培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Caspase-8活性測(cè)定試劑盒 | Caspase-8 Activity colorimetric assay Kit | 20T|50T|100T | 1~3天 |
商品介紹:
本試劑盒適用于檢測(cè)哺乳動(dòng)物組織、細(xì)胞Caspase-8活性。Caspase-8也稱FLICE、MACH 或Mch5,通常以酶原的形式存在,凋亡時(shí)被激活,被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡轉(zhuǎn)導(dǎo)過程的上游caspase。在Fas-receptor和TNFR-1介導(dǎo)的凋亡過程中Caspase-8被激活形成二聚體,進(jìn)而激活下游Caspase-4,6,9,10。測(cè)定原理基于Caspase-8特異水解多肽底物IETD-pNA(Ile-Glu-Thr-Asp-p-nitroanilide),釋放的游離硝基pNA在405nm有大吸光度。采用可見光光度比色法測(cè)定pNA而得到Caspase活性。 |
儲(chǔ)存條件:按標(biāo)簽標(biāo)示分別保存試劑,有效期1年
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
富馬酮替芬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ropinirole HCl腫瘤/抗原13抗體包裝100g
富馬酮替芬雜質(zhì)I(10-氧基-4-(1-基-4-...英文名稱: Ropivacaine hydrochloride 鈣反應(yīng)因子抗體包裝25g
富馬伊布利特(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ropivacaine hydrochloride 分裂周期蛋白2亞型1抗體包裝100g
富馬異吡侖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rosuvastatin Calcium20號(hào)染色體開放閱讀框74抗體包裝25g
甘膽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rosuvastatin Calcium促腎上腺皮質(zhì)釋放激受體2抗體包裝100g
甘雙唑鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sitagliptin phosphate monohydrate20號(hào)染色體開放閱讀框132抗體包裝25g
甘草二(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sitagliptin phosphate monohydrateIV型膠原蛋白/4型膠原蛋白/膠原蛋白4抗體包裝500g
甘精胰島(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Spectinomycin Hydrochloride 煙堿型乙酰膽堿受體B2抗體包裝1g
甘露(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Spectinomycin Hydrochloride 20號(hào)染色體開放閱讀框70抗體包裝100g
甘羅溴銨(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tamsulosin hydrochloride 親環(huán)蛋白(親環(huán))PPIB抗體包裝1g
(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: ithromycin 8號(hào)染色體開放閱讀框34抗體包裝25g
高藜蘆(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: misartanM鈣粘附分子抗體包裝5g
格列本脲(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: misartan凋亡誘導(dǎo)蛋白NALP3抗體包裝100g
格列吡 (標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Isoniazid周期B2抗體包裝25g
格列喹酮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Isoniazid鈣腔蛋白包裝5g
: LMG2715=ATCC8199=DSM30176資源名稱: Pantoeastewartiisubsp.stewartii 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6試劑盒烏藥內(nèi)酯;Linderane
產(chǎn)氣莢膜梭菌 毒A型Clostridium│perfringens Type A 質(zhì)量規(guī)格:potency>900ug/mg,BR鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4試劑盒維生K3;Menadione
: ATCC27853、AS1.2387資源名稱: 銅綠假單胞菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR鋅指蛋白R(shí)IZ試劑盒維生B12;Vitamin B12
Caspase-8活性測(cè)定試劑盒鹽克林霉
其他克林霉鹽鹽;鹽林大霉
英文名稱:Clindamycin Hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格:USP級(jí),83%,800u/mg
包裝:5克/25克/100克
CAS號(hào):21462-39-5
C18H33ClN2O5S•HCl=461.50
級(jí)別:USP Grade
含量:≥83.0%
效價(jià):≥800ug/mg
PH:3.0~5.5
PH:9.0~10.5
水分:≤1.0%
重金屬:≤20ppm
性狀:粉末,有引濕性,極易溶于水,溶解時(shí)放熱
用途:生化研究。對(duì)綠濃桿菌、變形桿菌、大腸桿菌、沙雷氏菌和葡萄球菌等有抑制和殺滅作用。
保存:2~8℃,避光