操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱:廣譜PI3K抑制劑(LY294002)
英文名稱:LY294002 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg LY294002是一種廣譜PI3K抑制劑,抑制PI3Kα/δ/β,IC50分別為0.5/0.57/0.97μM,也抑制CK2,IC50為98nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:154447-36-6 別名:NSC 697286;SF 1101 純度:99.97% 分子量:307.34 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
根瘤菌19號染色體開放閱讀框42抗體Human ATG4B ELISA Kit人組織蛋白C(CTSC)免疫試劑盒
膠凍樣芽胞桿菌19號染色體開放閱讀框44抗體Human ATG7(Autophagy-related protein 7) ELISA Kit人組織蛋白B(CTSB)免疫試劑盒
釀酒酵母19號染色體開放閱讀框48抗體Human BBS8 ELISA Kit人組蛋白乙?;?HAT)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌19號染色體開放閱讀框50抗體Human ATPB(ATP synthase subunit beta) ELISA Kit人組蛋白脫乙?;?(HDAC2)免疫試劑盒
長枝木霉19號染色體開放閱讀框51抗體Human ATIC ELISA Kit人組蛋白去乙?;?(HDAC3)免疫試劑盒
硬水黃桿菌19號染色體開放閱讀框52抗體Human ARP2 ELISA Kit人組蛋白去乙?;?HDAC)免疫試劑盒
Bacillus anthracis19號染色體開放閱讀框55抗體Human ATR ELISA Kit人組蛋白賴N-甲基轉(zhuǎn)移SETD7(SETD7)免疫試劑盒
巨獸芽孢桿菌19號染色體開放閱讀框56抗體Human ATG4B ELISA Kit人組蛋白H3.3(H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B)免疫試劑盒
四川散斑殼19號染色體開放閱讀框57抗體Human BBS8 ELISA Kit人組蛋白H2b(histon-H2b)免疫試劑盒
玉蕈離褶傘19號染色體開放閱讀框61抗體Human ATG7(Autophagy-related protein 7) ELISA Kit人組(HIS)免疫試劑盒
黑曲霉19號染色體開放閱讀框77抗體Human ATIC ELISA Kit人足標(biāo)記蛋白/足盂蛋白(PCX)免疫試劑盒
產(chǎn)棒桿菌核DNA結(jié)合蛋白C1D抗體Human ATPB(ATP synthase subunit beta) ELISA Kit人總蛋白S(TPS)免疫試劑盒
奧氏蜜環(huán)菌1號染色體開放閱讀框58抗體Human ARP2 ELISA Kit人總蛋白C(TPC)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌21號染色體開放閱讀框66抗體Human AXL(Tyrosine-protein kinase receptor UFO) ELISA Kit人自然抗性相關(guān)巨噬蛋白2(NRAMP-2)免疫試劑盒
嗜低鹽適鹽菌CDC42效應(yīng)蛋白3抗體Human ATR ELISA Kit人自然抗性相關(guān)巨噬蛋白1(NRAMP-1)免疫試劑盒
異常漢遜酵母異常變種7號染色體開放閱讀框43抗體Human ARP3 ELISA Kit人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)免疫試劑盒
魯酵母Saccharomyces│rouxii 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRN-乙酰-β-D-基葡萄糖苷試劑盒柯諾辛
: Le-114,廣東微生物所46資源名稱: 香菇 質(zhì)量規(guī)格:BRN-基-D-天冬受體試劑盒奎寧
樹狀假絲酵母Candida│arborea 質(zhì)量規(guī)格:BRN鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白試劑盒苦馬豆
廣譜PI3K抑制劑(LY294002)葡聚糖T110
其他葡聚糖D110;右旋糖酐110
英文名稱:Dextran T110
其他英文名稱:Mucrose;Glucose polymer
產(chǎn)品規(guī)格:BR,分子量11萬
包裝:10克/100克
CAS號:9004-54-0
分子式:(C6H10O5) n
分子量:~110000
級別:BR
鑒別:呈正反應(yīng)
氯化物:≤0.1%
干燥失重:≤7.0%
重金屬:≤10ppm
性狀:粉末,不溶于乙,在中性溶液中很穩(wěn)定,遇強(qiáng)及升高溫度下被水解,在堿性溶液中端基能被氧化。易溶于水。無臭,無味。其溶液可在100-115℃熱壓30-45min。葡聚糖存在于某些微生物生長過程中分泌的粘液中。主要由D葡萄喃糖以α,1→鍵連接,支鏈點(diǎn)有1-→2,1→3,1→4連接。隨著微生物種類和生長條件的不同,其結(jié)構(gòu)也有差別
用途:生化研究。細(xì)胞研究,沉淀反應(yīng),從全血中分離白細(xì)胞。學(xué)研究。滲透性研究。惰性膠體已占容積和生物細(xì)胞壁體積的測定。
保存:RT,保質(zhì)期5年