詳細(xì)介紹
檢測(cè)原理:
產(chǎn)品僅用于科研試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
Plant vitamin D2 (VD2) ELISA Kit | FS-P5997 |
ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn):
1、*抗體----高效、靈敏、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,可靠性強(qiáng)
4、購(gòu)買本公司的ELISA試劑盒,免費(fèi)代測(cè)
5、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),規(guī)范,高效
6、適用于體液、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7、可檢測(cè)動(dòng)物類型豐富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黃金地鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚、斑馬魚等
8、可檢測(cè)指標(biāo)齊全:炎癥因子、血管生成素、動(dòng)脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長(zhǎng)因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系,科研隊(duì)伍,良好的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,是您可靠的合作伙伴。
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操作要點(diǎn):
1)標(biāo)本的采取和保存:可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本;
2)試劑的準(zhǔn)備:所需試劑、蒸餾水、去離子水、自配的緩沖液;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后??乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間,這一保溫過(guò)程稱為溫育。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動(dòng)洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的后一步溫育反應(yīng),此時(shí)酶催化無(wú)色的底物生成有色的產(chǎn)物。比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中。儀器準(zhǔn)備為酶標(biāo)儀。
7)結(jié)果判斷:分定性判定和定量判定。
蛋白酪氨酸酸酶受體K(PTPRK)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- CIC antibody34 kDa
蛋白酪氨酸酸酶受體B(PTPRB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- CIDEA antibody25kd
三葉因子1(TFF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- CILP2 antibody90 kDa
雌激素受體α(ERα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- CIN85 antibody85 kDa
膽囊收縮素B受體(CCKBR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- Cingulin antibody136-150 kDa
催產(chǎn)素(OT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- CIP29 antibody29-32 kDa
凋亡蛋白酶激活因子1(APAF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- CIRBP antibody18 kDa
V-Myb髓細(xì)胞組織增生病毒癌基因同源物(MYB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- Cirhin antibody70-77 kDa
70kDa熱休克蛋白4(HSPA4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- CISD1 antibody17 kDa
泛素連接酶E3A(UBE3A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- CISD2 antibody13-15 kDa
多聚免疫球蛋白受體(PIGR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- CISD2-Specific antibody15 kDa
促胰液素(SCT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- CIT antibody230kd
促胰液素受體(SCTR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- CITED2 antibody24 kDa
ⅡD組脂酶A2(PLA2G2D)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- Citrate synthase antibody50 kDa
S100鈣結(jié)合蛋白A13(S100A13)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- CKAP2 antibody75-85 kDa
通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡH肽1(GTF2H1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- CKAP2L antibody84 kDa
S100鈣結(jié)合蛋白A12(S100A12)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- CKAP4 antibody63 kDa
70kDa熱休克蛋白1A(HSPA1A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- c-Kit/CD117 antibody140 kDa
70kDa熱休克蛋白9(HSPA9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)anti- c-Kit/CD117 antibody120 kDa, 145 kDa
植物維生素D2ELISA檢測(cè)試劑盒HyphomonasrosenbergiiCIN85/CD2BP3 CD2結(jié)合蛋白3抗體100 ul
OhtaekwangiakoreensisTLX3 T細(xì)胞白血病同源盒蛋白3抗體1 Kit
壞死梭桿菌壞死亞種TM4SF3 跨膜蛋白4超家族成員3抗體100 ul
谷氨酸棒狀桿菌(黃色短桿菌)TAAL6/Transmembrane 4 L6 family member 1 腫瘤相關(guān)抗原L6抗體20 ul
霍亂弧菌WNT7B Wnt蛋白家族7B抗體100 ul
洋蔥伯克霍爾德氏菌Wnt8b WNT蛋白家族Wnt8b抗體100 ul
土生拉烏爾菌(土生克雷伯菌)VHR/DUSP3 絲氨酸/蘇氨酸特定蛋白磷酸酶抗體5 mg
香茅醇假單胞菌GUK1/Guanylate kinase 鳥苷酸激酶GMK抗體100 ul
渾濁紅球菌IMPAD1 肌醇單磷酸酶IMPA3抗體100 ul
開菲爾乳桿菌LCMT1 亮氨酸羧基甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體100 ul
土白蟻叢毛單胞菌DPPL1 磷脂酸磷酸酶HTPAP抗體100 ul
韓國(guó)叢毛單胞菌ARK5 AMPK的相關(guān)蛋白激酶5抗體20 ul
腸膜明串珠菌Snf1lk/SIK1 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶SIK1抗體1 Kit
DokdonellafugitivaCAMKK2 鈣調(diào)蛋白激酶激酶β抗體100 ul
DokdonellaginsengisoliIMPDH1 肌苷單磷酸脫氫酶1抗體100 ul
短短芽孢桿菌STK38 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶38抗體100 ul
腸炎沙門氏菌亞利桑那亞種Phospho-Bcr(Tyr360) 磷酸化T淋巴細(xì)胞受體抗體100 ul
SphingobiumjaponicumMIRK/Dyrk1B 雙特異性酪氨酸磷酸化調(diào)節(jié)激酶1B100 ul
ELISA試驗(yàn)時(shí),注意事項(xiàng)如下:
1. 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 產(chǎn)品僅用于科研在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見(jiàn)酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無(wú)色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。