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詳細(xì)介紹
一、細(xì)胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號(hào) |
大鼠臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | A01X1759 |
二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三、使用方法
客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。
5)原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí)，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠外周血白細(xì)胞 | MHCC-97H人高轉(zhuǎn)移性肝癌細(xì)胞 |
肝腸鈣粘連蛋白重組兔單克隆抗體 | Cy5.5標(biāo)記的分選連接蛋白1抗體 |
LS1034人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的透明質(zhì)/玻璃抗體 |
LS174T人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的突觸融合結(jié)合蛋白6抗體 |
LS180人結(jié)直腸癌細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的補(bǔ)體C3抗體 |
LS513人結(jié)直腸癌細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3前蛋白抗體 |
LX-2人肝星形細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的鋅指蛋白658抗體 |
LX-2+GFP人肝星形細(xì)胞+GFP | Cy5.5標(biāo)記的高爾基體外周膜蛋白p65抗體 |
Mahlavu 人肝癌細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的滋養(yǎng)層細(xì)胞抗原3β-HSD抗體 |
MCF-10A人乳腺上皮細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的KYNU蛋白抗體 |
MCF-7人乳腺癌細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的整合樣金屬蛋白與凝血1型-7抗體 |
MCF-7/Adr人乳腺癌阿霉耐藥細(xì)胞 | 大鼠臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞Cy5.5標(biāo)記的絲氨甲基化mSHMT抗體 |
MCF-7+luc人乳腺癌細(xì)胞熒光標(biāo)記 | Cy5.5標(biāo)記的CoREST3蛋白抗體 |
MDA-KB2人乳腺細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的轉(zhuǎn)錄因子SOX17抗體 |
MGC-803人胃癌細(xì)胞 | Cy5.5標(biāo)記的遺傳性脈絡(luò)膜缺乏癥相關(guān)蛋白抗體 |
四、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請(qǐng)注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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