詳細介紹
實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
48T | FS-02R6463 |
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。 2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取, 多出的一個是PC(樣品制備陽性對照), 一個是NC(樣品制備陰性對照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。 | 三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行) 10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
|
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
Alpha-GST ELISA Kit 大鼠α谷胱甘肽S轉移Multi-class antibodies: 48T
TRIM32 TRIM32抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh GIMAP5 GTPIMAP家族成員5抗體 0.2ml
CA-2(Mouse carbonic anhydrase 2) ELISA KIT 小鼠碳酐2 96T
Phospho-NMDAR2A (Tyr1325) 磷化谷受體2A抗體 0.1ml
ALS2CR8 肌側索硬化2染色體區(qū)域候選蛋白8抗體 0.2ml
TRIM32 TRIM32抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
P53(Human p53/tumor protein) ELISA kit 人P53Multi-class antibodies: 48T
HIV-1 ENV(gp160) 艾滋病病毒-1包膜糖蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MDH1 可溶性蘋果脫氫抗體 0.1ml
AZU(Human azurocidin) ELISA Kit 人天青殺 96T
RNF121 環(huán)指蛋白121抗體 0.2ml
phospho-alpha B Crystallin (Ser45) 磷化α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體 0.1ml
HIV-1 ENV(gp160) 艾滋病病毒-1包膜糖蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit chicken IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗雞IgG 0.1ml
GPR135 G蛋白偶聯(lián)受體GPR135蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADAM23 去整合樣金屬蛋白23抗體 0.2ml
Phospho-MARCKS (Ser152/156) /FITC 熒光標記磷化丙蛋白激C底物Marcks抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Bovine IgM/Cy5 Cy5標記的兔抗IgM 0.1ml
TFPI-2/FITC 熒光標記組織因子途徑抑制劑-2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
鯉春病毒血癥病毒(SVCV)RNAPCR檢測試劑盒血液賴(lysine)含量化學比色法檢測試劑盒20次大鼠蛋白磷elisa檢測試劑盒
體液賴(lysine)含量化學比色法檢測試劑盒20次大鼠趨化因子elisa檢測試劑盒
植物賴(lysine)含量化學比色法檢測試劑盒20次大鼠基質(zhì)金屬蛋白1elisa檢測試劑盒
通用型賴(lysine)含量熒光檢測試劑盒20次大鼠骨形成蛋白6elisa檢測試劑盒
細胞賴(lysine)含量熒光檢測試劑盒20次大鼠組織蛋白Kelisa檢測試劑盒
組織賴(lysine)含量熒光檢測試劑盒20次大鼠多巴轉運蛋白elisa檢測試劑盒
血液賴(lysine)含量熒光檢測試劑盒20次大鼠血管緊張轉化elisa檢測試劑盒
體液賴(lysine)含量熒光檢測試劑盒20次大鼠網(wǎng)膜elisa檢測試劑盒
植物賴(lysine)含量熒光檢測試劑盒20次大鼠巨噬炎癥蛋白5elisa檢測試劑盒
通用型賴(lysine)含量高效液相色譜法檢測試劑盒20次大鼠Ⅱ型膠原elisa檢測試劑盒
細胞賴(lysine)含量高效液相色譜法檢測試劑盒20次大鼠Ⅳ型膠原elisa檢測試劑盒
組織賴(lysine)量高效液相色譜法檢測試劑盒20次大鼠骨成型蛋白受體Ⅱelisa檢測試劑盒
血液賴(lysine)含量高效液相色譜法檢測試劑盒20次大鼠白介18elisa檢測試劑盒
體液賴(lysine)含量高效液相色譜法檢測試劑盒20次大鼠單核趨化蛋白4elisa檢測試劑盒
植物賴(lysine)含量高效液相色譜法檢測試劑盒20次大鼠因子Ⅻelisa檢測試劑盒