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Ki67細(xì)胞增殖檢測試劑盒(ICF/FACS法)

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更新時(shí)間:2022-04-20 10:34:00瀏覽次數(shù):354

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 20T
貨號(hào) FS-X9608 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研    
Ki67細(xì)胞增殖檢測試劑盒(ICF/FACS法)正在出售的產(chǎn)品:絲裂原活化蛋白激酶相互作用蛋白2抗體番茄苷 Fusidine
絲裂原活化蛋白激酶相互作用蛋白3抗體番茄紅素(標(biāo)準(zhǔn)品) 3-Iodo-L-tyrosine
磷化末端激酶1/2/3抗體番茄(標(biāo)準(zhǔn)品) Dess-Martin periodinane
磷化蛋白質(zhì)酪激酶JAK-1抗體番石榴苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Cidofovir
末端激酶2抗體番石榴葉

詳細(xì)介紹

操作規(guī)程:

1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。

5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×00

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)

中文名稱:Ki67細(xì)胞增殖檢測試劑盒(ICF/FACS法)

英文名稱:Ki67 cell proliferation Detection Kit

產(chǎn)品規(guī)格:20T

發(fā)貨周期:1~3天

Ki67 蛋白是細(xì)胞周期相關(guān)的一種核蛋白,主要表達(dá)于細(xì)胞增殖分裂的各個(gè)時(shí)期(G1、S、G2 和M 期),但是在靜息的細(xì)胞(G0 期)中不表達(dá)。Ki67 常用于檢測腫瘤細(xì)胞的生長指數(shù)(免疫組化法利用計(jì)算細(xì)胞總數(shù)中的Ki67 陽性細(xì)胞數(shù)所占比例得到Ki67 指數(shù))。

Ki67 通常通過標(biāo)記抗Ki67 的抗體(FITC 綠色熒光)和DNA 染料碘化丙啶(PI,紅色)而利用流式細(xì)胞儀檢測來實(shí)現(xiàn)對細(xì)胞周期的檢測。


操作方法

1. 在最適的環(huán)境下培養(yǎng)細(xì)胞。

2. 除去培養(yǎng)液,用PBS 洗一次。

3. 胰蛋白酶處理和收集細(xì)胞,離心,(注意1)保證每管細(xì)胞數(shù)在106 個(gè)。

4. 用0.3 ml PBS 輕輕的重懸細(xì)胞, 然后慢慢加入0.7 ml 預(yù)冷的100%乙醇。用1 ml 玻璃移液管小心的混勻。在4°C 至少1h。(注意2)

5. 沉淀細(xì)胞,*吸去上清。

6. 用150 μl PBS/1 % BSA 洗細(xì)胞2 次。

7. 用100μl 抗體孵育液(0.5% Tween-20/1%BSA/PBS)重懸細(xì)胞,加入1ul Ki67 抗體(1μg/106 cells),室溫孵育1 小時(shí)。

8. 離心收集細(xì)胞,用150μl1% BSA-PBS 洗2 次。

9. 離心收集細(xì)胞,用50μl 抗體孵育液重懸,加1μl (1.5μg/106 cells) 羊抗鼠IgG-FITC,室溫孵育30 分鐘。離心收集細(xì)胞,150μl PBS/ 1 % BSA 洗2 次。

10. 用含有終濃度為10 μg/ml RNase A 和20μg/ml PI 的0.5 ml PBS(pH7.4)重懸細(xì)胞。

11. 避光使細(xì)胞在室溫下孵育20min 后,離心收集細(xì)胞,150μl PBS/ 1 % BSA 洗2 次后,轉(zhuǎn)移至流式檢測管中重懸。

12. FACS 檢測或者儲(chǔ)存于4℃。
注意事項(xiàng):

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

抑制素βE(INHβE)elisa試劑盒英文名稱:INHβE ELISA Kit核糖體合成蛋白BOP1抗體包裝5g

抑制素βC(INHβC)elisa試劑盒英文名稱:INHβC ELISA Kit調(diào)節(jié)中心體分離早期相關(guān)激酶BORA抗體包裝1g

抑制素βB(INHβB)elisa試劑盒英文名稱:INHβB ELISA Kit萊姆病螺旋體抗體包裝5g

抑制素βA(INHβA)elisa試劑盒英文名稱:INHβA ELISA Kit成熟相關(guān)蛋白BOULE抗體包裝5mg

異戊烯半胱氧化酶1(PCYOX1)elisa試劑盒英文名稱:PCYOX1 ELISA Kit伸長因子結(jié)合蛋白抗體包裝100ml

乙酰羧化酶α(ACACα)elisa試劑盒英文名稱:ACACα ELISA Kit特異性堿性蛋白Y2抗體包裝25ml

乙脫氫酶7(ADH7)elisa試劑盒英文名稱:ADH7 ELISA Kit癌易感基因2相關(guān)蛋白抗體包裝1mg

乙脫氫酶1(ADH1)elisa試劑盒英文名稱:ADH1 ELISA Kit磷化癌易感基因1抗體包裝1g

胰腺再生蛋白Ⅳ(REG4)elisa試劑盒英文名稱:REG4 ELISA Kit磷化癌易感基因1抗體包裝5g

胰高血糖素樣肽1受體(GLP1R)elisa試劑盒英文名稱:GLP1R ELISA Kit磷化上皮鈣粘附分子抗體包裝100g

胰高血糖素樣肽1(GLP1)elisa試劑盒英文名稱:GLP1 ELISA Kit磷化癌易感基因1抗體包裝25g

胰多肽(PP)elisa試劑盒英文名稱:PP ELISA KitBRD2蛋白抗體包裝500g

胰淀素(IAPP)elisa試劑盒英文名稱:IAPP ELISA KitBRD3蛋白抗體包裝5g

胰淀粉酶α2(AMY2)elisa試劑盒英文名稱:AMY2 ELISA Kit磷化酪蛋白激酶6/腫瘤激酶抗體包裝1g

胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白7(IGFBP7)elisa試劑盒英文名稱:IGFBP7 ELISA Kit磷化蛋白酪激酶ATK抗體包裝250mg

去整合素樣金屬蛋白酶20抗體白介素21(IL21)Binimetinib (MEK162, ARRY-162, ARRY-438162) is a potent inhibitor of MEK1/2 with
Ki67細(xì)胞增殖檢測試劑盒(ICF/FACS法)

其他異煙酰肼;雷米風(fēng);利抓哉;γ-吡啶甲酰肼;4-吡啶乙酰肼;吡啶-4-甲酰肼;4-吡啶羧肼;4-吡啶甲酰肼;雷米封;

英文名稱:INAH

其他英文名稱:Isonicotinic acid hydrazide;Isoniazid; Pyridine-4-carbohydrazide

產(chǎn)品規(guī)格:BR,98%

包裝:100克

CAS號(hào):54-85-3

C6H7N3O=137.1

級(jí)別:BR

含量:≥98.0%

PH:6.8~8.0

熔點(diǎn):171.2~172.5℃

重金屬:≤10ppm

用途:生化研究。晶狀體醛糖還原酶的抑制劑。也用作食品抗氧劑和色素

保存:RT,避光

 


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