒
雜色曲霉Aspergillus│versicolor 質(zhì)量規(guī)格:堿指示劑Ⅰ型膠原C端肽試劑盒澤瀉F
結(jié)核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質(zhì)量規(guī)格:CPⅠ型膠原試劑盒青蒿
假交替單胞菌Pseudoalteromonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:0.981型1-磷鞘受體試劑盒黃芪中分離物
HSP90抑制劑(17-AAG)尿囊
其他 1-脲基間二氮雜茂烷-2,4-二;尿基間二-氮茂烷-2,4-二;2,5-二氧代-4-咪唑烷基脲;1-脲基間二氮雜茂烷二-[2,4];脲囊;(2, 5-二氧化-4-咪唑烷基)脲
英文名稱: Allantoin
其他英文名稱: Glyoxyldiureide;Glyoxylic(acid)diureide
產(chǎn)品規(guī)格: BR,98.5%
包裝:10克/100克/500克
CAS號(hào):97-59-6
C33H36N4O6=584.67
級(jí)別:BR
含量:98.5~100.5%
氫氧化鈉溶解試驗(yàn):合格
灼燒殘?jiān)?/span>≤0.05%
性狀:無色結(jié)晶性粉末。無臭。無味。1G溶于190ml水,500ml乙,更多溶于熱水和熱乙。飽和水溶液的pH為5.5。熔點(diǎn)238~240℃。
用途:生化研究。具有兩性性質(zhì),可與許多物質(zhì)生成金屬鹽和加合物并能保持原有特性。其飽和水溶液(0.6%)呈(pH=6),在pH=4~9的水溶液中能保持穩(wěn)定,在堿性溶液中和長時(shí)間煮沸時(shí)發(fā)生分解。飽和水溶液的pH為5.5
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