中文名稱:Caspase-4活性測定試劑盒
英文名稱:Caspase-4 Activity colorimetric assay Kit
產(chǎn)品規(guī)格:20T|50T|100T
發(fā)貨周期:1~3天
本試劑盒適用于測定哺乳動物組織、細胞caspase-4活性。測定原理基于Caspase-4特異水解其多肽底物Ac-LEVD-pNA,釋放出游離的硝基pNA,后者呈黃色在405nm具有大吸收峰,用可見光分光光度比色方法測定。其吸光度值對應(yīng)于Caspase-4的水解活性。 |
細胞凋亡屬于程序化細胞死亡,可見于各種器官和細胞,在正常發(fā)育、生理、病理過程中對細胞和器官的穩(wěn)態(tài)具有十分重要的調(diào)節(jié)作用。Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是參與細胞凋亡過程的蛋白酶家族,包含10多個成員。Caspase-4可以和Apaf-1相互作用,并參與細胞色素導(dǎo)致的Caspase-3激活,也可以和caspase-14相互作用。
所需儀器:酶標(biāo)儀與96孔酶標(biāo)板;或可見光分光光度計配100μl容積的石英比色杯。
工作波長:大吸收波長405nm,如不具備也可在400~450nm范圍內(nèi)測定。
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
琥珀舒馬曲普坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: (S)-Carbidopa腦衰蛋白反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白4抗體包裝25g
琥乙紅霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Chlormadinone Acetate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白87抗體包裝5g
花生四烯(AA)英文名稱: Chlormadinone Acetate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白92抗體包裝25g
華蟾它靈;華蟾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ciprofloxacin HCL卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD8抗體包裝5g
華法林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ciprofloxacin HCL大腦亮拉鏈結(jié)構(gòu)域蛋白抗體包裝100g
華法林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cisatracurium besilate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白93抗體包裝25g
環(huán)吡司; 環(huán)吡酮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cortisone 21-acetate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白96抗體包裝5g
環(huán)吡酮;環(huán)匹羅司(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cortisone 21-acetate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD5抗體包裝1g
環(huán)扁桃酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dantrolene sodium 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD6抗體包裝5g
環(huán);滅蠅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dantrolene sodium 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD6抗體包裝1g
環(huán)沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-Calcium Panthotenate(Vitamin B5)周期通道和神經(jīng)分化蛋白1抗體包裝5g
環(huán)磷腺苷,環(huán)腺苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Desloratadine凝集蛋白家族10抗體(肝)包裝1g
環(huán)戊噻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Desloratadine銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體包裝5g
磺吡啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dexamethasone Sodium PhosphateCOMM結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體包裝1g
磺醋酰鈉 SA-NA(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dexamethasone Sodium PhosphateCordon bleu蛋白樣1抗體包裝100ml
微紅帚霉Scopulariopsis│rufulus 質(zhì)量規(guī)格:>99%,EP6心肌肌球蛋白重鏈試劑盒吳茱萸次堿;Rutaecarpine
空腸彎曲桿菌Campylobacter│jejuni 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品心肌肌凝蛋白輕鏈1試劑盒吳茱萸堿;Evodiamine
新型隱球酵母Cryptococcus│neoformans 質(zhì)量規(guī)格:>95%心肌肌鈣蛋白T試劑盒吳茱萸新堿;Evocarpine
Caspase-4活性測定試劑盒鹽黃連水合物
其他 鹽小檗堿水合物;小檗堿鹽鹽水合物
英文名稱: Berberine chloride hydrate
其他英文名稱: Natural Yellow 18
產(chǎn)品規(guī)格: BR,97%
包 裝: 5克/25克/100克
產(chǎn)品規(guī)格: 分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%
包 裝: 20毫克
CAS號:141433-60-5
C20H18C1NO4•xH2O=371.81 (anhydrous basis)
級別:BR
含量:≥97.0%(HPLC)
熔點:204~206℃
級別:分析標(biāo)準(zhǔn)品
含量:≥98.0%(HPLC)
性狀:黃色至橙色粉末。一種生物堿。
用途:生化研究。用于在肥大細胞中肝鈉的熒光染色。一種生物堿,帶有弱的特性,多重耐藥外排泵(MDR efflux pumps)的底物。 berberine的抗微生物活性可被MDR抑制劑5-methoxyhydnocarpin (5-MHC)強化。Berberine調(diào)控肝癌細胞Pgp基因的表達
保存:RT
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)