中文名稱:細(xì)胞活力(活死細(xì)胞染色)檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Live & Dead Viability/Cytotoxicity Assay Kit for Animal Cells
產(chǎn)品規(guī)格:1000T
發(fā)貨周期:1~3天
本試劑盒為動(dòng)物細(xì)胞死活檢測(cè)提供了雙色熒光染色方法。本試劑盒采用兩種廣泛常用的熒光探針,通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)酯酶活性和質(zhì)膜完整性兩個(gè)方面反映細(xì)胞活力。本試劑盒適用于熒光顯微鏡、熒光多孔板、掃描儀、流式細(xì)胞儀以及其他熒光檢測(cè)系統(tǒng)。本試劑盒可以應(yīng)用于大多數(shù)的真核哺乳動(dòng)物細(xì)胞,包括貼壁細(xì)胞核某些組織,但不適用與細(xì)菌、酵母。該方法更快捷安全且靈敏度更高。 |
原理:在鈣黃素AM 存在活細(xì)胞內(nèi)時(shí),其特點(diǎn)就是由于胞內(nèi)的酯酶活性作用,由幾乎無(wú)熒光、具有細(xì)胞膜透性的鈣黃素AM生成具有強(qiáng)烈熒光信號(hào)的綠色熒光物質(zhì)(Ex/Em:495nm/520nm)。而對(duì)于受損的細(xì)胞膜來(lái)說(shuō),碘化丙啶(PI)可以傳過(guò)進(jìn)入細(xì)胞,與核酸結(jié)合,熒光信號(hào)從而放大40 倍,產(chǎn)生一個(gè)明亮的紅色熒光信號(hào)的死細(xì)胞(Ex/Em:530nm/620nm)。
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6(IGFBP6)elisa試劑盒英文名稱:IGFBP6 ELISA Kit磷化EGF應(yīng)答因子1抗體包裝25g
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胰島素樣蛋白5(INSL5)elisa試劑盒英文名稱:INSL5 ELISA Kit嗜乳脂蛋白2亞型A1抗體包裝5g
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胰島素受體底物2(IRS2)elisa試劑盒英文名稱:IRS2 ELISA Kit磷化c-fos抗體包裝25g
胰島素受體底物1(IRS1)elisa試劑盒英文名稱:IRS1 ELISA Kit磷化原癌基因c-Jun抗體包裝500g
胰島素受體(ISR)elisa試劑盒英文名稱:ISR ELISA Kit磷化原癌基因c-kit抗體包裝5ml
一氧化氮合酶運(yùn)輸因子(NOSTRIN)elisa試劑盒英文名稱:NOSTRIN ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框148抗體包裝1g
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去整合素樣金屬蛋白酶23抗體白介素21(IL21)MK-801 (Dizocilpine) is a potent N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptor antagonist
細(xì)胞活力(活死細(xì)胞染色)檢測(cè)試劑盒異香蘭
其他 3-羥基-4-甲氧基甲;異香草;原兒茶-4-甲基醚;原兒茶-4-甲醚
英文名稱: Isovanillic acid
其他英文名稱: 3-Hydroxy-4-methoxybenzoic acid
產(chǎn)品規(guī)格: BR,99%
包 裝: 5克/25克/100克
CAS號(hào):645-08-9
C8H8O4=168.15
級(jí)別:BR
含量:≥99.0%
熔點(diǎn):245~251℃
性狀:灰棕色粉末或結(jié)晶。易溶于乙,難溶于水。有升華性。
用途:生化研究。有機(jī)合成
保存:RT
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)