培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
英文名稱:Decitabine 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg Decitabine是一種胞嘧啶類似物,為DNA methyltransferase抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):2353-33-5 別名:NSC 127716;5-Aza-2-deoxycytidine 純度:99.99% 分子量:228.21 儲(chǔ)存條件:-20℃避光,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
抗生溶桿菌皮質(zhì)1抗體Human GLP2(Glucagon Like Peptide 2) ELISA Kit人前列腺E1(PGE1)免疫試劑盒
串珠鐮刀菌8號(hào)染色體開放閱讀框70抗體Human GLUT2(Glucose Transporter 2) ELISA Kit人前列腺D合成(PGDS)免疫試劑盒
氧化微桿菌胰羧肽E抗體Human GKN1(Gastrokine 1) ELISA Kit人前列腺D2(PGD2)免疫試劑盒
菌核青霉磷化角蛋白18抗體Human GLUT4(Glucose Transporter 4) ELISA Kit人前列腺A1(PGA1)免疫試劑盒
類芽孢桿菌20號(hào)染色體開放閱讀框112抗體Human GM-CSF Ab(Anti-Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor Antibody) ELISA Kit人前列環(huán)(PGI2)免疫試劑盒
明尼蘇達(dá)被毛孢10號(hào)染色體開放閱讀框88抗體Human Glyoxalase I(GLO1) ELISA Kit人前顆粒蛋白(PGRN)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌富含半胱C端蛋白1抗體Human GNβ1(G Protein Beta 1) ELISA Kit人前膠原C內(nèi)肽增強(qiáng)子1(PCOLCE1)免疫試劑盒
海神弧菌E1A激活基因激蛋白2抗體Human GP-73(Golgi Protein 73) ELISA Kit人前膠原C端肽(PCP)免疫試劑盒
谷棒桿菌壁合成蛋白43抗體Human GDN(Glia Derived Nexin) ELISA Kit人前動(dòng)力蛋白1(PROK1/EG-VEGF)免疫試劑盒
茯苓19號(hào)染色體開放閱讀框29抗體Human GH2(Growth Hormone 2) ELISA Kit人前病整合位點(diǎn)1(Pim1)免疫試劑盒
運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單孢菌*磷化p21蛋白抗體Human GHAb(Anti-Growth Hormone Antibody) ELISA Kit人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(GLUT4)免疫試劑盒
短裙竹蓀東北變種*磷化周期檢測點(diǎn)激2抗體Human GPⅡb/Ⅲa(Plaet Membrane Glycoprotein Ⅱb/Ⅲa complex) ELISA Kit人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(GLUT3)免疫試劑盒
金黃殼囊孢磷化鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激2α抗體Human GHITM(Growth Hormone Inducible Transmembrane Protein) ELISA Kit人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)免疫試劑盒
乳桿菌磷化周期依賴性激2抗體Human GADL1(Glutamate Decarboxylase Like Protein 1) ELISA Kit人葡萄糖依賴性胰島釋放多肽(GIP)免疫試劑盒
長枝木霉磷化周期檢測點(diǎn)激1抗體Human GA(Glycated Albumin) ELISA Kit人葡萄糖激調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)免疫試劑盒
黑平188磷化P27抗體/周期依賴激抑制劑抗體Human GABA(Gamma-aminobutyric acid) ELISA Kit人葡萄糖激(GCK)免疫試劑盒
蛹蟲草Cordyceps│militaris 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級(jí)Bκ 輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε試劑盒車葉草苷
蝕脈鐮孢Fusarium│vasinfectum 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRB群鏈球菌多糖抗體試劑盒草
柔嫩艾美耳球蟲Eimeria│tenella 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCB-淋巴趨化因子1試劑盒橙黃決明-6-葡萄糖苷
DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑牛血紅蛋白
其他血紅蛋白(牛血);血紅朊;血球;血球質(zhì);血色蛋白;血色
英文名稱:Hb
其他英文名稱:Hemoglobin from bovine blood
產(chǎn)品規(guī)格:BR
包裝:1克/10克/100克
CAS號(hào):9008-02-0
分子量:~64500
級(jí)別:BR
含量(以N計(jì)):≥15.0%
干燥失重:≤10.0%
灼燒殘?jiān)?/span>≤2.0%
水溶解試驗(yàn):合格
紫外吸收度(406nm;0.125g/L;1cm):≥0.88
性狀:紅褐色粉末,是脊椎動(dòng)物紅血細(xì)胞的一種含鐵的復(fù)合變構(gòu)蛋白,由血紅和珠蛋白結(jié)合而成,珠蛋白約占96%,血紅占4%。含有四條多肽鏈,每個(gè)多肽鏈含有一個(gè)血紅基團(tuán),血紅中鐵為二價(jià),與氧結(jié)合時(shí),其化學(xué)價(jià)不變,形成氧合血紅蛋白。呈鮮紅色,與氧解離后帶有淡藍(lán)色
用途:生化研究??善萍?xì)胞壁。
保存:2~8℃