詳細(xì)介紹
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:2mg BAY 11-7082是一種常用的NF-κB 抑制劑。BAY 11-7082可以抑制一些細(xì)胞因子誘導(dǎo)的IκBα的磷酸化,從而抑制IκBα降解和隨后的NF-κB 核轉(zhuǎn)運(yùn),終抑制依賴于NF-κB 的基因轉(zhuǎn)錄。 BAY 11-7082分子量為207.25,分子式為C10H9NO2S。本產(chǎn)品純度大于99%。 本BAY 11-7082為進(jìn)口分裝,用無(wú)水DMSO 配制,濃度為20mg/ml,共0.1ml。 BAY 11-7082常見使用濃度范圍為1-100μM。具體的佳工作濃度請(qǐng)參考相關(guān)文獻(xiàn),或根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,以及所培養(yǎng)的特定細(xì)胞和組織,通過(guò)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行摸索和優(yōu)化。 注意事項(xiàng) 1.本BAY 11-7082在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi),可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。 2.為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 儲(chǔ)存:-20℃避光,有效期一年。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
平菇1號(hào)染色體開放閱讀框38抗體Human Cytohesin 1 ELISA Kit兔6前列腺F1a(6-keto-PGF1a)免疫試劑盒
蛹蟲草脫羧蛋白體36抗體Human DOCK180 ELISA Kit兔1,4,5-三磷肌(IP3)免疫試劑盒
萊茵海默氏菌間隙連接蛋白40抗體Human DAPK1 ELISA Kit山羊ELISA試劑盒
云芝間隙連接蛋白43抗體Human DNAJC2/MPP11 ELISA Kit山羊轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGF-β2)免疫試劑盒
假蜜環(huán)菌(蜜環(huán)菌、小蜜環(huán)菌、榛蘑)間隙連接蛋白45抗體Human DNAJB(DnaJ homolog subfamily B member 8) ELISA Kit山羊轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)免疫試劑盒
黃傘表面趨化因子受體1抗體Human DCBLD2 ELISA Kit山羊腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒
釀酒酵母色P450單氧化抗體Human DOCK180 ELISA Kit山羊脂聯(lián)(ADP)免疫試劑盒
雙孢嗜熱雙孢菌色C抗體Human Cytohesin 1 ELISA Kit山羊脂多糖/內(nèi)(LPS)免疫試劑盒
秦氏蜜環(huán)菌角蛋白1抗體Human DNAJC2/MPP11 ELISA Kit山羊脂蛋白脂(LPL)免疫試劑盒
泡盛曲霉巨病PP65/CMV低基質(zhì)磷脂蛋白抗體Human DAPK1 ELISA Kit山羊孕激/孕(PROG)免疫試劑盒
大腸桿菌周期C抗體Human CREST ELISA Kit山羊胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)免疫試劑盒
周期B1抗體Human DCBLD2 ELISA Kit山羊胰島樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)免疫試劑盒
竹瘤座菌球蛋白抗體Human DPPA4 ELISA Kit山羊胰島(INS)免疫試劑盒
環(huán)形泰勒蟲(內(nèi)蒙株)周期D1抗體Human Claudin 23 ELISA Kit山羊血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)免疫試劑盒
中間型鏈霉菌周期D2抗體Human Claudin 7 ELISA Kit山羊血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒
木蹄層孔菌周期E抗體Human Cortactin ELISA Kit山羊血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)免疫試劑盒
百日咳博德特氏菌Bordetella│pertussis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRQ熱科克斯體2試劑盒藜蘆
鏈球菌屬Streptococcus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BPQ熱科克斯體2試劑盒龍血C
曲霉屬Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRQ熱科克斯體1試劑盒龍血A
BAY 11-7082(NF-κB抑制劑)葡聚糖T5
其他葡聚糖D5;右旋糖酐5
英文名稱:Dextran T5
其他英文名稱:Mucrose;Glucose polymer
產(chǎn)品規(guī)格:BR,分子量5000
包裝:10克/100克
CAS號(hào):9004-54-0
分子式:(C6H10O5) n
分子量:~5000
級(jí)別:BR
鑒別:呈正反應(yīng)
比旋光度:+175~+190o
pH:4.0~7.0
氯化物:≤0.1%
干燥失重:≤7.0%
重金屬:≤10ppm
性狀:粉末,不溶于乙,在中性溶液中很穩(wěn)定,遇強(qiáng)及升高溫度下被水解,在堿性溶液中端基能被氧化。易溶于水。無(wú)臭,無(wú)味。其溶液可在100-115℃熱壓30-45min。葡聚糖存在于某些微生物生長(zhǎng)過(guò)程中分泌的粘液中。主要由D葡萄喃糖以α,1→鍵連接,支鏈點(diǎn)有1-→2,1→3,1→4連接。隨著微生物種類和生長(zhǎng)條件的不同,其結(jié)構(gòu)也有差別
用途:生化研究。細(xì)胞研究,沉淀反應(yīng),從全血中分離白細(xì)胞。學(xué)研究。滲透性研究。惰性膠體已占容積和生物細(xì)胞壁體積的測(cè)定。
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