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人乳腺癌成纖維細胞永生化

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    上海市

規(guī)格
1×1063500元15 瓶 可售
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更新時間:2024-04-08 14:49:05瀏覽次數(shù):260

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×106
貨號 A01X1229 主要用途 僅供科研實驗
組織來源 乳腺癌組織 種屬來源
人乳腺癌成纖維細胞永生化公司正在出售的產(chǎn)品:大鼠三叉神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞小鼠三叉神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞小鼠肝非實質(zhì)細胞大鼠滑膜間充質(zhì)干細胞小鼠腸系膜上動脈內(nèi)皮細胞大鼠牙胚細胞小鼠腸動脈平滑肌細胞

詳細介紹

一、細胞基本屬性

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品規(guī)格

商品貨號

人乳腺癌成纖維細胞永生化

1×106

A01X1229

細胞詳述

乳腺位于皮下淺筋膜的淺層與深層之間。淺筋膜伸向乳腺組織內(nèi)形成條索狀的小葉間隔,一端連于胸肌筋膜,另一端連于皮膚,將乳腺腺體固定在胸部的皮下組織之中。乳腺是哺乳動物少數(shù)可以重復(fù)經(jīng)歷生長、功能分化和退化過程的器官之一。纖維結(jié)締組織伸入乳腺組織之間,形成許多間隔,這些纖維結(jié)締組織對乳房起固定作用,而纖維結(jié)締組織是由成纖維細胞構(gòu)成的。

起支持作用和固定乳房位置的纖維結(jié)締組織稱為乳房懸韌帶或Coopers韌帶。淺筋膜深層位于乳腺的深面,與胸大肌筋膜淺層之間有疏松組織相連,稱乳房后間隙。它可使乳房既相對固定,又能在胸壁上有一定的移動性。

該細胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。

細胞特性

1) 細胞來源于手術(shù)切除的乳腺癌組織。

2) 細胞鑒定:波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色為陽性。

3) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

4) 細胞生長方式:成纖維樣細胞,貼壁培養(yǎng)。
5.jpg

二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

三、使用方法

客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化

1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;

3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);

4)待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。

3. 細胞收貨脫落

1)收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀;

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化;

3)經(jīng)1000rpm,離心5min,丟棄上清,用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi);

4)待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。

5)原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

10.jpg

四、注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通;由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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