詳細介紹
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:MTT細胞增值與毒性檢測試劑盒
英文名稱:MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit
產(chǎn)品規(guī)格:500T
發(fā)貨周期:1~3天
MTT可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物formazan,在特定溶劑存在的情況下,可以被*溶解,然后通過酶標儀可以測定490nm波長附近的吸光度。細胞增殖越多越快,則吸光度越高;細胞毒性越大,則吸光度越低。 |
使用說明:
1.收集對數(shù)期細胞,調(diào)整細胞懸液濃度,分于96孔板,每孔180μL,3000-10000個細胞/孔。
2.置37℃、5%CO2溫箱培養(yǎng)使細胞貼壁,培養(yǎng)6-24小時。
3.加入適當濃度的受試化合物,繼續(xù)培養(yǎng)適當時間。
4.小心吸去上清,加入90μL新鮮培養(yǎng)液,再加入10μL MTT溶液,繼續(xù)培養(yǎng)4 h。
5.然后吸掉上清,每孔加入110μL Formazan溶解液,置搖床上低速振蕩10 min,使結(jié)晶物充分溶解。在酶聯(lián)免疫檢測儀490 nm處測量各孔的吸光值。
6.同時設(shè)置調(diào)零孔(培養(yǎng)基、MTT、 Formazan溶解液),對照孔(細胞、相同濃度的藥物溶解介質(zhì)、培養(yǎng)液、MTT、 Formazan溶解液),每組設(shè)定3復(fù)孔。
儲存條件:-20℃
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
D-二聚體(D2D)elisa試劑盒英文名稱:D2D ELISA Kit原癌蛋白CBL2抗體包裝5g
D-多巴色變位(DDT)elisa試劑盒英文名稱:DDT ELISA Kit信號調(diào)節(jié)蛋白α抗體包裝1g
DNA修復(fù)蛋白RAD50(RAD50)elisa試劑盒英文名稱:RAD50 ELISA Kit信號淋巴活化分子CD150抗體包裝5g
DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子3(DDIT3)elisa試劑盒英文名稱:DDIT3 ELISA Kit巨噬炎性蛋白16抗體包裝10g
DNAⅠ樣蛋白3(DNASE1L3)elisa試劑盒英文名稱:DNASE1L3 ELISA Kit果蠅CG6856-PA抗體包裝5g
DNA基轉(zhuǎn)移3B(DNMT3B)elisa試劑盒英文名稱:DNMT3B ELISA Kit色c氧化COX7A2抗體包裝1g
DNA基轉(zhuǎn)移1(DNMT1)elisa試劑盒英文名稱:DNMT1 ELISA Kit剪切和多聚腺苷化特異性因子4抗體包裝25g
DNA激活蛋白激催化亞基肽(PRKDC)elisa試劑盒英文名稱:PRKDC ELISA Kit組織蛋白E抗體包裝5g
Discs大同源物4(DLG4)elisa試劑盒英文名稱:DLG4 ELISA Kit緊密連接蛋白5抗體包裝25g
Discoidin域受體家族成員1(DDR1)elisa試劑盒英文名稱:DDR1 ELISA Kit分化周期CDC42相互作用蛋白4抗體包裝5g
Dickkopf相關(guān)蛋白4(DKK4)elisa試劑盒英文名稱:DKK4 ELISA Kit周期蛋白依賴性激樣3抗體包裝100ml
Dickkopf相關(guān)蛋白1(DKK1)elisa試劑盒英文名稱:DKK1 ELISA Kit殺菌肽/天蠶抗菌肽單克隆抗體包裝25ml
C組著色性干皮病偶聯(lián)因子(XPC)elisa試劑盒英文名稱:XPC ELISA Kit第十七號染色體開放閱讀框87抗體包裝1g
C-型鈉尿肽(CNP)elisa試劑盒英文名稱:CNP ELISA Kit降鈣受體抗體包裝25g
C-肽(C-Peptide)elisa試劑盒英文名稱:C-Peptide ELISA Kit補體C2a鏈多肽抗體包裝5g
蠟樣芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格:purity>97%,BR乙型肝炎病e抗原試劑盒野鷲尾苷;Lridin
: ivcas7.00265資源名稱: 球形賴芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,單醋鹽乙型肝炎病e抗體試劑盒芫花;Genkwanin
百日咳博德特氏菌Bordetella│pertussis 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,BR乙型肝炎表面抗原試劑盒3-乙?;橄?;alpha-bosw
MTT細胞增值與毒性檢測試劑盒衣康
其他 亞甲基琥珀;2-亞甲基丁二;分解烏頭;甲叉琥珀;甲叉丁二;亞甲基丁二;次甲基丁二;2-亞基-1,2-二羧;次甲基丁烯二;伊康
英文名稱: Itaconic acid
其他英文名稱: Propylenedicarboxylic acid
產(chǎn)品規(guī)格: CP,99%
包裝:100克/500克/5公斤
CAS號:97-65-4
C5H6O4=130.10
級別:CP
含量:99.0~101.0%
熔點:162~168℃(2℃)
水溶解試驗:合格
灼燒殘渣(以硫鹽計):≤0.1%
性狀:結(jié)晶。有特殊氣味。有吸濕性。1G溶于12ml水、5ml乙,極微溶于、、二硫化碳。相對密度1.63。有刺激性
用途:生化研究。有機合成
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