詳細(xì)介紹
中文名稱:Caspase-2活性測定試劑盒
英文名稱:Caspase-2 Activity colorimetric assay Kit
產(chǎn)品規(guī)格:20T|50T|100T
發(fā)貨周期:1~3天
本試劑盒適用于測定哺乳動物組織、細(xì)胞caspase-2活性。測定原理基于Caspase-2特異水解其多肽底物N-acetyl-Val-Asp-Val-Ala-Asp-pNA(Ac-VDVAD-pNA),釋放出游離的硝基pNA,后者呈黃色在405nm具有大吸收峰,用可見光分光光度比色方法測定。其吸光度值對應(yīng)于Caspase-2的水解活性。 |
細(xì)胞凋亡屬于程序化細(xì)胞死亡,可見于各種器官和細(xì)胞,在正常發(fā)育、生理、病理過程中對細(xì)胞和器官的穩(wěn)態(tài)具有十分重要的調(diào)節(jié)作用。Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是參與細(xì)胞凋亡過程的蛋白酶家族,包含10多個成員。Caspase-2也稱Ich-1或Nedd-2,在細(xì)胞凋亡的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中被激活。
運輸及保存:試劑常溫運輸。到達(dá)后按要求儲存,1年內(nèi)穩(wěn)定。
所需儀器:酶標(biāo)儀與96孔酶標(biāo)板;或可見光分光光度計配100μl容積的石英比色杯。
工作波長:大吸收波長405nm,如不具備也可在400~450nm范圍內(nèi)測定,但靈敏度略降。
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
灰黃霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ethionamide補(bǔ)體C1RL鏈多肽抗體包裝5g
灰黃霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Etravirine周期M2抗體包裝100g
回拉西坦;茴拉西坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Famotidine周期T2抗體包裝25g
茴三硫(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Famotidine周期K抗體包裝5g
茴香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Febuxostat抗菌肽CAMP抗體包裝25g
肌(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Febuxostat5號染色體開放閱讀框4抗體包裝5g
肌苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Phenacetin4號染色體開放閱讀框44抗體包裝1g
肌酐(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Phenacetin4號染色體開放閱讀框33抗體包裝5g
?。?biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fingolimod HCL /FTY-7204號染色體開放閱讀框42抗體包裝1g
吉非羅齊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fingolimod HCL /FTY-7205號染色體開放閱讀框33抗體包裝5g
吉莫斯特;吉美嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Flufenamic acid9號染色體開放閱讀框89抗體包裝5mg
吉它霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Flufenamic acid19號染色體開放閱讀框66抗體包裝1mg
己內(nèi)酰(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Flumazenil21號染色體開放閱讀框55抗體包裝5g
加巴噴?。?biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Flumazenil21號染色體開放閱讀框70抗體包裝25g
加替沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fluoxetine Hydrochloride胱抑A/半胱蛋白抑制劑A抗體包裝5g
里拉微球菌Micrococcus│lylae 質(zhì)量規(guī)格:>98%小扁豆結(jié)合型胎蛋白/胎蛋白異質(zhì)體3試劑盒五味子酯;Schisantherin
葡萄座腔菌Botryosphaeria│dothidea (Moug.) Ces. & De Not. 質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%,BR小扁豆結(jié)合型胎蛋白/胎蛋白異質(zhì)體2試劑盒;Aconitine
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:含量>99.0%小扁豆結(jié)合型胎蛋白/胎蛋白異質(zhì)體1試劑盒五味子;Schisandrin A
Caspase-2活性測定試劑盒鹽環(huán)沙星
其他鹽環(huán)氟哌;1-環(huán)基-6-氟-1,4-二氫-4-7(1-嗪基)-3-喹啉羧鹽鹽水合物;環(huán)沙星鹽鹽
英文名稱:Ciprofloxacin hydrochloride
其他英文名稱:1-Cyclopropyl-6-fluoro-1,4-dihydro-4-oxo-7-(1-piperazinyl)-3-quinolinecarboxylic acid hydrochloride hydrate;Ciprofloxacine-D8 hydrochloride hydrate
產(chǎn)品規(guī)格:USP級,88.5%
包裝:25克/100克/500克
CAS號:93107-08-5
C17H18FN3O3•HCl = 367.9
級別:USP級
含量(無水物計):≥88.5%
PH:3.0~4.5
用途:生化研究。通過抑制DNA旋轉(zhuǎn),使DNA合成和復(fù)制受阻而導(dǎo)致死亡。對大腸桿菌、克雷白桿菌和其他腸桿菌屬有較強(qiáng)活性;對綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌和肺炎鏈球菌的作用優(yōu)于諾氟沙星和培氟沙星。
保存:RT