詳細介紹
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Collagenase III | 100mg | 1~3天 |
商品介紹:
本品為III型膠原酶,≥100 U/mg solid,常用于乳腺細胞和胎兒細胞的制備。 本品來源于溶組織梭菌(Clostridium histolyticum),是一種酶粗提物,不僅含有膠原酶(更準確的稱法為梭菌蛋白酶A(clostridiopeptidase A)),能夠降解天然膠原和網(wǎng)狀纖維。還含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等,分別能夠有效水解結(jié)締組織和上皮組織細胞外基質(zhì)內(nèi)的其他蛋白,多糖和脂質(zhì),使得本品非常適用于組織消化。 |
膠原酶(Collagenase)是一種蛋白酶,一種肽鏈內(nèi)切酶,能夠特異性的識別Pro-X-Gly-Pro序列(該序列高頻率出現(xiàn)在膠原中,很少發(fā)現(xiàn)于其他蛋白中)并切割該序列中性氨基酸(X)和甘氨酸(Gly)之間的肽鍵。許多蛋白酶都能水解單鏈且變性的膠原多肽,但膠原酶是一種可以降解具有三股超螺旋結(jié)構(gòu)的天然膠原纖維的蛋白酶,這種膠原纖維廣泛存在結(jié)締組織內(nèi)。
目前商業(yè)化提供的細菌膠原酶主要根據(jù)膠原酶活性的差異,分為四種類型:膠原酶I型,II型,III型和IV型,在應(yīng)用上有所偏向:
1)膠原酶I(Type I Collagenase):含有比較均勻的各種酶活力(包括膠原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性)。通常用作上皮細胞、肝、肺、脂肪和腎上腺組織細胞的制備;
2)膠原酶II(Type II Collagenase):含有更高的梭菌蛋白酶活性,通常用于心臟、骨、肌肉、胸腺和軟骨等組織來源細胞的制備;
3)膠原酶III(Type III Collagenase):含有較低的蛋白酶活性,常用于乳腺細胞的制備;
4)膠原酶IV(Type IV Collagenase):含有低胰酶活性,通常用于胰島細胞的制備,或者需要維持受體完整性的細胞制備實驗。
分子量:68-130 kDa
激活劑:Ca2+、Zn2+
抑制劑:EDTA, EGTA,Cysteine, histidine, 2-mercaptoethanol, o-phenanthroline DTT, Hg2+, Pb2+, Cd2+, Cu2+, Zn2+, Not inhibited by DFP or serum
活力單位:在37℃,pH7.5 的條件下,5h內(nèi)水解膠原產(chǎn)生相當于1μM L-亮氨酸的酶量定義為1個酶活力單位。
儲存條件:4℃避光,有效期兩年
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
洛莫司?。藴势罚┯⑽拿Q: Adenosine-5'-diphosphate disodium salt(ADPna)CD8抗體包裝1g
洛匹那韋(標準品)英文名稱: Adenosine 5'-(trihydrogen diphosphate)/ADP表面趨化因子受體2抗體包裝100g
洛索洛芬鈉(標準品)英文名稱: Saxagliptin monohydrate胱抑B/半胱蛋白抑制劑B抗體包裝25g
麻保沙星;馬波沙星(標準品)英文名稱: Ganciclovir趨化樣蛋白抗體包裝5g
馬來地平(標準品)英文名稱: Ganciclovir角蛋白20抗體包裝100g
馬來吡汀(標準品)英文名稱: 5,6-Dimethoxy-1-indanone鈣激活的中性蛋白2抗體包裝25g
馬來伏沙明(標準品)英文名稱: PaeoniflorinCD45RO抗體包裝100g
馬來桂哌齊特(標準品)英文名稱: Paeoniflorin嗜中性粒抗原CD177抗體包裝25g
馬來那敏/撲爾敏(標準品)英文名稱: Paeoniflorin鈣整合結(jié)合蛋白1抗體包裝5g
馬來曲美布?。藴势罚┯⑽拿Q: Paeoniflorin21號染色體開放閱讀框7抗體包裝100g
馬來噻嗎洛爾(標準品)英文名稱: Paeoniflorin磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝25g
馬來替加色羅(標準品)英文名稱: 5-Hydroxytryptophan磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝5g
馬來溴那敏(標準品)英文名稱: 5-HTP磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝1g
馬來依那普利(標準品)英文名稱: Rivastigmine tartrate磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝5g
嗎多明(標準品)英文名稱: Rivastigmine tartrate磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝25g
小單孢菌Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP色c氧化亞基5A,線粒體試劑盒土荊皮乙;Pseudolaric Ac
馬爾他布魯氏菌 生物Ⅰ型Brucella│melitensis BiovarⅠ 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品色c氧化Ⅵα亞基多肽1試劑盒塔拉薩敏;Talatisamine
: =LMG27494T=CGMCC1.12516T資源名稱: 芽孢八疊球菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于培養(yǎng)色C氧化試劑盒天麻;Gastrodin
膠原酶III型亞磷三乙酯
其他 三乙基亞磷酯;三乙氧基膦
英文名稱: Triethyl phosphite
其他英文名稱: Phosphorous acid triethyl ester
產(chǎn)品規(guī)格: AR,98%
包 裝: 100毫升
CAS號:122-52-1
C6H15O3P=166.16
級別:AR
含量:≥98%
折光率:1.412~1.414
性狀:無色液體。對濕敏感。能與乙、 、混溶,不溶于水。相對密度0.9687。沸點 156.6℃。閃點 54℃。易燃。 有刺激性
用途:生化研究。有機合成。增塑劑。穩(wěn)定劑。潤滑油脂的添加劑。
保存:RT
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。