培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
CDK4和CDK6抑制劑 | Palbociclib isethionate | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg | 1~3天 |
商品介紹:
英文名稱:Palbociclib isethionate 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg Palbociclib isethionate是高度選擇性的CDK4/6抑制劑,IC50值分別為11nM/16nM;對CDK1/2/5,EGF,F(xiàn)GFR,PDGFR,InsR等沒有作用。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:827022-33-3 別名:PD 0332991 isethionate 純度:99.99% 分子量:573.66 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
白淺灰鏈霉菌分裂周期蛋白16抗體Human UCP1(Mitochondrial brown fat uncoupling protein 1) ELISA Kit人肌酐(Cr)免疫試劑盒
花園芽孢桿菌有絲分裂著絲粒蛋白F抗體Human COQ10B(Coenzyme Q-binding protein COQ10 homolog B, mitochondrial) ELISA Kit人饑餓激(GHRL)免疫試劑盒
蘇云金芽胞桿菌松蠋亞種9號染色體開放閱讀框115抗體Human QPCTL(Glutaminyl-peptide cyclotransferase-like protein) ELISA Kit人活性氧(ROS)免疫試劑盒
產(chǎn)黃青霉CTDSPL蛋白抗體Human UNC13C(Protein unc-13 homolog C) ELISA Kit人活化受體樣激1(ALK1)免疫試劑盒
草木樨中華根瘤菌CTDSPL2蛋白抗體Human CFB(Complement factor B) ELISA Kit人活化A(ACV-A)免疫試劑盒
黑曲霉乙酰膽堿酯相關(guān)蛋白抗體Human ZBED3(Zinc finger BED domain-containing protein 3) ELISA Kit人活化凝血因子X(FXa)免疫試劑盒
淡紫擬青霉卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白83抗體Human NR1H3(Oxysterols receptor LXR-alpha) ELISA Kit人活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)免疫試劑盒
大腸埃希菌二氫嘧啶相關(guān)蛋白5抗體Human ZBED3(Zinc finger BED domain-containing protein 3) ELISA Kit人活化蛋白C(APC)免疫試劑盒
細(xì)鏈格孢磷化二氫嘧啶樣2抗體Human APOD(Apolipoprotein D) ELISA Kit人混合系列蛋白激樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)免疫試劑盒
虎皮粘蓋牛肝菌腦衰蛋白反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白4抗體Human CXCR4(C-X-C chemokine receptor type 4) ELISA Kit人混合淋巴反應(yīng)封閉因子(MLR-Bf)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白87抗體Human AMY2(Amylase Alpha 2, Pancreatic) ELISA Kit人蛔蟲抗體(IgM)免疫試劑盒
松針散斑殼卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白92抗體Human DNMT1(DNA(cytosine-5)-methyltransferase 1) ELISA Kit人黃體生成(LH)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD8抗體Human GREM1(Gremlin-1) ELISA Kit人氧化(XOD)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌大腦亮拉鏈結(jié)構(gòu)域蛋白抗體Human TERT(omerase reverse transcriptase) ELISA Kit人環(huán)磷腺苷(cAMP)免疫試劑盒
嚙蝕艾肯氏菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白93抗體Human IL17B(Interleukin-17B) ELISA Kit人環(huán)磷鳥苷(cGMP)免疫試劑盒
星孢鏈霉菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白96抗體Human TLN1(Talin-1) ELISA Kit人環(huán)加氧2(COX-2)免疫試劑盒
型副傷寒沙門菌Salmonella│paratyphi A 質(zhì)量規(guī)格:指示劑級紫萁
假交替單胞菌Pseudoalteromonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.96%漿苦味L
: HBUM73202資源名稱: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:IND相思子堿
CDK4和CDK6抑制劑萘啶
其他萘啶; 1-乙基-7-甲基-4--1,8-萘啶-3-羧;7-甲基-1-乙基-4-氧代-1,4-二氫-1,8-萘啶-3-羧
英文名稱:Nalidixic acid
其他英文名稱:1,4-Dihydro-1-ethyl-7-methyl-4-oxo-1,8-naphthyridine-3-carboxylic acid
產(chǎn)品規(guī)格:高純,98%
包裝:5克/25克
CAS號:389-08-2
C12H12N2O3=232.24
級別:High Purity Grade
含量:≥98.0%
熔點(diǎn):225~231℃
重金屬:≤10ppm
水分::≤0.5%
硫灰分:≤0.1%
性狀:粉末。無臭、味微苦,可溶于水和乙
用途:生化研究。
保存:RT