培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
用途: 又稱監(jiān)牢藍(lán)髓鞘染色,石蠟切片 注意事項(xiàng): 分化步驟很重要,染色結(jié)果為:髓鞘呈藍(lán)綠色,細(xì)胞核呈紅色。 儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
香蒲新苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nardosinone載脂蛋白AI調(diào)節(jié)蛋白1抗體包裝100g
香薷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Praeruptorin B黑色瘤硫軟骨蛋白多糖抗體包裝25g
香葉木-7-O-葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Atractylenolide II核蛋白易位啟動(dòng)子區(qū)域TPR抗體包裝500g
香葉木(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Clinodiside A核因子1X抗體包裝100mg
香櫞(枸櫞)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sauchinone環(huán)指蛋白107抗體包裝1g
香櫞(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Emodin-8-glucoside軸突生長誘向因子G1配體抗體包裝250mg
香紫蘇(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Isoliensinine神經(jīng)前體表達(dá)發(fā)育下調(diào)蛋白5抗體包裝100g
香紫蘇內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Liensinine Perchlorate軸突生長誘向因子4抗體包裝25g
襄五脂英文名稱: 3-Butylidenephthalideγ-分泌組件蛋白NCLN抗體包裝500g
消旋山莨菪堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pachymic acid核受體蛋白NR2E3抗體包裝100g
小白菊內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Corilagin絲/蘇蛋白激NEK8抗體包裝25g
小駁骨(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ginsenoside F3核孔蛋白Nup37抗體包裝500g
小檗紅堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sophoridine核結(jié)構(gòu)蛋白5抗體包裝500mg
小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Demethylzeylasteral核苷結(jié)合蛋白1抗體包裝25g
小檗皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Harmine hydrochloride核苷結(jié)合蛋白2抗體包裝5g
植物乳桿菌Lactobacillus│plantarum 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于培養(yǎng)緊密連接蛋白1試劑盒柴胡皂苷B2;Saikosaponin
纖維堆囊菌Sorangium│cellulosum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白1試劑盒甘草查爾;Echinatin
彼爾姆短桿菌Brevibacterium│permense 質(zhì)量規(guī)格:AR,98%金屬硫蛋白2試劑盒穿心蓮新苷 ;Neoandrograph
Luxol Fast Blue染色液十二烷基磺鈉
其他月桂基磺鈉;1-十二烷基磺鈉鹽
英文名稱:Sodium dodecanesulfonate
其他英文名稱:1-Dodecane sulfonic acid sodium salt;Sodium laurylsulfonate;Dodecyl sulfonic acid sodium salt
產(chǎn)品規(guī)格:CP,97%
包裝:250克
CAS號(hào):2386-53-0
C12H25NaO3S=272.38
級(jí)別:CP
含量:≥97.0%
氯化鈉:≤0.5%
不皂化物:≤1.5%
水分:≤1.0%
性狀:淺黃色結(jié)晶或粉末。溶于水和熱乙。熔點(diǎn)>300℃
用途:生化研究。陽離子型表面活性劑。乳化劑。發(fā)泡劑
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