商品介紹:
本產(chǎn)品是葡聚糖Ficoll 400與泛影酸葡甲胺按照一定比例混合的無菌水溶液,適用于從人外周血液中分離淋巴細(xì)胞。根據(jù)細(xì)胞密度的差異,采用密度梯度沉降法,借助細(xì)胞分離液和離心技術(shù),就可以進(jìn)行淋巴細(xì)胞分離純化。 |
保存溫度:18-25℃避光
應(yīng)用:
外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)的分離
產(chǎn)品特性:
GMP級(jí)環(huán)境
無細(xì)胞毒性,細(xì)胞得率高
活力更好
批次差異極小
產(chǎn)品屬于:
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
美他環(huán),烯土霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Amlodipine角蛋白13抗體包裝25g
美托拉宗(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Amlodipine白免疫球蛋白樣受體-B抗體包裝500g
美雄諾龍(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: NizatidineCD33L抗體包裝100g
門冬胰島(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Carboxymethyl cellulose 角蛋白10抗體包裝25g
蒙脫石(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fludarabine軸突生長(zhǎng)因子CD108抗體包裝5g
孟魯司特鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fludarabine唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集5抗體包裝1g
咪喹莫特(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: G-418 disulfate,GeneticinCD329抗體包裝1g
咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Erlotinib嗜粒趨化蛋白14抗體包裝1g
咪唑煙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: N-Acetyl-cysteine1號(hào)染色體開放閱讀框57抗體包裝250mg
米格列(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Zopiclone2號(hào)染色體開放閱讀框18抗體包裝100ml
米格列奈鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Zopiclone色c氧化6抗體包裝100g
米力農(nóng)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Aniracetam嗜粒趨化蛋白24抗體包裝25g
米諾地爾(硫鹽)敏樂啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Aniracetam巨噬炎性蛋白15包裝100ml
米屈肼(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Glutamine巨噬炎性蛋白抗體包裝500ml
米替福新(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: RoflumilastCD72蛋白抗體包裝1g
擬青霉屬Paecilomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>720IU/MG,BR膜DNA抗體試劑盒1-脫氧野尻霉;1-Deoxynoji
醋化醋桿菌Acetobacter│aceti 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定角蛋白21-1片段試劑盒他克莫司;Tacrolimus
肺炎克雷伯氏菌Klebsiella│pneumoniae 質(zhì)量規(guī)格:EP/USP角蛋白18-M65試劑盒10-脫乙?;涂ǘII;10-Dea
PBMC樣本密度分離液亞精胺
其他 精脒;N-(3-基基)-1,4-丁二胺;α-(γ-基)-δ-基丁烷;1,8-二基-4-氮辛烷;N-(3-基基)-1,4-丁二胺;精咪;精三胺
英文名稱: Spermidine
其他英文名稱: N-(3-Aminopropyl)-1,4-butanediamine;1,8-Diamino-4-azaoctane
產(chǎn)品規(guī)格: BR,99%
包裝:1克/5克
CAS號(hào):124-20-9
C7H19N3=145.25
級(jí)別:Biothnology grade
含量:≥99.0% (GC)
Spermine:<0.2%
熔點(diǎn):22~25℃
折光率:1.479
密度:0.925 g/ml at 25℃
性狀:或無色透明液體。溶于水、和醚
用途:生化研究。抑制神經(jīng)元NO合成(nNOS)。結(jié)合并沉淀DNA,也用于純化DNA結(jié)合蛋白。刺激T4 聚核苷激活性
保存:2~8℃