培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
FGFR抑制劑(NVP-BGJ398) | NVP-BGJ398 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg | 1~3天 |
商品介紹:
英文名稱:NVP-BGJ398 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg NVP-BGJ398是一種有效的FGFR抑制劑,抑制FGFR1,F(xiàn)GFR2,F(xiàn)GFR3和FGFR4,IC50分別為0.9nM,1.4nM,1nM和60nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):872511-34-7 別名:Infigratinib;BGJ-398 純度:99.88% 分子量:560.48 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
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魏登施泰芽孢桿菌Bacillus│weihenstephanensis 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品莨菪堿
: HBUM74687資源名稱: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC, ≥99.5% (GC)野馬追內(nèi)酯A
FGFR抑制劑(NVP-BGJ398)末端轉(zhuǎn)移
其他末端脫氧核苷轉(zhuǎn)移;胸腺五肽
英文名稱:TDT
其他英文名稱:Terminal Transferase;Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
產(chǎn)品規(guī)格:BR,20u/ul
包裝:500U/2500U
CAS號(hào):9027-67-2
分子量:60000
級(jí)別:BR
來(lái)源:大腸桿菌細(xì)胞,含有編碼牛胸腺末端脫氧核苷轉(zhuǎn)移的基因
濃度:20u/ul
活性定義:是指在37℃、60分鐘內(nèi)將1nmol脫氧核糖核摻入多聚核苷片段(吸附在DE-81上)所需的量
性狀:淡黃至淺褐色粉末或細(xì)顆粒。選用里氏木霉高產(chǎn)菌株培養(yǎng),經(jīng)液體深層通風(fēng)發(fā)酵,提取精制而成。是一種內(nèi)切,專(zhuān)一性作用于β-葡聚糖的1,3和1,4糖苷鍵,產(chǎn)生3-5個(gè)葡萄糖單位的低聚糖和葡萄糖
用途:生化研究??墒?/span>β-葡聚糖降解為低分子多糖
保存:2~8℃