操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱:丙酮酸激酶M2激活劑(TEPP-46)
英文名稱:pyruvate kinase M2 activator 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg TEPP-46是一種有效的,選擇性的酸激酶M2(pyruvate kinase M2)的激活劑,半數(shù)激活濃度AC50值為92nM,對其他PKM1,PKL和PKR作用較小或沒有作用。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1221186-53-3 別名:ML-265 純度:99.35% 分子量:372.46 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
亞美尼亞固氮菌降鈣基因相關(guān)肽1型受體抗體Human SCAMP1(Secretory carrier-associated membrane protein 1) ELISA Kit人柯薩奇病IgA(Cox V-IgA)免疫試劑盒
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土壤桿菌屬淋巴趨化因子CCL21抗體Human LPAR1(Lysophosphatidic acid receptor 1) ELISA Kit人柯薩奇病A16(CVA16)免疫試劑盒
加拿大帚霉表面趨化因子受體2A抗體Human OVOS1(Ovostatin homolog 1) ELISA Kit人柯薩奇病(Cox V)抗體(IgM)免疫試劑盒
球毛殼菌表面趨化因子受體2B抗體Human MTX1(Metaxin-1) ELISA Kit人柯薩奇病(Cox V)抗體(IgG)免疫試劑盒
茶樹菇表面趨化因子受體2抗體Human LMAN1(Protein ERGIC-53) ELISA Kit人抗組織轉(zhuǎn)谷酰(tTG)抗體(IgG)免疫試劑盒
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黃綠木霉CSMD1抗體Human IL17D(Interleukin-17D) ELISA Kit人抗滋養(yǎng)膜抗體(ATA)免疫試劑盒
德氏乳桿菌保加利亞亞種煙堿型乙酰膽堿受體α4抗體Human PKD1(Polycystin-1) ELISA Kit人抗著絲點(diǎn)抗體(ACA)免疫試劑盒
喜溫愛達(dá)荷犁頭霉表面趨化因子受體9抗體Human AXIN2(Axin-2) ELISA Kit人抗轉(zhuǎn)谷??贵w(IgG)免疫試劑盒
異常威克漢姆酵母表面趨化因子受體5抗體Human PPP1CA(Serine/threonine-protein phosphatase PP1-alpha catalytic subunit) ELISA Kit人抗轉(zhuǎn)谷??贵w(IgA)免疫試劑盒
鐮刀菌Fusarium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對試劑3-硝基酪試劑盒9-基喜樹堿
球毛殼Chaetomium│globosum 質(zhì)量規(guī)格:離子對色譜用試劑3-羥基-3-基戊二酰合1試劑盒阿馬堿
蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格:離子對色譜用試劑3-葡萄糖苷孕二試劑盒阿奇霉
丙酮酸激酶M2激活劑(TEPP-46)檸檬鈣
其他枸櫞鈣;2-羥基-1,2,3-三羧鈣鹽
英文名稱:Calcium citrate tetrahydrate
其他英文名稱:Tricalcium dicitrate tetrahydrate;2-Hydroxy-1,2,3-propanetricarboxylic acid calcium salt
產(chǎn)品規(guī)格:AR,98%
包裝:250克
CAS號:5785-44-4
C12H10Ca3O14•4H2O=570.50
級別:AR
含量:≥98.0%
硫鹽:≤0.01%
度(以H+計(jì)):≤7.8 mmol/100g
氯化物:≤0.008%
硫鹽:≤0.05%
氯化物:≤0.005%
稀鹽溶解試驗(yàn):合格
性狀:紫醬色透明鱗片狀或淺棕色粉末。緩慢溶于冷水,速溶于熱水,但溶解度降低,水溶液呈性;溶于稀及水,不溶于乙
用途:生化研究。單倍體育種中配制改良尼許培養(yǎng)基等。
保存:RT