操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱:DNA修復(fù)抑制劑(Actinomycin D)
英文名稱:Actinomycin D 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg Actinomycin D抑制DNA修復(fù),IC50為0.42μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):50-76-0 別名:Dactinomycin;Actinomycin IV 純度:99.89% 分子量:1255.42 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
解淀粉芽孢桿菌碳酐相關(guān)蛋白/腦蛋白10抗體Human EPS8(Epidermal growth factor receptor kinase substRate 8) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A2/B1(hnRNP A2/B1)免疫試劑盒
冠突曲霉白介-18受體α鏈抗體Human OxHDL(Oxidized high-density lipoprotein) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A1(hnRNP A1)免疫試劑盒
廈門交替紅色桿菌轉(zhuǎn)錄阻抑蛋白CTCF抗體Human TUBA1B(Tubulin alpha-1B chain) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A0(hnRNP A0)免疫試劑盒
喜濕小脆柄菇T淋巴CD1抗體Human IFNA21(IFN alpha 21) ELISA Kit人異質(zhì)核糖核蛋白Q(SYNCRIP/HNRPQ/NSAP1)免疫試劑盒
粘紅酵母磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激2抗體Human ProCollagen II ELISA Kit人異鎖鏈(IDES)免疫試劑盒
根瘤菌網(wǎng)格蛋白重鏈抗體Human ALD(Aldosterone) ELISA Kit人異檸檬脫氫(ICD)免疫試劑盒
美澳型核果褐腐病菌透明質(zhì)介導(dǎo)游走受體抗體Human Aldolase B ELISA Kit人異常凝血原(APT)免疫試劑盒
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魯氏毛霉2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框60抗體Human ProCollagen II ELISA Kit人乙型肝炎病前S2抗原(HBV preS2Ag)免疫試劑盒
空泡單胞菌磷化周期依賴性激7抗體Human ALD(Aldosterone) ELISA Kit人乙型肝炎病前S2抗體(HBV preS2Ab)免疫試劑盒
狹窄革菌磷化周期依賴性激9抗體Human AO-IgG(Ovary-Immunoglobulin G) ELISA Kit人乙型肝炎病核心抗體IgM(HBcAb-IgM)免疫試劑盒
梨生殼囊孢磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激1抗體Human CYP7B1(Cytochrome P450 7B1) ELISA Kit人乙型肝炎病核心抗體IgG(HBcAb-IgG)免疫試劑盒
米曲霉磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激1抗體Human Aldolase B ELISA Kit人乙型肝炎病核心抗體(HBcAb)免疫試劑盒
潘諾尼亞鎖霉磷化抑癌基因p16抗體Human ZP-IgG(zona pellucida-Immunoglobulin G) ELISA Kit人乙型肝炎病表面抗體(HBsAb)免疫試劑盒
停乳鏈球菌磷化抑癌基因p16抗體Human EB-VCA-IgG(Epstein-barr virus capsid antigen-Immunoglobulin G) ELISA Kit人乙型肝炎病X抗原(HBxAg)免疫試劑盒
黑曲霉磷化抑癌基因p16抗體Human A16-IgG(Coxsackie virus A16-Immunoglobulin G) ELISA Kit人乙型肝炎病X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)免疫試劑盒
金針菇Flammulina│velutipes 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRHSP60 IgG抗體elisa試劑盒金松雙黃
: =ATCC9790資源名稱: 海氏腸球菌 質(zhì)量規(guī)格:>60%,BSHSP60 IgA抗體elisa試劑盒角鯊烯
鹽單胞菌Halomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>70%,BSH-ras elisa試劑盒氧醉椒
DNA修復(fù)抑制劑(Actinomycin D)嘌呤
其他尿(雜)環(huán);四氮雜茚;7H-咪唑(4,5-d)嘧啶;咪唑并嘧啶;嘌呤堿
英文名稱:Purine
其他英文名稱:7H-Imidazo(4,5-d)pyrimidine;9H-Purine
產(chǎn)品規(guī)格:特純,98.5%
包 裝: 100毫克/1克
CAS號(hào):120-73-0
C5H4N4=120.11
級(jí)別:Puriss
含量:≥98.5%(HPLC)
熔點(diǎn):214~217 °C
性狀:粉末。由一個(gè)嘧啶環(huán)同一個(gè)咪唑環(huán)稠合而成的稠雜環(huán)化合物,易溶于水、和,微溶于醚。遇易形成一堿鹽,水溶液對(duì)石蕊呈中性。弱堿性,在抽真空時(shí)會(huì)升華。嘌呤對(duì)于熱堿和稀都是穩(wěn)定的。會(huì)被冷的高錳鉀溶液和熱的發(fā)煙硝氧化
性狀:正方形結(jié)晶或無(wú)定型粉末。易溶于氫氧化銨、氫氧化堿和稀溶液,微溶于乙,不溶于水,360℃以上分解且部分升華。吸收度250nm/260nm:1.32~1.42;吸收度280nm/260nm:0.80~0.88;吸收度290nm/260nm:0.45~0.53
用途:生化研究。硫鳥嘌呤、開(kāi)環(huán)鳥嘌呤的中間體
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