培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
英文名稱:CX-5461 產(chǎn)品規(guī)格:5mg|10mg|50mg CX-5461是一種rRNA synthesis抑制劑,在HCT-116,A375和MIA PaCa-2細(xì)胞中,抑制Pol驅(qū)動(dòng)的rRNA轉(zhuǎn)錄,IC50值為142nM,對(duì)Pol II沒有作用。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1138549-36-6 純度:98.47% 分子量:513.61 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
布氏假單胞菌法尼基二磷合1抗體Human TCF7L1 ELISA Kit大鼠抗單核抗體(AMA)免疫試劑盒
異常威克漢姆酵母鳥嘌呤核苷結(jié)合蛋白1抗體Human TCF7 ELISA Kit大鼠抗促甲狀腺受體抗體(TRAb)免疫試劑盒
青霉膠質(zhì)纖維性蛋白GFAPδ抗體Human CD52(CAMPATH-1 antigen) ELISA Kit大鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)免疫試劑盒
西洋參銹腐病菌β半乳糖苷抗體Human TCERG1 ELISA Kit大鼠抗IVIgG抗體免疫試劑盒
伯頓生絲畢赤酵母巨軸索蛋白GAN抗體Human TCHP ELISA Kit大鼠抗IgE受體抗體免疫試劑盒
煙色曲霉G蛋白偶聯(lián)受體結(jié)合蛋白O亞基A2抗體Human TCF12/HEB ELISA Kit大鼠巨噬移動(dòng)抑制因子(MIF)免疫試劑盒
日本曲霉高爾基體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1A抗體Human NPR2(Atrial natriuretic peptide receptor 2) ELISA Kit大鼠巨噬炎癥蛋白5(MIP-5)免疫試劑盒
乳乳球菌乳亞種自主生長因子1B抗體Human TBX15 ELISA Kit大鼠巨噬炎癥蛋白1β(MIP-1β/CCL4)免疫試劑盒
釀酒酵母GLCNE蛋白抗體Human TBX18 ELISA Kit大鼠巨噬炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫試劑盒
費(fèi)氏檸檬桿菌半乳糖凝集9抗體Human TBX21/T-bet ELISA Kit大鼠巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)免疫試劑盒
豌豆根瘤菌富含亮蛋白LRP130抗體Human TBX22 ELISA Kit大鼠巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)免疫試劑盒
檸檬明串珠菌蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑GBF1抗體Human CD52(CAMPATH-1 antigen) ELISA Kit大鼠巨噬炎性蛋白2(MIP-2)免疫試劑盒
貝形側(cè)耳高爾基體膜蛋白GP73抗體Human TBX5 ELISA Kit大鼠巨噬替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)免疫試劑盒
釀酒酵母葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體Human TCF12/HEB ELISA Kit大鼠巨噬來源的趨化因子(MDC/CCL22)免疫試劑盒
泡盛曲霉G蛋白結(jié)合蛋白2抗體Human TCEB1 ELISA Kit大鼠巨噬集落激因子(M-CSF)免疫試劑盒
黑曲霉G蛋白結(jié)合蛋白2抗體Human TCEB3 ELISA Kit大鼠精脲水解(AGMAT)免疫試劑盒
生二鏈霉菌Streptomyces│ambofaciens 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品知母皂苷E
傳染性喉氣管炎病毒Alphaherpesvirinae│Infectious laryngotracheitis virus 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品知母皂苷B
型副傷寒沙門菌Salmonella│paratyphi A 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品白綿馬AP
rRNA合成抑制劑(CX-5461)磷氫二鉀
其他 二鹽基磷鉀;雙鹽基磷鉀;磷二鉀
英文名稱: DKP
其他英文名稱: Potassium phosphate dibasic trihydrate;Potassium monophosphate trihydrate;Dipotassium orthophosphate;Dipotassium monophosphate;Dipotassium phosphate;Dikalium phosphate
產(chǎn)品規(guī)格: AR,99%
包裝:500克
CAS號(hào):16788-57-1
K2HPO4.3H2O=228.22
級(jí)別:AR
含量:≥99.0%
pH(50g/L,25℃):8.9~9.4
硝鹽:≤0.001%
氯化物:≤0.002%
硫鹽:≤0.01%
澄清度試驗(yàn):合格
水不溶物:≤0.01%
鈉:≤0.05%
鐵:≤0.001%
砷:≤0.0001%
鎂:≤0.001%
性狀:顆?;蚍勰?。略有吸濕性。灼燒后成焦磷鹽。易溶于水,100g能很快地溶于67ml冷水。微溶于乙,其水溶液對(duì)酚酞呈微堿性。
用途:生化研究。配制緩沖液??箖鲆褐凶骶彌_劑。培養(yǎng)基配制
保存:RT