詳細介紹
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:支原體檢測試劑盒
英文名稱:Mycoplasma Detection Kit
產品規(guī)格:100T-200T
發(fā)貨周期:1~3天
本試劑盒是利用熒光染料檢測支原體污染。這種染料會結合到DNA的A-T富集區(qū)域,因為支原體的DNA中A-T含量高(55%~80%),所以可將其染色而被檢測到。被支原體污染的細胞經(jīng)染色后在細胞周圍可看到許多大小均一的熒光小點,即為支原體的DNA染色斑,說明有支原體污染。Hoechst 33258的大激發(fā)波長為346nm,大發(fā)射波長為460nm;Hoechst 33258和雙鏈DNA結合后,大激發(fā)波長為352nm,大發(fā)射波長為461nm。 |
操作步驟:
貼壁細胞:
1.被檢細胞接種于無菌的6孔細胞培養(yǎng)板中,接種密度為1-2×104。同時,接種正常無支原體感染的同種細胞,作為陰性對照。
2.5天后,先吸去培養(yǎng)液,再加入1ml的固定液,靜置20min,
3.吸去固定液,晾干。
4.于每孔中,加入1ml的Hoechst33258工作液(Hoechst 33258工作液須覆蓋全部被檢細胞),37℃避光放置15-20min或室溫靜置20~30min。
5.吸去Hoechst 33258工作液,加入2ml滅菌超純水洗滌三次,直接風干。風干后加入一滴封片液,并以蓋玻片覆蓋。
6.熒光顯微鏡觀察。用紫外激發(fā)光激發(fā),觀察細胞周圍是否有藍色熒光小點或串珠狀熒光小點。
懸浮細胞:
1.收集需檢測的細胞,1500rpm,5min。
2.將收集的細胞涂片于載玻片上,再加1ml的固定液,靜置20min。
3.吸去固定液,晾干。
4.于每孔中,加入1ml的Hoechst33258工作液(Hoechst 33258工作液須覆蓋全部被檢細胞),37℃避光放置15~20min或室溫靜置20~30min。
5.吸去Hoechst 33258工作液,用無菌水洗滌玻片3次,直接風干。風干后加入一滴封固液,并以蓋玻片覆蓋。
6.熒光顯微鏡觀察。用紫外激發(fā)光激發(fā),觀察細胞周圍是否有藍色熒光小點或串珠狀熒光小點。
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)elisa試劑盒英文名稱:8-OHdG ELISA Kit1號染色體開放閱讀框194抗體包裝1g
70kDa熱休克蛋白8(HSPA8)elisa試劑盒英文名稱:HSPA8 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框198抗體包裝25g
70kDa熱休克蛋白5(HSPA5)elisa試劑盒英文名稱:HSPA5 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框21抗體包裝5g
70kDa熱休克蛋白1A(HSPA1A)elisa試劑盒英文名稱:HSPA1A ELISA Kit1號染色體開放閱讀框216抗體包裝1g
60kD熱休克蛋白(HSPD1)elisa試劑盒英文名稱:HSPD1 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框43抗體包裝25g
5羥色胺轉運蛋白(SERT)elisa試劑盒英文名稱:SERT ELISA Kit1號染色體開放閱讀框50抗體包裝5g
5-羥色胺(5-HT)elisa試劑盒英文名稱:5-HT ELISA Kit1號染色體開放閱讀框49抗體包裝1g
5-羥基吲哚乙(5-HIAA)elisa試劑盒英文名稱:5-HIAA ELISA Kit1號染色體開放閱讀框53抗體包裝5g
50kDa核孔蛋白(NUP50)elisa試劑盒英文名稱:NUP50 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框54抗體包裝1ml
27kDa熱休克蛋白(HSPB1)elisa試劑盒英文名稱:HSPB1 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框55抗體包裝5g
25-羥基維生D3(HVD3)elisa試劑盒英文名稱:HVD3 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框56抗體包裝100g
25kDa突觸關聯(lián)蛋白(SNAP25)elisa試劑盒英文名稱:SNAP25 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框65抗體包裝25g
210kDa核孔蛋白(NUP210)elisa試劑盒英文名稱:NUP210 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框64抗體包裝100g
20S-蛋白體(20S-PSM)elisa試劑盒英文名稱:20S-PSM ELISA Kit1號染色體開放閱讀框69抗體包裝25g
2',5'-寡腺苷合成1(OAS1)elisa試劑盒英文名稱:OAS1 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框77抗體包裝500g
馬氏副球菌Paracoccus│marcusii 質量規(guī)格:>99%,BR,三合物胰脂肪試劑盒異槲皮苷;Isoquercitrin
海假交替單胞菌Pseudoalteromonas│marina 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品胰抑制試劑盒異鼠李-3-O-新橙皮苷;Isorha
結核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質量規(guī)格:>99%,BR胰腺癌標志物CA242 elisa試劑盒原蘇木B;Protosappanin
支原體檢測試劑盒一縮二乙二
其他 二甘;二乙二;雙甘;2,2'-氧代二乙
英文名稱: Diethylene glycol
其他英文名稱: β,β′-Dihydroxydiethyl ether;Diglycol;2,2′-Oxybisethanol; 2,2′-Oxydiethanol
產品規(guī)格: 色標
包裝:2毫升
產品規(guī)格: 色固
包裝:25毫升
產品規(guī)格: CP
包裝:500毫升
CAS號:111-46-6
C4H10O3=106.12
級別:GCS
級別:色固
級別:CP
沸程:241~248℃
密度(20℃):1.115~1.118g/ml
度(以H+計):≤0.34 mmol/100g
折光率(n20D):1.446~1.448
灼燒殘渣:≤0.01%
性狀:無色粘稠液體。無氣味。微帶甜味。易吸濕。能與乙、酮、乙二混溶,幾乎不溶于。相對密度(d2020)1.118。熔點-6.5℃。沸點 244~245℃。折光率(n20D)1.4475。閃點(開杯)143℃。半數(shù)致死量(大鼠,經(jīng)口)20.76g/kg。有刺激性
用途:生化研究。溶劑。萃取劑。氣體脫水劑。軟水劑。防凍劑。潤滑劑。氣相色譜固定液(高使用溫度50℃),適用于水溶液分析,選擇性與聚乙二相似,用于分析含氧化合物(特別是)、胺、脂肪胺、吡啶和喹啉。
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