操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱:Wnt抑制劑(IWR-1)
英文名稱:IWR-1 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg IWR-1是一種Wnt抑制劑,在L Wnt-3A細(xì)胞中,IC50值為180nM,通過穩(wěn)定Axin破壞復(fù)合體來提高β-連環(huán)素的磷酸化。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1127442-82-3 別名:endo-IWR 1;IWR-1-endo 純度:99.83% 分子量:409.44 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
薄層菌屬γ基丁γ2受體/GABAA Rγ2抗體Human TFE3 ELISA Kit大鼠可溶性糖蛋白VI(sGPVI)免疫試劑盒
白僵菌磷化糖原合激3β抗體Human TFEC ELISA Kit大鼠可溶性髓系觸發(fā)受體-2(sTREM-2)免疫試劑盒
旋絲毛殼磷化G蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白1抗體Human TFEB ELISA Kit大鼠可溶性髓系觸發(fā)受體-1(sTREM-1)免疫試劑盒
黃白生叢赤殼磷化珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1抗體Human TGDS ELISA Kit大鼠可溶性瘦受體(sLR)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌磷化珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1抗體Human TFIP11 ELISA Kit大鼠可溶性凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)免疫試劑盒
尼泊爾正青霉G蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白1抗體Human TFPT ELISA Kit大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)免疫試劑盒
嘴突凸臍蠕孢磷化GATA結(jié)合蛋白6抗體Human HDAC7(Histone deacetylase 7) ELISA Kit大鼠可溶性白介-2 受體(sIL-2R)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌磷化γ基丁γ2受體/GABAA Rγ2抗體Human TGFBR3(Transforming growth factor beta receptor 3) ELISA Kit大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)免疫試劑盒
塔賓曲霉胰高血糖受體抗體Human TEX38 ELISA Kit大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)免疫試劑盒
天格爾黃桿菌生長分化因子3抗體Human TFAM(TFAM) ELISA Kit大鼠可溶性E選擇(sE-selectin)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌磷化糖原合激3β抗體Human TFE3 ELISA Kit大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)免疫試劑盒
向煙氏鹽微菌G蛋白偶聯(lián)受體1抗體Human TEX12 ELISA Kit大鼠可溶性CD80(sCD80)免疫試劑盒
磚紅鏈霉菌G蛋白β1抗體/鳥嘌呤核苷結(jié)合蛋白β亞基1Human TEX11 ELISA Kit大鼠可溶性CD40配體(sCD40L)免疫試劑盒
纖維鏈霉菌G蛋白β3抗體/鳥嘌呤核苷結(jié)合蛋白β亞基3Human TEX14 ELISA Kit大鼠可溶性CD30配體(sCD30L)免疫試劑盒
太平洋萊茵海默氏菌鳥苷還原2抗體Human TEX13A ELISA Kit大鼠可溶性CD23(sCD23)免疫試劑盒
貝葉多孔菌G蛋白偶聯(lián)受體γ12抗體Human TEX15 ELISA Kit大鼠可溶性CD14(sCD14)免疫試劑盒
多主枝孢霉Cladosporium│herbarum 質(zhì)量規(guī)格:離子對(duì)試劑甘草查爾
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格:0.05M綿馬貫眾ABBA
: =ATCC17802資源名稱: 副溶血弧菌 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97.0%(HPLC)二氫姜黃
Wnt抑制劑(IWR-1)磷氫二鈉七水物
其他 七水合磷二鈉;七水合二鹽基磷鈉;七水合磷氫二鈉
英文名稱: Sodium phosphate dibasic heptahydrate
其他英文名稱: Disodium hydrogen phosphate heptahydrate;Disodium phosphate
產(chǎn)品規(guī)格: AR,98%
包裝:100克/500克
CAS號(hào):7782-85-6
Na2HPO4•7H2O=268.07
級(jí)別:AR
含量:98~102%
pH(5% water):8.7~9.3
鐵:≤0.002%
水不溶物:≤0.01%
重金屬:≤0.001%
干燥失重:≤0.2%
性狀:結(jié)晶粉末。溶于水,不溶于乙。
用途:生化研究。分析用作緩沖劑,制備鉤端螺旋體培養(yǎng)基,測定鉀
保存:RT,避光。保質(zhì)期5年