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詳細介紹
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格：
產品貨號：FS-02R6645
產品規(guī)格：48T 0.2PCR管
產品分類：轉基因大豆檢測系列（Gm4）PCR-熒光探針法
產品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。
Mdr-1/FITC 熒光標記多藥耐藥蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
TLR1/FITC 熒光標記Toll樣受體1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Ack1 醋激1抗體 0.2ml
Rabbit Bov IgG/Bio 生物標記的兔抗IgG 0.1ml
GPR40 G蛋白偶聯(lián)受體40抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Biotin/HRP 辣根過氧化物標記的兔抗生物抗體IgG 0.1ml
TLR1/FITC 熒光標記Toll樣受體1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
ANNA-1/Hu(Human neuronal nuclear autoantibody) ELISA Kit 人抗神經元核抗體1型/抗Hu抗體Multi-class antibodies： 48T
IL-17D/IL-27 白介-17D抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Lumican 基膜聚糖蛋白抗體 0.2ml
1,3-DPG(Human 1,3-Disphosphoglycerate, ELISA Kit 人1,3-二磷甘油 96T
REG1A 胰島細胞再生因子ICRF抗體 0.2ml
CD13 CD13肽N抗體 0.1ml
IL-17D/IL-27 白介-17D抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit Guinea pig IgM/Cy5 Cy5標記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml
Glycoprotein VI 糖蛋白VI/六糖蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh AIFM3 凋亡誘導因子3抗體 0.2ml
Phospho-LAT (Tyr171) /FITC 熒光標記磷化T細胞活化連接蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM/AP 性磷(AP)標記的兔抗羊IgM 0.1ml
SPHK1/FITC 熒光標記鞘氨醇激1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
大豆內源基因核酸檢測試劑盒48T0.2PCR管兔通用轉錄因子II B（GTF2B）elisa檢測試劑盒
兔蛋白活受體4（PAR4）elisa檢測試劑盒
兔上皮型鈣粘蛋白 （E-Cad）elisa檢測試劑盒
兔黏病耐藥蛋白1（MX1）elisa檢測試劑盒
猴成纖維生長因子21（FGF21）elisa檢測試劑盒
猴蛋白抑制劑γ（PKIγ）elisa檢測試劑盒
猴硫軟骨（CS）elisa檢測試劑盒
猴踝蛋白（TLN）elisa檢測試劑盒
兔染色盒同源物3（CBX3）elisa檢測試劑盒
猴載脂蛋白C4（ApoC4）elisa檢測試劑盒
猴彈性蛋白（ELN）elisa檢測試劑盒
兔過氧化物體生物合成因子2 （PEX2）elisa檢測試劑盒
兔肽釋放7（KLK7）elisa檢測試劑盒
兔阻抑（PHB）elisa檢測試劑盒
兔補體片段3b（C3b）elisa檢測試劑盒
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