培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
ALK抑制劑(LDK378) | LDK378 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg | 1~3天 |
商品介紹:
英文名稱:LDK378 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg LDK378是一種有效的特異性ALK抑制劑,IC50為0.2nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1032900-25-6 別名:Ceritinib 純度:99.92% 分子量:558.14 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Deinococcus癌中心體相關蛋白抗體Human VIMP (Selenoprotein S) ELISA KIT人γ基丁(GABA)免疫試劑盒
藤黃孢鏈霉菌DCAF13蛋白抗體Human RUNDC1 (RUN domain-containing protein 1) ELISA KIT人β-轉(zhuǎn)導重復序列包含蛋白(BTRC)免疫試劑盒
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地衣芽孢桿菌二肽基肽9抗體Human STYX (Serine/threonine/tyrosine-interacting protein) ELISA KIT人β乳糖蛋白抗體IgG 免疫試劑盒
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草假單胞菌DQX1蛋白抗體Human SIGIRR (Single Ig IL-1-related receptor) ELISA KIT人β葡萄糖苷(β-glucosidase)免疫試劑盒
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植物乳桿菌磷化三磷腺苷依賴解旋ddx5抗體Human SSBP2 (Single-stranded DNA-binding protein 2) ELISA KIT人β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)免疫試劑盒
杏鮑菇閱讀障礙相關蛋白DLX2抗體Human NEMF (Nuclear export mediator factor NEMF) ELISA KIT人β內(nèi)啡肽(β-EP)免疫試劑盒
釀酒酵母肌營養(yǎng)蛋白α抗體Human RRM2B(Ribonucleoside-diphosphate reductase subunit M2 B) ELISA Kit人β-連環(huán)蛋白(CTNNB1/CTNNB/OK/SW-cl.35/PRO2286)免疫試劑盒
威尼克何德霉Hortaea│werneckii 質(zhì)量規(guī)格:100μg/mL(20°C),基體:5%HCl玉米黃;玉米黃質(zhì)
鼠傷寒沙門氏菌Salmonella│Typhimurium 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,基體:1.0 mol/L 硝柯里拉京
亞硫鹽桿菌Sulfitobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:100mg/L(20℃),基體:1%HCl千金藤
ALK抑制劑(LDK378)麥芽四糖
英文名稱:Maltotetraose
產(chǎn)品規(guī)格:BR,95%
包裝:100毫克/500毫克
CAS號:34612-38-9
C24H42O21=666.58
級別:BR
含量:≥95%
比旋光度:165~180 °(C=5, H2O,25℃)
性狀:粉末。溶于水
用途:生化研究。
保存:RT