詳細(xì)介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Ketoconazole | 1mL(10mM)|1g|5g | 1~3天 |
商品介紹:
Ketoconazole是咪唑類(lèi)抗真菌劑,是經(jīng)典的CYP3A4抑制劑,也是CYP24A1的抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):65277-42-1 別名:(±)-Ketoconazol 純度:99.67% 分子量:531.43 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
石蠟切片組織總RNA分離試劑盒Human PAEP(Glycodelin) ELISA Kit拉丁屬名: Emericellopsis terricola van Beyma小鼠上皮
石蠟切片組織組蛋白H3-K4甲基化熒光顯微鏡elisa試劑盒Human PROX1 ELISA Kit用途: 固氮人正常主氣管上皮
石蠟切片組織組蛋白H3-K9甲基化熒光顯微鏡elisa試劑盒Human PRPF19 ELISA Kit拉丁屬名: equi subsp.zooepidemicus小鼠紅白血病
石蠟切片組織組蛋白熒光顯微鏡elisa試劑盒Human PROSC ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus amyloliquefaciens人原胚腎轉(zhuǎn)化
石英96孔板Human PRPF3 ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis人永生化淋巴
食品三聚比色法定量elisa試劑盒Human ZNF335(Zinc finger protein 335) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomycopsis fibuligera人類(lèi)成纖維
食品三聚快速顯色定性elisa試劑盒(家用型/工業(yè)型)Human PRPF40A ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus usamii人胚胎膀胱組織來(lái)源
食品添加劑阿糖比色法定量elisa試劑盒Human PRKX ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus niger人胚胎氣管組織來(lái)源
食品添加劑瓜含量比色法定量elisa試劑盒Human PRMT1 ELISA Kit拉丁屬名: subtilis人胚腎二倍體
食品添加劑酪蛋白比色法定量elisa試劑盒Human PRPF40B ELISA Kit拉丁屬名: Pichia galeiformis胎兒骨髓間充質(zhì)(自建)
食物DNA高質(zhì)純化試劑盒Human PRPF6 ELISA Kit拉丁屬名: coli人皮膚成纖維
食物DNA高質(zhì)純化試劑盒Human PRMT5(Protein arginine N-methyltransferase 5) ELISA Kit拉丁屬名: Sporosarcina psychrophila人臍靜脈內(nèi)皮
食物D-葡萄糖內(nèi)脂比色法定量elisa試劑盒 Human PRMT8 ELISA Kit拉丁屬名: Agrobacterium rhizogenes(Riker et al.)Conn人男性正常
食物D-葡萄糖鹽比色法定量elisa試劑盒 Human PRMT3 ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用人腹膜微血管內(nèi)皮
食物阿斯巴塘(aspartame)含量薄層色譜法定性elisa試劑盒Human PRMT6 ELISA Kit拉丁屬名: Auricularia fuscosuccinea人類(lèi)皮膚纖維母
食物阿斯巴塘(aspartame)含量高效液相色譜法定量elisa試劑盒Human PRPF40A ELISA Kit拉丁屬名: Paenibacillus thailandensis人肺微血管內(nèi)皮
人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)免疫試劑盒磷化酪蛋白激受體B1+B2抗體小鼠抗性磷5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒有機(jī)玻璃圓形吸管架
人4-羥基壬烯(HNE)免疫試劑盒酪蛋白激受體B1+B2+B3+B4抗體小鼠葡萄糖依賴(lài)性胰島釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒玻璃圓形吸管架
人40S核糖體蛋白S19(RPS19)免疫試劑盒空通氣孔樣蛋白2抗體小鼠葡萄糖依賴(lài)性胰島釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒移液槍架
人Ⅲ型前膠原肽(PⅢP)免疫試劑盒同源盒蛋白轉(zhuǎn)錄因子EN2抗體小鼠糖原磷化同工II(GP-II)ELISA試劑盒凍存盒存放架
CYP3A4/CYP24A1抑制劑(Ketoconazole)乳糖發(fā)酵管
產(chǎn)品規(guī)格: BR
包裝:20支
用途:生化研究。
保存:RT