培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
英文名稱:Dabrafenib 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg Dabrafenib是一種ATP競爭性的BRAF抑制劑,能夠抑制CRAF和BRAFV600E的活性,IC50值分別為5nM和0.6nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1195765-45-7 別名:GSK2118436A;GSK2118436 純度:98.96% 分子量:519.56 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
格氏乳球菌凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體Human ASGR2(Asialoglycoprotein Receptor 2) ELISA Kit人蘭尼堿受體2(RYR2)免疫試劑盒
脫皮毛球馬勃*膽固氧化抗體Human ASK-1(Apoptosis Signal Regulating Kinase 1) ELISA Kit人蘭尼堿抗體免疫試劑盒
金灰青霉半胱蛋白蛋白14抗體Human AP17(Apelin 17) ELISA Kit人賴酰氧化免疫試劑盒
香菇半胱蛋白蛋白5抗體Human AP13(Apelin 13) ELISA Kit人賴特異性脫甲基5A(JARID1A)免疫試劑盒
黑曲霉豬瘟病抗體Human AP(Allopregnanolone) ELISA Kit人醌NADH脫氫1(NQO1)免疫試劑盒
蒼白桿菌屬豬瘟病抗體Human ANG II R1-Ab(Angiotensin II Receptor 1 Antibody) ELISA Kit人跨膜結(jié)構(gòu)域4亞家族成員11(MS4A11)免疫試劑盒
灰黃鏈霉菌嗜鉻粒蛋白C抗體Human ANG II(Angiotensin II) ELISA Kit人空泡相關(guān)蛋白A(VacA)免疫試劑盒
巴氏醋桿菌煙堿型乙酰膽堿受體α10/AChRα10抗體Human ANGPTL1(Angiopoietin Like Protein 1) ELISA Kit人空腸彎曲菌(CJ)抗體(IgM)免疫試劑盒
大腸埃希菌煙堿型乙酰膽堿受體α6/AChRα6抗體Human ANGPTL6(Angiopoietin Like Protein 6) ELISA Kit人空腸彎曲菌(CJ)抗體(IgG)免疫試劑盒
釀酒酵母煙堿型乙酰膽堿受體α9/AChRα9抗體Human Ang III(Angiotensin III) ELISA Kit人克雷白氏桿菌(klebsiella)免疫試劑盒
木拉克酵母屬煙堿型乙酰膽堿受體δ/AChRδ抗體Human Anti-Surv(Anti-Survivin Antibody) ELISA Kit人克拉拉蛋白(CC16)免疫試劑盒
植物乳桿菌凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體Human ANKRD1(Ankyrin Repeat Domain 1) ELISA Kit人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(sTfR)免疫試劑盒
耐熱鹽土生古菌凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體Human AP(Allopregnanolone) ELISA Kit人可溶性腫瘤壞死因子受體2(sTNF-R2)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌枯草亞種β衣被蛋白抗體Human AP17(Apelin 17) ELISA Kit人可溶性血小板內(nèi)皮粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)免疫試劑盒
紋黑蛋巢半胱蛋白4/11抗體Human ATF-1(Activating Transcription Factor 1) ELISA Kit人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)免疫試劑盒
樟疫霉1號染色體開放閱讀框187抗體Human AP13(Apelin 13) ELISA Kit人可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)免疫試劑盒
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:D,99.8%Ⅲ型前膠原肽試劑盒半枝蓮堿
南方鹽單胞菌Halomonas│meridiana 質(zhì)量規(guī)格:for HPLC,≥99.0%Ⅲ型前膠原基末端肽試劑盒白芷屬腦
死谷芽孢桿菌Bacillus│vallismortis 質(zhì)量規(guī)格:for HPLC, ≥99.7%Ⅲ型前膠原基端肽試劑盒Α-波菜甾
BRAF抑制劑(Dabrafenib)檸檬鎂
其他 枸櫞鎂;2-羥基-1,2,3-三羧鎂鹽
英文名稱: Magnesium citrate tetradecahydrate
其他英文名稱: 2-Hydroxy-1,2,3-propanetricarboxylic acid magnesium salt (2∶3);Citramag
產(chǎn)品規(guī)格: CP,98%
包裝:500克
CAS號:3344-18-1
C12H10Mg3O14•14H2O=703.33
級別:CP
含量:98.0~102.0%
氯化物:≤0.005%
硫鹽:≤0.01%
鹽不溶物:≤0.05%
重金屬:≤0.003%
鐵:≤0.003%
性狀:結(jié)晶性粉末或顆粒。無氣味。溶于稀,微溶于水。檸檬和其鉀鹽或鈉鹽可增加其溶解度。
用途:生化研究。食品添加劑。分析試劑。制藥工業(yè)
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